發(fā)布時間：2017-08-11 01:17

  本文關(guān)鍵詞：通腑解毒法對腦卒中大鼠胃腸病理變化及Cajal細胞相關(guān)性的研究

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【摘要】：目的:本課題主要就急性缺血性腦卒中即急性腦梗死后胃腸功能異常展開討論。腑氣不通是急性缺血性中風的重要并發(fā)癥,亦是中風的誘發(fā)因素。中風的風、火、痰、瘀等致病因素皆可蘊積化毒,毒邪亦可致中風。故應用通腑解毒法是治療腑氣不通兼毒型中風的常用治療原則。Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of Cajal,ICC)存在于胃腸道之中,具有胃腸電起搏功能。急性缺血性腦卒中后引起胃腸功能改變可能與胃腸Cajal形態(tài)及功能的變化成相關(guān)性。本課題在中醫(yī)理論的指導下應用中藥大黃干預,了解通腑解毒法改善卒中后胃腸功能障礙的作用機制,及觀察Cajal間質(zhì)細胞的變化情況。1觀察急性缺血性腦卒中模型下大鼠胃腸的病理變化。2了解該模型下大鼠胃腸ICC的結(jié)構(gòu)及病理變化,探討急性缺血性腦卒中合并胃腸功能障礙的潛在的發(fā)病機制。3中醫(yī)理論的指導下應用中藥大黃干預,了解通腑解毒法改善卒中后胃腸功能障礙的機制。4討論運用通腑解毒法治療急性缺血性腦卒中后胃腸功能紊亂的可行性分析。方法:本研究采用線栓法制備大腦中動脈栓塞(MCAO)大鼠模型,取以SPF級Wister雄性大鼠108只為實驗對象,以通腑解毒法為主要治則,選用中藥大黃為主要干預藥物,西藥以多潘立酮進行藥物對比,將實驗大鼠隨機分為大黃顆粒高劑量組,大黃顆粒中劑量組,多潘立酮組。并建立正常組大鼠、假手術(shù)組大鼠及模型組大鼠作為對照。每組6只,對假手術(shù)組、模型組、大黃顆粒高劑量組、大黃顆粒中劑量組、多潘立酮組大鼠分別進行24h、4d及7d大鼠神經(jīng)功能缺損情況(以longa評分為標準)觀察,主要探討應用通腑解毒法觀察缺血性腦卒中大鼠胃腸Cajal間質(zhì)細胞的內(nèi)部變化情況,觀察造模后胃腸粘膜的變化及胃腸激素之P物質(zhì)(SP)和生長抑素(SS)的狀態(tài),以進一步評估通腑解毒法的作用效果及從細胞學角度探討Cajal細胞的內(nèi)在作用機理。結(jié)果:1.成功的建立大鼠大腦中動脈栓塞模型。中藥用大黃干預,將大黃顆粒分高中劑量組,西藥用多潘立酮對比,生理鹽水用于假手術(shù)組、正常組及模型組中,每日灌胃,于24h,4d,7d后成功摘取實驗大鼠胃腸組織,及時置于固定液中送檢。做好標本進行針對性的觀察。2.病理觀察結(jié)果:2.1.肉眼觀察:模型組大鼠胃腸粘膜可出現(xiàn)出血點或潰瘍點等損害,有典型的食積表現(xiàn),7d組重于4d組;大黃顆粒高、中劑量組、正常組,假手術(shù)組偶可見潰瘍、出血、及糜爛等損害,但從數(shù)量上及程度上較模型組少。2.2.光鏡觀察:在光鏡下觀察模型組大鼠胃腸粘膜有大量的炎細胞浸潤,粘膜及粘膜下層明顯充血、水腫;7d組損害較4d組明顯。大黃高劑量及大黃中劑量組的胃腸粘膜仍可見上述粘膜損害,但程度較同時間段模型組減輕,改善程度大小依次為大黃高劑量組大黃中劑量組多潘立酮組假手術(shù)組模型組。2.3.透射電鏡(TEM)觀察:在透射電鏡下觀察Cajal結(jié)構(gòu)變化。藥物干預后觀察細胞核染色質(zhì)、線粒體、縫隙連接、細胞膜、細胞器膜的結(jié)構(gòu)變化情況。發(fā)現(xiàn):縫隙連接變化情況依次是多潘立酮組大黃顆粒中劑量組大黃顆粒高劑量組假手術(shù)組模型組。2.4.免疫組化組:分別對大黃顆粒高劑量組,大黃顆粒中劑量組,多潘立酮組,假手術(shù)組及模型組進行免疫組化,觀察胃腸激素之P物質(zhì)及生長抑素的變化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),胃腸粘膜P物質(zhì)變化情況:模型組多潘立酮組大黃顆粒中劑量組大黃顆粒高劑量組假手術(shù)組正常組。生長抑素變化情況:模型組假手術(shù)組多潘立酮組大黃顆粒中劑量組大黃顆粒高劑量組正常組。結(jié)論:胃腸道功能障礙是缺血性腦中風急性期的常見并發(fā)癥之一。中醫(yī)的通腑解毒法在治療缺血性腦卒中急性期并發(fā)胃腸功能紊亂方面有效,更證明了大黃的獨特的作用優(yōu)勢。大黃能夠有效干預胃腸道功能損害,療效與劑量存在相關(guān)性。實驗中發(fā)現(xiàn)Cajal細胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)的明顯變化,說明急性缺血性腦卒中后胃腸功能改變與胃腸起搏細胞Cajal密切相關(guān),其中胃腸激素中的P物質(zhì)及生長激素也可能是潛在的發(fā)病機制。1、急性缺血性腦卒中大鼠存在胃粘膜形態(tài)學的病理變化。2、胃腸Cajal間質(zhì)細胞結(jié)構(gòu)與功能的變化可能是導致急性缺血性腦卒中胃腸功能障礙的發(fā)生機制之一。3、大黃對急性缺血性腦卒中后胃腸功能障礙的治療作用可能與改善胃腸Cajal間質(zhì)細胞的結(jié)構(gòu)與功能有關(guān)。4、運用通腑解毒法治療急性缺血性腦卒中后胃腸功能紊亂行之有效。
【關(guān)鍵詞】：通腑解毒法 大黃 急性缺血性腦卒中 胃腸功能障礙 胃腸Cajal細胞
【學位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R277.7
【目錄】：

• 提要3-6
• Abstract6-12
• 引言12-14
• 第一部分 理論研究14-19
• 一 腦腸相通理論的研究14-15
• 二 毒邪致病學說體制15-17
• 三 通腑與解毒聯(lián)合大法17
• 四 大黃的相關(guān)文獻研究17-19
• 第二部分 實驗研究19-28
• （一）材料19-20
• 1 實驗動物19
• 2 實驗藥品19
• 3 實驗試劑19
• 4 實驗儀器與器械19-20
• （二）方法20-24
• 1．大鼠急性腦梗死模型的制備方法（即大腦中動脈栓塞模型MCAO模型）20-21
• 2.實驗分組21
• 3.給藥方法21-22
• 4.動物處死方法及取材22
• 5．標本處理方法22-23
• 5.1 石蠟組織切片制備22
• 5.2 HE染色22-23
• 5.3 免疫組化標本制備23
• 5.4 電鏡標本制備23
• 6．大鼠腹腔解剖觀察23
• 7．肉眼觀察大鼠胃腸粘膜23
• 8．評分標準23-24
• 8.1 HE染色后胃腸粘膜組織形態(tài)學觀察及評分23-24
• 8.2 免疫組化評分標準24
• （三）數(shù)據(jù)處理24
• （四）結(jié)果24-27
• 1.標本觀察24-26
• 2.各組大鼠胃腸組織病理形態(tài)學改變的結(jié)果評分26-27
• 2.1 各組大鼠胃組織病理形態(tài)學變化統(tǒng)計評分26
• 2.2 各組大鼠小腸組織病理形態(tài)學變化統(tǒng)計評分26
• 2.3 各組大鼠胃腸生長抑素變化情況統(tǒng)計評分26-27
• 2.4 各組大鼠胃腸P物質(zhì)變化情況統(tǒng)計評分27
• （五）結(jié)論27-28
• 第三部分 討論28-32
• 一 本實驗總結(jié)模型制備經(jīng)驗28-29
• 二 對照組藥物多潘立酮的選擇理由29-30
• 三 胃腸激素之P物質(zhì)與生長抑素30
• 1．P物質(zhì)30
• 2．生長抑素（Somatostatin,SS）30
• 四 大黃的現(xiàn)代藥理學研究30-31
• 五 本課題的創(chuàng)新點31-32
• 結(jié)語32-33
• 參考文獻33-36
• 論文綜述36-43
• 參考文獻40-43
• 附圖43-52
• 附錄52-53
• 實驗表格53-54
• 致謝54-55
• 論文著作55-59
• 詳細摘要59-66

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本文編號：653570