本文關(guān)鍵詞：和田黑雞和三黃雞FABP基因多態(tài)性與IMF含量相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： 和田黑雞 A-FABP基因 H-FABP基因 多態(tài)性 肌內(nèi)脂肪

【摘要】：2010年,和田黑雞被列入《國家畜禽遺傳資源保護(hù)名錄》。和田黑雞生命力強(qiáng),抗逆抗病性強(qiáng),高溫耐受力強(qiáng),適應(yīng)性強(qiáng),耐寒能力突出,成活率高,肉質(zhì)鮮美,風(fēng)味獨(dú)特,是一種優(yōu)質(zhì)的蛋肉兼用地方品種。由于缺乏系統(tǒng)的育種指導(dǎo),導(dǎo)致品種優(yōu)良特性日漸退化。肌內(nèi)脂肪(IMF)含量主要影響肌肉的風(fēng)味、嫩度和多汁性,而脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)和心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)基因是影響IMF沉積最重要的兩個(gè)基因。本研究擬檢測兩種基因的多態(tài)性并與IMF進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,以期獲得有價(jià)值的多態(tài)位點(diǎn),指導(dǎo)育種工作；同時(shí)分析兩種基因mRNA表達(dá)量與IMF含量相關(guān)性,為研究IMF的調(diào)控奠定基礎(chǔ)。因此,本研究按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 14772-2008采用索氏抽提法對(duì)三黃雞和和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中IMF含量進(jìn)行測定,結(jié)果顯示,在三黃雞和和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中,都是以心肌中IMF含量最高,且與胸肌和腿肌中IMF含量差異均極顯著；IMF在和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中的含量均顯著高于三黃雞。用PCR的方法擴(kuò)增得到了和田黑雞A-FABP和H-FABP基因CDs序列,結(jié)果顯示,和田黑雞A-FABP和H-FABP基因CDs分別編碼132和133個(gè)氨基酸。用PCR-SSCP的方法對(duì)三黃雞和和田黑雞A-FABP和H-FABP基因外顯子多態(tài)性進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,在三黃雞和和田黑雞A-FABP基因第一外顯子均檢測到一個(gè)C51T突變位點(diǎn),與IMF含量關(guān)聯(lián)分析顯示,該位點(diǎn)可以作為選育胸肌中高IMF含量和田黑雞的遺傳標(biāo)記；在三黃雞和和田黑雞H-FABP基因第外二顯子均檢測到G939A, G982A和C1014T三個(gè)突變位點(diǎn),與IMF含量關(guān)聯(lián)分析顯示,G982A也可以作為選育胸肌中高IMF含量和田黑雞的遺傳標(biāo)記。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法對(duì)三黃雞和和田黑雞A-FABP和H-FABP基因mRNA表達(dá)量進(jìn)行了檢測,結(jié)果顯示,和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中A-FABP基因mRNA表達(dá)量均高于三黃雞,但顯著性差異僅在腿肌中表現(xiàn)出來,三黃雞和和田黑雞腿肌中A-FABP基因mRNA表達(dá)量均極顯著地高于心肌和胸肌,三黃雞與和田黑雞胸肌和腿肌中A-FABP基因mRNA表達(dá)量與IMF含量呈顯著的正相關(guān)；三黃雞心肌中H-FABP基因mRNA表達(dá)量極顯著地高于和田黑雞,在胸肌中低于和田黑雞,在腿肌中顯著地高于和田黑雞；三黃雞心肌中H-FABP基因mRNA表達(dá)量顯著地高于胸肌和腿肌,腿肌中H-FABP基因mRNA表達(dá)量也顯著地高于胸肌；三黃雞心肌和胸肌中H-FABP基因mRNA表達(dá)量與IMF含量呈顯著負(fù)相關(guān),和田黑雞心肌,胸肌和腿肌H-FABP基因mRNA表達(dá)量與IMF含量呈顯著的負(fù)相關(guān)。用Western blot的方法對(duì)三黃雞和和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中H-FABP蛋白表達(dá)量進(jìn)行了檢測,結(jié)果顯示,三黃雞心肌中H-FABP蛋白表達(dá)量高于和田黑雞,胸肌中H-FABP蛋白表達(dá)量低于和田黑雞,腿肌中H-FABP蛋白表達(dá)量高于和田黑雞,但未顯示出顯著性差異。用免疫組化的方法對(duì)三黃雞和和田黑雞心肌、胸肌和腿肌中H-FABP蛋白表達(dá)進(jìn)行了檢測,結(jié)果顯示,H-FABP蛋白在三黃雞和和田黑雞三種組織的細(xì)胞漿中表達(dá)。A-FABP基因的C51T和H-FABP基因的G982A兩個(gè)位點(diǎn)都可以作為選育胸肌中高IMF含量和田黑雞的遺傳標(biāo)記；A-FABP和H-FABP基因mRNA表達(dá)量與IMF含量在和田黑雞胸肌和腿肌中分別呈顯著的正相關(guān)和負(fù)相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S831

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