本文關(guān)鍵詞：典型有機氯、苯并咪唑類和三唑類農(nóng)藥的生殖內(nèi)分泌毒性研究

  更多相關(guān)文章： 有機氯農(nóng)藥 苯并咪唑類殺菌劑 三唑類殺菌劑 垂體促性腺細胞 胎盤滋養(yǎng)層細胞 細胞毒性 內(nèi)分泌干擾

【摘要】：在全世界范圍內(nèi),農(nóng)藥大量應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、室內(nèi)環(huán)境、公共衛(wèi)生等方面。由于農(nóng)藥被人為的釋放到環(huán)境中,從而導致食物、水、土壤、大氣受到污染,經(jīng)常能在生物體內(nèi)和環(huán)境介質(zhì)中檢測到許多農(nóng)藥殘留。越來越多的研究表明,農(nóng)藥作為一類內(nèi)分泌干擾物能影響野生動物和人類的內(nèi)分泌系統(tǒng),導致出生缺陷以及生殖和發(fā)育障礙等,因此,農(nóng)藥對人類和野生動物生殖健康的風險一直備受關(guān)注。促性腺激素在調(diào)控脊椎動物的生殖功能和性腺發(fā)育過程中起重要作用,它由卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)構(gòu)成,由垂體促性腺細胞分泌,受促性腺激素釋放激素(GnRH)調(diào)控。流行病學調(diào)查表明,人體內(nèi)的FSH和LH水平與有機氯農(nóng)藥的暴露水平存在顯著正相關(guān),然而,在環(huán)境暴露水平上有機氯農(nóng)藥對促性腺激素合成的影響機制尚未報道。動物實驗研究表明,苯并咪唑類和三唑類等農(nóng)藥能導致動物胚胎著床失敗、胚胎重吸收、胚胎死亡,說明這些農(nóng)藥對胎盤存在一定的毒性效應(yīng)。胎盤是妊娠期間的一個特異的內(nèi)分泌器官,在維持妊娠和胎兒發(fā)育過程中起重要作用。然而,農(nóng)藥對胎盤毒性效應(yīng)的機制少有報道。本研究利用小鼠垂體瘤細胞系LβT2細胞作為體外模型,檢測了有機氯殺蟲劑對促性腺激素亞基基因轉(zhuǎn)錄和激素合成的影響。利用人胎盤滋養(yǎng)層細胞檢測了苯并咪唑類殺菌劑和三唑類殺菌劑對該細胞的的細胞毒性、細胞周期、細胞遷移和侵潤以及調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)錄的影響。本論文研究內(nèi)容主要包括以下三部分：(1)已有研究表明,暴露DDT類似物能導致FSH和LH分泌失調(diào),促性腺激素(FSHβ, LHβ and Cga)基因轉(zhuǎn)錄的快慢決定了FSH和LH合成速度,然而DDT類似物對促性腺激素基因表達的影響機制未知,因此,本論文檢測了p,p'-DDT,o,p'-DDT,p,p'-DDE和MXC對垂體促性腺激素基因轉(zhuǎn)錄及激素合成的影響。結(jié)果表明,p,p'-DDT和MXC在實驗濃度10-9-10-7 mol/L下,能刺激促性腺激素基因轉(zhuǎn)錄和激素分泌并且存在劑量效應(yīng)關(guān)系,這種刺激作用是通過ERK信號通路實現(xiàn)。本研究表明p,p'-DDT和MXC刺激垂體細胞促性腺激素基因轉(zhuǎn)錄和激素合成是通過ERK途徑調(diào)節(jié)。(2)苯菌靈和多菌靈屬于苯并咪唑類殺菌劑,被全世界廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)真菌性病害的防治。這兩種殺菌劑能通過食物、呼吸、職業(yè)暴露等途徑進入人體,從而給人類健康帶來一定的危害。然而,目前尚未有關(guān)于苯菌靈和多菌靈對人胎盤毒性效應(yīng)的報道。因此本研究利用人胎盤滋養(yǎng)層細胞HTR-8/SVneo (HTR-8)來評價苯菌靈和多菌靈對胎盤的毒性效應(yīng)。結(jié)果表明這兩種殺菌劑能降低HTR-8的細胞活性,減少滋養(yǎng)層細胞G0/G1期的百分比,誘導細胞發(fā)生凋亡,也能抑制細胞的侵潤、遷移能力。通過進一步研究還發(fā)現(xiàn)這兩種殺菌劑能顯著改變侵潤相關(guān)蛋白酶系MMPs/TIMPs和uPA/PAI-1的基因轉(zhuǎn)錄,也能改變HTR-8細胞中粘附分子整合素α5亞基和整合素p1亞基的基因轉(zhuǎn)錄。(3)三唑類殺菌劑使用非常廣泛,是目前使用量排名前十的農(nóng)藥之一。盡管三唑類殺菌劑對哺乳動物有生殖毒性,但是目前很少有數(shù)據(jù)顯示該類殺菌劑能影響人胎盤的功能。戊唑醇是三唑類農(nóng)藥常用的一種殺菌劑,廣泛用于農(nóng)業(yè)真菌性病害的防控。本文研究結(jié)果顯示,暴露戊唑醇抑制了人胎盤滋養(yǎng)層細胞HTR-8的增殖,使該細胞在G1期和G2期百分比升高,也能誘導該細胞凋亡。在蛋白水平上,戊唑醇能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表達,同時也能誘導促凋亡蛋白Bax表達水平的上升,這表明該殺菌劑通過線粒體途徑誘導胎盤滋養(yǎng)層細胞凋亡,戊唑醇也顯著降低了滋養(yǎng)層細胞的侵潤和遷移能力。戊唑醇能干擾胎盤主要功能基因的的轉(zhuǎn)錄,這些功能基因包括MMP-2、MMP-9、TIMP-1、 TIMP-2、uPA、PAI-I、VEGF、PIGF、α-hCG、β-hCG、HB-EGF和TNF-α。由此可見,戊唑醇通過干擾胎盤侵潤相關(guān)蛋白酶系、激素、血管生長因子、生長因子和細胞因子,從而抑制人胎盤滋養(yǎng)層細胞侵潤。由于滋養(yǎng)層的侵潤和遷移能力對成功妊娠和胎兒發(fā)育有重要作用,本研究結(jié)果提示三唑類殺菌劑暴露對人類妊娠存在潛在風險。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：X592

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 賀敏;羅梅梅;王紀華;馬智宏;劉宇;王守現(xiàn);;3種殺菌劑在北京林地食用菌中的殘留與安全性評價[J];食品科學;2015年04期

2 鄭志琴;魏朝俊;張志勇;賈臨芳;梁丹;趙建莊;;多菌靈在草莓與土壤中的殘留動態(tài)研究[J];農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報;2010年10期

3 張玉婷;郭永澤;劉磊;宋淑榮;邵輝;;50%多菌靈WP在小麥和土壤中殘留動態(tài)研究[J];天津農(nóng)業(yè)科學;2007年04期

，

本文編號：1306590