目的:以氧化損傷ARPE-19細胞作為體外實驗研究對象,觀察六君子湯含藥血清對氧化損傷細胞的保護作用;研究六君子湯對p62-keap1/Nrf2通路的調(diào)控作用,以闡明六君子湯保護氧化損傷細胞的機制。方法:用t-BHP(叔丁基過氧化氫)誘導ARPE-19細胞損傷。將ARPE-19細胞分成:正常對照組、模型對照組、空白血清組和六君子湯組(分為高、中、低三個劑量組)。采用MTT法和AnnexinV-FITC/PI法檢測六君子湯含藥血清對細胞存活率和凋亡率的影響;生化法檢測SOD活性,DCFH-DA法檢測細胞內(nèi)ROS含量,western blot 檢測 HO-1、NQO-1、p62、Nrf2、LC3Ⅱ蛋白表達。結(jié)果:1.相比于正常對照組,模型對照組細胞生存能力明顯下降(p<0.01);與模型組相比,三個劑量六君子湯干預組ARPE-19細胞存活率明顯提高(p<0.05)。2.相比于正常對照組,模型組的凋亡率顯著增加;與模型組相比,三個劑量六君子湯干預組降低細胞的凋亡率。3.相比于正常對照組,模型組SOD活性下降,ROS含量增加(p<0.05);與模型組相比,三個劑量六君子湯干預...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 理論研究
    1 中醫(yī)對AMD的認識
        1.1 病名溯源
        1.2 病因病機
        1.3 癥候特征
        1.4 中醫(yī)治療
    2 西醫(yī)對AMD的認識
        2.1 臨床特征及分類
        2.2 病因及發(fā)病機制
        2.3 西醫(yī)治療
    3 六君子湯的相關(guān)研究
        3.1 來源與組成
        3.2 中醫(yī)研究
        3.3 西醫(yī)研究
    4 本研究的目的和意義
第二篇 實驗研究
    1、實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 飼料、墊料及飼養(yǎng)環(huán)境
        1.3 實驗藥物
        1.4 實驗細胞
        1.5 主要儀器及設(shè)備
        1.6 實驗試劑
    2. 實驗方法
        2.1 含藥血清制備
        2.2 實驗試劑配制
        2.3 細胞實驗方法
        2.4 MTT法檢測ARPE-19細胞的存活率
        2.5 細胞分組
        2.6 流式細胞儀AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測ARPE-19細胞的凋亡率
        2.7 細胞內(nèi)SOD活性及ROS含量的檢測
        2.8 western blot檢測p62、Nrf2及其相關(guān)靶基因的蛋白表達
        2.9 siRNA轉(zhuǎn)染ARPE-19細胞
    3、統(tǒng)計分析
    4、實驗結(jié)果
        4.1 六君子湯對氧化損傷ARPE-19細胞形態(tài)的影響
        4.2 ARPE-19細胞氧化損傷模型的建立
        4.3 不同濃度的六君子湯對ARPE-19細胞的毒性
        4.4 六君子湯對氧化損傷ARPE-19細胞存活率的影響
        4.5 六君子湯對氧化損傷ARPE-19細胞凋亡率的影響
        4.6 六君子湯對氧化損傷ARPE-19細胞內(nèi)SOD活性及ROS含量的影響
        4.7 六君子湯及t-BHP對ARPE-19細胞Nrf2表達水平的影響
        4.8 Nrf2其下游HO-2、NQO-1、LC3Ⅱ、P62蛋白的表達水平
    5、討論
全文總結(jié)
參考文獻
附錄
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3841676