發(fā)布時間：2017-12-17 00:17

  本文關(guān)鍵詞：氟啶胺對蕓薹根腫菌的作用方式及防治大白菜根腫病新技術(shù)研究

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【摘要】：由蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae)引起的大白菜根腫病是一種土傳病害,在我國大白菜種植區(qū)發(fā)生嚴重,造成了巨大的經(jīng)濟損失。目前生產(chǎn)上缺乏有效的抗病品種,化學(xué)防治仍是預(yù)防和控制根腫病的有效途徑。本論文圍繞大白菜根腫病防治藥劑篩選模型、氟啶胺對根腫菌的作用方式、熒光雙重染色和流式細胞術(shù)結(jié)合鑒定根腫菌休眠孢子活力技術(shù)及根腫病的田間定點防治技術(shù)展開了詳細的研究,并提出一套完整的根腫病定點防治方案,主要研究進展如下：1.建立了大白菜根腫病防治藥劑活體微量篩選模型,利用該模型篩選出5種根腫病有效防治藥劑。發(fā)病腫根室溫腐爛一周后制備的根腫菌,每毫升基質(zhì)接種3×103個休眠孢子,再拌藥制備帶菌藥土,大白菜種子直播在帶菌藥土中,置于日光溫室培養(yǎng),每天18：00-22：00使用植物補光燈補光,每天用pH 6.0的水灌溉,接種40 d后調(diào)查發(fā)病情況。利用該模型篩選出吡唑醚菌酯、吲唑磺菌胺、氟啶胺、百菌清和氰霜唑等對大白菜根腫病有效的藥劑。2.建立了基于熒光雙重染色與流式細胞術(shù)(FCM)結(jié)合檢測根腫菌休眠孢子活力新技術(shù)。熒光染料Hoechst 33258工作濃度10μg/ml口PI5μg/ ml室溫下分別染色15 min和5 min后,根腫菌活孢子發(fā)藍色熒光,死孢子發(fā)紅色熒光。利用FCM技術(shù)可以快速準(zhǔn)確地定量檢測根腫菌休眠孢子的死活,檢測效率為4萬個孢子/min。熒光雙染技術(shù)檢測氟啶胺1 a.i.mg/1對根腫菌休眠孢子無致死作用。3.初步明確氟啶胺對根腫菌的主要作用方式為抑制休眠孢子萌發(fā)及活力,進而抑制根毛侵染、皮層侵染和腫根形成。氟啶胺1 a.i.mg/1對休眠孢子萌發(fā)及活力的抑制率分別為94.73%和92.71%。氟啶胺對根腫菌的作用以預(yù)防為主,氟啶胺3 a.i.mg/1基質(zhì)拌藥對根毛侵染和皮層侵染7d的根腫病具有治療作用。4.明確了蕓薹根腫菌對大白菜根組織根毛侵染和皮層侵染的過程及時期,為根腫病的防治提供了理論依據(jù)。曲利苯藍透明染色法比苯胺藍染色法更適合研究根腫菌的侵染。接種4d和7d的根系經(jīng)曲利苯藍透明染色后發(fā)現(xiàn)有大量根毛侵染和早期少量的皮層侵染,使用氟啶胺可以對早期侵染進行治療。接種14 d皮層侵染和次級游動孢子增多,腫根開始形成,此時再使用氟啶胺治療沒有效果。5.首次發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯對大白菜根腫病具有良好的防效,并對早期根毛侵染具有治療作用。盆栽試驗表明,吡唑醚菌酯30 a.i.mg/1基質(zhì)灌藥和拌藥對大白菜根腫病的防效分別為87.50%和95.83%。6.建立了傅立葉變換紅外光譜定量檢測根腫菌技術(shù)。通過分析蕓薹根腫菌、大白菜發(fā)病腫根和健康根的FTIR光譜,選擇了1105、1145和1228 cm-1三個根腫菌檢測的特異性譜帶,利用這三個譜帶的峰面積值,建立了FTIR定量檢測根腫菌的模型y=34.17+12.24x1-9.81x2-6.05x3,相關(guān)系數(shù)r=0.98(p0.05)。試驗構(gòu)建的線性模型測定效果良好,可以根據(jù)大白菜根部樣本的紅外光譜,判斷蕓薹根腫菌的含量。7.研制出防治根腫病的1%氟啶胺顆粒劑和10%氟啶胺粉劑。1%氟啶胺顆粒劑適合田間撒施使用,操作簡便,2012年在湖北長陽的田間小區(qū)試驗中,氟啶胺顆粒劑6 a.i.g/667m2施藥對大白菜根腫病的防效為41.43%。10%氟啶胺粉劑拌基質(zhì)制備藥土,移栽時在定植穴內(nèi)撒施藥土使用,2012年在湖北長陽、山東青島和河南新野的田間小區(qū)試驗中,氟啶胺粉劑10a.i.mg/l基質(zhì)拌藥對大白菜根腫病的防效分別為83.63%、71.43%和68.56%。8.提出具有自主知識產(chǎn)權(quán)的大白菜根腫病定點防治技術(shù),經(jīng)3年12地田間小區(qū)試驗取得了良好的田間控病效果。定點防治技術(shù)操作流程為：10%氟啶胺粉劑拌入基質(zhì)制成防治根腫病專用基質(zhì),裝入可降解的紙筒(5 cm× 7 cm)或無紡布袋(7 cm ×11 cm),并將大白菜種子播入紙筒或袋中育苗,20 d后連同紙筒或袋一起定植到田中。溫室模擬試驗表明,含藥基質(zhì)無紡布袋育苗移栽對根腫病的防效最好,且對大白菜幼苗安全性高。氟啶胺在土壤中穩(wěn)定,施藥102 d后檢測其分解量為初始添加量的71.91%。以氟啶胺粉劑3 a.i.mg/1基質(zhì)紙筒育苗,2012-2013年在云南通海、河南新野和西藏拉薩田間小區(qū)試驗,對大白菜根腫病的防效為63.75%-70.56%；在山東青島、遼寧丹東和福建福州田間小區(qū)試驗,對甘藍根腫病的防效為53.06%-75.92%。以氟啶胺粉劑10 a.i.mg/1基質(zhì)無紡布袋育苗,2014年在四川成都、遼寧丹東和山東青島田間小區(qū)試驗,對大白菜根腫病的防效為81.56%-89.30%；在河南新野、陜西太白和重慶武隆田間小區(qū)試驗,對甘藍根腫病的防效為80.67%-87.37%。本研究針對我國十字花科作物根腫病發(fā)生情況嚴重,建立了防治大白菜根腫病的活體微量篩選模型,篩選出氟啶胺和吡唑醚菌酯等5種有效藥劑,建立了檢測根腫菌休眠孢子活力的熒光雙重染色和FCM新技術(shù),建立了傅立葉變換紅外光譜定量檢測根腫菌技術(shù),根據(jù)觀察根腫菌侵染過程提出了使用紙筒或無紡布袋裝含藥基質(zhì)育苗的大白菜根腫病定點防治新技術(shù),實現(xiàn)苗期一次用藥保護作物整個生長期,同時解決了藥劑流失及環(huán)境污染等問題,對控制我國十字花科根腫病日益猖獗的局面具有很好的實踐意義。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S436.341.19

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本文編號：1298020