選題依據(jù):阿爾茲海默癥(Alzheimer’s disease,AD)是老年癡呆中較為常見的慢性神經(jīng)退行性疾病。然而,迄今尚無一種理想的藥物能夠預(yù)防和改善AD。黃芩素是中藥黃芩中含量較高的一種黃酮類化合物。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)黃芩素不僅能延長果蠅的壽命,還能夠改善D-半乳糖致衰老大鼠和快速老化小鼠SAMP8兩種衰老動物模型的認(rèn)知障礙。然而,黃芩素對Aβ_25-35損傷PC12細(xì)胞的保護作用及機制尚不清楚。目的:探討黃芩素抑制Aβ_25-35聚集及對Aβ_25-35損傷PC12細(xì)胞的保護作用,并基于JAK2/STAT1通路及代謝組學(xué)技術(shù)探討黃芩素發(fā)揮神經(jīng)保護作用的機制。方法:1.采用Th-T熒光實驗,檢測黃芩素抑制Aβ_25-35聚集的作用。2.在Aβ_25-35損傷的PC12細(xì)胞中,通過測定細(xì)胞活力、LDH釋放率、細(xì)胞凋亡率、NO、IL-8、ROS、MMP、ATP和線粒體復(fù)合物I的水平,評價黃芩素的神經(jīng)保護作用。3.采用Western bolt技術(shù),研究黃芩素對Aβ_25-35

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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主要縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 立題背景和意義
    1.2 本課題的研究內(nèi)容、技術(shù)路線圖及創(chuàng)新點
        1.2.1 研究內(nèi)容
        1.2.2 技術(shù)路線圖
        1.2.3 創(chuàng)新點
第二章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 阿爾茲海默癥概述
    2.2 AD的發(fā)病機制
        2.2.1 Aβ沉積
        2.2.2 Tau蛋白異常學(xué)說
    2.3 AD的治療方法
        2.3.1 化學(xué)藥物治療AD
        2.3.2 植物提取物及中藥治療AD
    2.4 黃芩素的藥理作用研究進(jìn)展
        2.4.1 黃芩素抗Aβ聚集的作用
        2.4.2 黃芩素的神經(jīng)保護作用
        2.4.3 黃芩素的其他作用
第三章 黃芩素抑制Aβ_25-35的聚集
    3.1 引言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 材料
        3.2.2 儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 Aβ_25-35的聚集和黃芩素的抗聚集實驗
        3.3.2 黃芩素抗Aβ_25-35聚集的量效關(guān)系
        3.3.3 黃芩素解聚預(yù)先形成的Aβ_25-35原纖維實驗
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 Aβ_25-35的聚集及黃芩素的抗聚集作用
        3.4.2 黃芩素抗Aβ_25-35聚集的量效關(guān)系
        3.4.3 黃芩素對Aβ_25-35聚集纖維的解聚作用
    3.5 小結(jié)與討論
        3.5.1 小結(jié)
        3.5.2 討論
第四章 黃芩素對Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷的保護作用
    4.1 引言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 材料
        4.2.2 儀器
        4.2.3 主要試劑的配制
    4.3 實驗方法
        4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.2 Aβ_25-35致PC12 細(xì)胞損傷模型的建立
        4.3.3 不同濃度黃芩素對PC12 細(xì)胞的影響
        4.3.4 實驗分組
        4.3.5 MTT法測定細(xì)胞活力
        4.3.6 細(xì)胞凋亡和乳酸脫氫酶釋放率測定
        4.3.7 IL-8和NO的測定
        4.3.8 ROS和 MMP的測定
        4.3.9 ATP和 Complex Ⅰ的測定
        4.3.10 統(tǒng)計分析
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 Aβ_25-35損傷PC12 細(xì)胞模型的建立
        4.4.2 黃芩素對PC12 細(xì)胞存活的作用
        4.4.3 黃芩素對Aβ_25-35損傷的PC12 細(xì)胞存活的影響
        4.4.4 黃芩素對Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞凋亡和LDH的影響
        4.4.5 黃芩素對Aβ_25-35損傷的PC12 細(xì)胞IL-8和NO的影響
        4.4.6 黃芩素對Aβ_25-35損傷的PC12 細(xì)胞ROS和 MMP的影響
        4.4.7 黃芩素對Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞ATP和 Complex Ⅰ的影響
    4.5 小結(jié)與討論
        4.5.1 小結(jié)
        4.5.2 討論
第五章 黃芩素抑制JAK2/STAT1 通路保護Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷
    5.1 引言
    5.2 實驗材料和儀器
        5.2.1 材料
        5.2.2 儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 Western blot
        5.3.2 抗原抗體反應(yīng)
        5.3.3 蛋白檢測及分析
        5.3.4 數(shù)據(jù)處理
    5.4 結(jié)果
        5.4.1 黃芩素對Caspase-3 蛋白表達(dá)的影響
        5.4.2 黃芩素對JAK2/STAT1 通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        5.4.3 黃芩素對炎癥相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    5.5 小結(jié)與討論
        5.5.1 小結(jié)
        5.5.2 討論
第六章 基于液質(zhì)代謝組學(xué)研究黃芩素對Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷的保護作用
    6.1 引言
    6.2 實驗材料和儀器
        6.2.1 材料
        6.2.2 儀器
    6.3 實驗方法
        6.3.1 樣本預(yù)處理
        6.3.2 備樣方法
        6.3.3 液相條件
        6.3.4 質(zhì)譜條件
        6.3.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
    6.4 實驗結(jié)果
        6.4.1 代謝物圖譜分析
        6.4.2 生物標(biāo)志物分析
        6.4.3 代謝通路分析
    6.5 小結(jié)與討論
        6.5.1 小結(jié)
        6.5.2 討論
第七章 總結(jié)與展望
    7.1 研究工作總結(jié)
        7.1.1 黃芩素抑制Aβ_25-35的聚集
        7.1.2 黃芩素對Aβ_25-35損傷PC12 細(xì)胞的保護作用
        7.1.3 黃芩素抑制JAK2/STAT1 通路保護Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷
        7.1.4 基于液質(zhì)代謝組學(xué)研究黃芩素對Aβ_25-35誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷的保護作用
    7.2 不足和展望
    7.3 學(xué)習(xí)心得
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間取得的研究成果
致謝
個人簡況



本文編號：3915253