發(fā)布時間：2017-06-13 18:06

  本文關(guān)鍵詞：IKKε在上皮性卵巢癌組織和細胞中的表達及意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測IKKε在上皮性卵巢癌組織和細胞中的表達及其抑制IKKε表達后對卵巢癌細胞增殖、凋亡能力的影響,探討IKKε在卵巢癌中的作用和臨床意義。方法:(1)選取2006年01月至2013年04月期間就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科經(jīng)手術(shù)治療且經(jīng)病理檢查證實的上皮性卵巢癌患者118例,另取同期因子宮肌瘤行子宮及卵巢切除術(shù)、且術(shù)后經(jīng)病理檢查證實的正常卵巢組織20例作為對照組,應(yīng)用免疫組化SP法檢測IKKε蛋白在兩組卵巢組織中的表達,并分析其與上皮性卵巢癌患者臨床病理因素之間的關(guān)系;(2)體外培養(yǎng)上皮性卵巢癌細胞OV2008(子宮內(nèi)膜樣癌、順鉑敏感細胞株)、C13(子宮內(nèi)膜樣癌、順鉑耐藥細胞株)、A2780S(未分化癌、順鉑敏感細胞株)、A2780CP(未分化癌、順鉑耐藥細胞株)、SKOV3(人卵巢腺癌細胞株),應(yīng)用蛋白印跡法(western blot)分別檢測五種細胞中IKKε蛋白的表達水平,檢測IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)作用48h后對A2780S、A2780CP和C13細胞中IKKε蛋白表達的影響;(3)MTT比色法檢測不同濃度IKKε抑制劑(0-25μM)作用48h后對五種細胞增殖能力的影響;(4)流式細胞術(shù)檢測IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)作用48h后對五種細胞凋亡率的影響。結(jié)果:(1)IKKε在上皮性卵巢癌組織中呈高表達,表達率為66.10%(78/118),而在正常卵巢組織的表達率為35.00%(7/20),兩者相比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。上皮性卵巢癌組織中IKKε蛋白的表達強度與FIGO分期、組織病理學(xué)分級、術(shù)前血清CA125水平、腫瘤的分布和生存時間均明顯相關(guān)(P0.05),而與年齡、組織病理學(xué)類型、發(fā)病模式和腫瘤大小均無明顯相關(guān)性(P0.05);(2)IKKε蛋白在OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3細胞中均有不同程度的表達,IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)分別作用A2780S、A2780CP和C13細胞48h后,IKKε蛋白表達水平均明顯降低,且呈濃度依賴性;(3)不同濃度IKKε抑制劑對卵巢癌細胞均有不同程度的增殖抑制作用,且抑制作用具有濃度依賴性,隨抑制劑濃度的增加,對細胞的增殖抑制作用逐漸增強,各濃度組細胞生存率均低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(4)IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)分別作用OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3細胞48h后,可誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡并呈濃度依賴性,凋亡倍數(shù)均隨抑制劑濃度的增加而增加,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:IKKε在上皮性卵巢癌組織和細胞中均有表達,隨著病變的進展,IKKε蛋白的表達水平增高,使用IKKε抑制劑下調(diào)IKKε后,可抑制腫瘤細胞增殖,誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡,且隨著藥物濃度的增加,增殖抑制作用增強,凋亡倍數(shù)增加。由此推測,IKKε可能參與卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展,臨床上可能成為卵巢癌分子治療新的靶基因。
【關(guān)鍵詞】：IKKε 上皮性卵巢癌 細胞凋亡 免疫組化 蛋白印跡法
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-21
• 一、主要材料12-15
• 1. 組織標(biāo)本來源12-13
• 2. 細胞來源13
• 3. 主要實驗儀器13-14
• 4. 主要試劑和耗材14-15
• 5. 主要試劑的配制15
• 二、實驗方法15-21
• 1. 免疫組化15-17
• 2. 細胞培養(yǎng)17
• 3. 蛋白印跡法17-19
• 4．MTT比色法19-20
• 5. 流式細胞術(shù)20-21
• 三、統(tǒng)計學(xué)分析21
• 結(jié)果21-30
• 1．IKKε 在上皮性卵巢癌組織中的表達21-27
• 2．IKKε 抑制劑對卵巢癌細胞蛋白表達水平的影響27-28
• 3．IKKε 抑制劑對卵巢癌細胞增殖的影響28-29
• 4．IKKε 抑制劑對卵巢癌細胞凋亡的影響29-30
• 討論30-35
• 1．IKKε 在卵巢癌中的表達31-32
• 2．IKKε 在上皮性卵巢癌組織中的表達與臨床病理因素之間的關(guān)系32-33
• 3．IKKε 在卵巢癌細胞凋亡過程中的作用33-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述39-55
• 參考文獻49-55
• 附錄55-57
• 致謝57-58

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