背景:骨質(zhì)疏松癥是由體內(nèi)骨吸收-骨形成耦聯(lián)失衡引起的代謝性骨病,其治療著眼于恢復(fù)骨代謝平衡。蛇床子素被證實(shí)具有抗骨質(zhì)疏松的藥理作用,但其抗骨質(zhì)疏松的機(jī)制尚不清楚。目的:觀察蛇床子素對(duì)大鼠成骨細(xì)胞增殖與分化的影響,探討蛇床子素抗骨質(zhì)疏松的機(jī)制。方法:通過改良酶消化法及反復(fù)貼壁純化法從新生大鼠顱骨中獲取原代成骨細(xì)胞;通過光鏡下形態(tài)觀察、堿性磷酸酶染色、茜素紅法礦化結(jié)節(jié)染色等方式鑒定成骨細(xì)胞。采用CCK-8法篩選出10-6M、10-5M、10-4M作為低、中、高濃度蛇床子素組,以10-8Mβ-雌二醇作為陽性對(duì)照組,0.25%DMSO作為溶劑對(duì)照組,最后設(shè)立空白組排除DMSO對(duì)成骨細(xì)胞的干擾。本研究采用CCK-8法測(cè)定成骨細(xì)胞增殖能力、偶氮偶聯(lián)法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶表達(dá)、茜素紅染色法測(cè)定成骨細(xì)胞礦化能力以及酶聯(lián)免疫法測(cè)定骨鈣素分泌量,從不同角度、不同階段檢測(cè)蛇床子素對(duì)成骨細(xì)胞分化的影響。并通過檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子GRP78、PDI、CHOP以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路的Wnt、β-catenin蛋白的表達(dá)來分析蛇床子素影響成骨細(xì)胞增殖和分化的機(jī)制。結(jié)果:10-4M的蛇床子素可以抑制...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
緒論
第一部分 成骨細(xì)胞增殖與分化的調(diào)控機(jī)制及實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展
    1 中藥及其有效成分調(diào)控成骨細(xì)胞增殖與分化的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展
    2 蛇床子素對(duì)成骨細(xì)胞增殖與分化的影響及機(jī)制研究進(jìn)展
    3 成骨細(xì)胞增殖與分化的調(diào)控機(jī)制研究
第二部分 成骨細(xì)胞的原代分離、培養(yǎng)及鑒定
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 成骨細(xì)胞的體外分離及原代培養(yǎng)
    3 成骨細(xì)胞傳代培養(yǎng)
    4 成骨細(xì)胞的鑒定
    5 結(jié)果
第三部分 蛇床子素對(duì)成骨細(xì)胞增殖與分化的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)分組
    3 CCK-8法測(cè)定成骨細(xì)胞增殖
    4 偶氮偶聯(lián)法定量檢測(cè)ALP
    5 酶聯(lián)免疫(ELISA)法測(cè)定骨鈣素
    6 茜素紅法礦化結(jié)節(jié)染色
    7 結(jié)果
    8 討論
第四部分 蛇床子素影響成骨細(xì)胞增殖與分化的機(jī)制研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)分組
    3 蛋白質(zhì)免疫印跡( Western Blot)法測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與Wnt/β-catenin信號(hào)通路蛋白表達(dá)
    4 結(jié)果
    5 討論
結(jié)語
    1 總結(jié)
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
    3 不足與展望
參考文獻(xiàn)
附錄1 英文縮寫對(duì)照表
附錄2 文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào)：3865605