發(fā)布時間：2017-09-21 09:00

  本文關(guān)鍵詞：腸易激綜合征患者免疫功能與腸道菌群變化的相關(guān)性研究

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【摘要】：研究背景:腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一種胃腸道功能紊亂性疾病,以長期的腹痛、腹脹且伴隨著排便習(xí)慣改變?yōu)橹饕≌?并在排除胃腸道器質(zhì)性病變后才能診斷。IBS也是全球人群患病率較高的疾病,并呈現(xiàn)逐年增加的趨勢。由于該病病因目前仍未明確,缺乏客觀形象的形態(tài)學(xué)改變和相關(guān)生化指標(biāo)的異常改變,就使得它的診斷與治療面臨著些許困難。據(jù)統(tǒng)計,在西方國家IBS的患病率高達10%-20%,在我國也有10%的人群因為IBS帶來的影響而降低了生活質(zhì)量。據(jù)統(tǒng)計,IBS在中青年的發(fā)病率要高于老年人,而女性、男性患病人數(shù)的比例為2:1。IBS的癥狀復(fù)雜且多變,會長期反復(fù)發(fā)作,給生活帶來的影響越發(fā)引起了人們的廣泛關(guān)注,很多臨床及實驗研究主要圍繞IBS的病因而展開,并根據(jù)其發(fā)病機制來制定有效的治療方案。目前IBS病因仍不明確,據(jù)報道,可能與腸道動力紊亂、精神心理因素、內(nèi)臟感覺異常、腦-腸軸、以及遺傳等因素有關(guān)。近年來發(fā)現(xiàn)IBS的發(fā)病與免疫功能的變化和腸道菌群的變化有關(guān),但是具體關(guān)聯(lián)所見的報道較少。本研究的目的就是探討IBS患者免疫功能與腸道菌群的相關(guān)性。目的:1.通過對比IBS和健康人群的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、粒細(xì)胞百分比的差異性,探討IBS患者免疫細(xì)胞指標(biāo)的特異性變化。2.通過對比分析IBS患者與健康人群腸道菌群特性和多樣性變化,來討論腸道菌群失調(diào)對IBS的可能影響。方法:1.病例選擇:按照羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)確定IBS病例,并收集IBS患者的糞便樣本,同時采集健康體檢者的糞便樣本作為對照。ibs組來自大連市大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院2014年4月—2014年9月期間在消化科病房住院的ibs患者24例,年齡在21-70歲不等。其中男性標(biāo)本10例,女性14例。2.糞便樣本采集:所有標(biāo)本均取自被選ibs患者在清晨自然排出的新鮮無污染糞便,用一次性器具挑取5g左右,置入環(huán)氧乙烷消毒過的大便標(biāo)本盒內(nèi),并立即密封標(biāo)本放置于-80℃中冷凍。采集過程時間嚴(yán)格控制在30min以內(nèi),為腸道菌群分析做好準(zhǔn)備。3.血液樣本采集:采用真空采血法,在清晨空腹的狀態(tài)下抽取ibs患者的靜脈血2ml并注入edta-k2的抗凝管中(采血前一天應(yīng)與患者說明晚上十點后至次日清晨采血前需要禁食水,且采血前不要做劇烈運動,避免外界刺激),輕輕混勻后立即送往檢驗科進行血常規(guī)檢測(檢測白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、粒細(xì)胞百分比),機器型號為sysmexxe-2100全自動血液分析儀。4.檢測ibs患者的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、粒細(xì)胞百分比值,并與健康人群參考值做對比。5.利用pcr-dgge指紋圖譜技術(shù)分析ibs患者和健康人群腸道菌群間的差異。6.統(tǒng)計學(xué)方法:利用spss19.0、quantityone4.6.2、imagelab、canoco4.5等軟件進行。結(jié)果:1.ibs患者的免疫學(xué)細(xì)胞的變化ibs患者免疫功能與健康人群相比,ibs患者的白細(xì)胞總數(shù)(wbc)、淋巴細(xì)胞百分比(ly%)、單核細(xì)胞百分比(mo%)明顯降低(p0.05),但粒細(xì)胞百分比(neu%)沒有顯著差異。2.ibs患者腸道菌群的變化ibs患者腸道菌群與健康人群相比,ibs患者的糞便標(biāo)本條帶數(shù)為19.00±2.83,健康對照組條帶數(shù)為26.79±3.46,從電泳圖譜條帶數(shù)看,ibs患者明顯低于健康對照組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。從主成分分析結(jié)果可以看出,ibs患者的菌群與健康對照組形成較為明顯的兩個聚類群。結(jié)論:1.與健康人群相比,IBS患者的免疫細(xì)胞數(shù)減少,白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比都有顯著差異。2.IBS患者存在腸道菌群失調(diào),且腸道菌群的生物多樣性減低。3.IBS患者腸道菌群多樣性的減少的同時,患者的免疫細(xì)胞水平也降低,可能是由于菌群影響了其免疫功能而導(dǎo)致IBS的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：腸易激綜合征 細(xì)胞免疫 腸道菌群
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R574.4
【目錄】：

• 摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-14
• 材料和方法14-21
• 一、材料14-16
• 1.標(biāo)本采集14-15
• 2.主要試劑15
• 3 主要實驗儀器15-16
• 4.分析軟件16
• 二、方法16-21
• 1.病例選擇16-18
• 2. 主要溶液配置18
• 3.糞便基因組的DNA提取18-19
• 4. PCR-DGGE分析19-21
• 結(jié)果21-26
• 1. IBS患者的免疫學(xué)細(xì)胞的變化21-23
• 2. DGGE圖譜分析23-25
• 3. 主成分分析(PCA)25-26
• 討論26-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻29-31
• 綜述31-39
• 參考文獻37-39
• 致謝39-40

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