目的:探討高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠腸道菌群的變化,并進(jìn)一步探討腸道菌群與IL-22、LPS的相關(guān)性。方法:1.購買雄性SD大鼠20只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為2組,分別給予正常飲食和高脂飲食喂養(yǎng)4周,觀察大鼠體重變化,4周后處死大鼠,觀察大鼠肝臟病理改變確定是否建模成功;2.采用ELISA法檢測(cè)大鼠血清白細(xì)胞介素-22(IL-22)和脂多糖(LPS)水平,用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)大鼠血清ALT、AST、GGT、TC、TG水平;3.采用Illumina高通量測(cè)序法對(duì)腸黏膜細(xì)菌16Sr RNA的V3-V4區(qū)進(jìn)行基因測(cè)序及生物信息學(xué)分析:取大鼠腸粘膜1塊,提取其總DNA,對(duì)目標(biāo)區(qū)域采用PCR法對(duì)16Sr DNA V3-V4區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增和純化并構(gòu)建文庫,采用Illumina高通量測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序,對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行生物信息學(xué)分析,如多樣性分析、菌群差異性分析及功能分析等;4.分析腸道菌群與NAFLD代謝指標(biāo)的相關(guān)性:找出正常飲食組和高脂飲食組中腸道菌群門水平上有差異的物種,分別與ALT、AST、GGT、TC、TG、IL-22及LPS進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析;5.使用S...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群Rarefaction稀釋曲線圖

非酒精性脂肪性肝病大鼠腸道菌群與IL-22、LPS的相關(guān)性研究-11-2.5大鼠腸道菌群分析2.5.1稀釋曲線2.5.1.1Rarefaction稀釋曲線用隨機(jī)抽樣方法抽取樣品的測(cè)序序列，將抽到的序列數(shù)與所代表的數(shù)目構(gòu)建的曲線即Rarefaction稀釋曲線。當(dāng)曲線最終趨于平坦時(shí)....

圖4正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群Shannon-Wiener曲線圖

第二章結(jié)果-12-圖4正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群Shannon-Wiener曲線圖2.5.1.2Simpson稀釋曲線Simpson稀釋曲線也能反映所測(cè)樣品在的腸道菌群多樣性，是利用各個(gè)樣品在不同測(cè)序量下的Simpson指數(shù)構(gòu)建的曲線，以此。如圖，曲線升高直至平滑說明測(cè)序....

圖5正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群Simpson稀釋曲線圖

第二章結(jié)果-12-圖4正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群Shannon-Wiener曲線圖2.5.1.2Simpson稀釋曲線Simpson稀釋曲線也能反映所測(cè)樣品在的腸道菌群多樣性，是利用各個(gè)樣品在不同測(cè)序量下的Simpson指數(shù)構(gòu)建的曲線，以此。如圖，曲線升高直至平滑說明測(cè)序....

圖6正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群OTU分布Venn圖

非酒精性脂肪性肝病大鼠腸道菌群與IL-22、LPS的相關(guān)性研究-13-1483個(gè)，高脂組特有OTU數(shù)量多于正常組特有OTU數(shù)量，說明腸道菌群多樣性增加。圖6正常飲食組與高脂飲食組大鼠腸道菌群OTU分布Venn圖2.5.3ANOSIM相似性分析相似性分析（Analysisofsim....

本文編號(hào)：3956959