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IKKε在上皮性卵巢癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2017-06-13 18:06

  本文關(guān)鍵詞:IKKε在上皮性卵巢癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:檢測(cè)IKKε在上皮性卵巢癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及其抑制IKKε表達(dá)后對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡能力的影響,探討IKKε在卵巢癌中的作用和臨床意義。方法:(1)選取2006年01月至2013年04月期間就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科經(jīng)手術(shù)治療且經(jīng)病理檢查證實(shí)的上皮性卵巢癌患者118例,另取同期因子宮肌瘤行子宮及卵巢切除術(shù)、且術(shù)后經(jīng)病理檢查證實(shí)的正常卵巢組織20例作為對(duì)照組,應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)IKKε蛋白在兩組卵巢組織中的表達(dá),并分析其與上皮性卵巢癌患者臨床病理因素之間的關(guān)系;(2)體外培養(yǎng)上皮性卵巢癌細(xì)胞OV2008(子宮內(nèi)膜樣癌、順鉑敏感細(xì)胞株)、C13(子宮內(nèi)膜樣癌、順鉑耐藥細(xì)胞株)、A2780S(未分化癌、順鉑敏感細(xì)胞株)、A2780CP(未分化癌、順鉑耐藥細(xì)胞株)、SKOV3(人卵巢腺癌細(xì)胞株),應(yīng)用蛋白印跡法(western blot)分別檢測(cè)五種細(xì)胞中IKKε蛋白的表達(dá)水平,檢測(cè)IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)作用48h后對(duì)A2780S、A2780CP和C13細(xì)胞中IKKε蛋白表達(dá)的影響;(3)MTT比色法檢測(cè)不同濃度IKKε抑制劑(0-25μM)作用48h后對(duì)五種細(xì)胞增殖能力的影響;(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)作用48h后對(duì)五種細(xì)胞凋亡率的影響。結(jié)果:(1)IKKε在上皮性卵巢癌組織中呈高表達(dá),表達(dá)率為66.10%(78/118),而在正常卵巢組織的表達(dá)率為35.00%(7/20),兩者相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。上皮性卵巢癌組織中IKKε蛋白的表達(dá)強(qiáng)度與FIGO分期、組織病理學(xué)分級(jí)、術(shù)前血清CA125水平、腫瘤的分布和生存時(shí)間均明顯相關(guān)(P0.05),而與年齡、組織病理學(xué)類型、發(fā)病模式和腫瘤大小均無明顯相關(guān)性(P0.05);(2)IKKε蛋白在OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3細(xì)胞中均有不同程度的表達(dá),IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)分別作用A2780S、A2780CP和C13細(xì)胞48h后,IKKε蛋白表達(dá)水平均明顯降低,且呈濃度依賴性;(3)不同濃度IKKε抑制劑對(duì)卵巢癌細(xì)胞均有不同程度的增殖抑制作用,且抑制作用具有濃度依賴性,隨抑制劑濃度的增加,對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用逐漸增強(qiáng),各濃度組細(xì)胞生存率均低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(4)IKKε抑制劑(0.1μM、0.5μM)分別作用OV2008、C13、A2780S、A2780CP和SKOV3細(xì)胞48h后,可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡并呈濃度依賴性,凋亡倍數(shù)均隨抑制劑濃度的增加而增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:IKKε在上皮性卵巢癌組織和細(xì)胞中均有表達(dá),隨著病變的進(jìn)展,IKKε蛋白的表達(dá)水平增高,使用IKKε抑制劑下調(diào)IKKε后,可抑制腫瘤細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡,且隨著藥物濃度的增加,增殖抑制作用增強(qiáng),凋亡倍數(shù)增加。由此推測(cè),IKKε可能參與卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展,臨床上可能成為卵巢癌分子治療新的靶基因。
【關(guān)鍵詞】:IKKε 上皮性卵巢癌 細(xì)胞凋亡 免疫組化 蛋白印跡法
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.31
【目錄】:
  • 中文摘要7-9
  • 英文摘要9-11
  • 前言11-12
  • 材料和方法12-21
  • 一、主要材料12-15
  • 1. 組織標(biāo)本來源12-13
  • 2. 細(xì)胞來源13
  • 3. 主要實(shí)驗(yàn)儀器13-14
  • 4. 主要試劑和耗材14-15
  • 5. 主要試劑的配制15
  • 二、實(shí)驗(yàn)方法15-21
  • 1. 免疫組化15-17
  • 2. 細(xì)胞培養(yǎng)17
  • 3. 蛋白印跡法17-19
  • 4.MTT比色法19-20
  • 5. 流式細(xì)胞術(shù)20-21
  • 三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21
  • 結(jié)果21-30
  • 1.IKKε 在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)21-27
  • 2.IKKε 抑制劑對(duì)卵巢癌細(xì)胞蛋白表達(dá)水平的影響27-28
  • 3.IKKε 抑制劑對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖的影響28-29
  • 4.IKKε 抑制劑對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響29-30
  • 討論30-35
  • 1.IKKε 在卵巢癌中的表達(dá)31-32
  • 2.IKKε 在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)與臨床病理因素之間的關(guān)系32-33
  • 3.IKKε 在卵巢癌細(xì)胞凋亡過程中的作用33-35
  • 結(jié)論35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-39
  • 綜述39-55
  • 參考文獻(xiàn)49-55
  • 附錄55-57
  • 致謝57-58

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  本文關(guān)鍵詞:IKKε在上皮性卵巢癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):447236

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