黑豆,我國(guó)傳統(tǒng)農(nóng)作物,具有藥食兩用價(jià)值。黑豆除含各種活性物質(zhì)外,含量最為豐富的是花青素,尤其是黑豆皮。實(shí)驗(yàn)室前期成功制備黑豆皮花青素(BSCA)且對(duì)其生物活性進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)BSCA具有很強(qiáng)的抗氧化、抗腫瘤活性。研究表明BSCA具有其他的生物活性如抗炎、降低血脂、防輻射、抗衰老等。衰老是不可避免的生命歷程,但是延緩衰老速度是可以實(shí)現(xiàn)的。本研究以秀麗隱桿線蟲這一經(jīng)典模式生物為對(duì)象,探索了BSCA對(duì)衰老以及衰老相關(guān)疾病阿爾茨海默癥(AD)的影響及其作用機(jī)制,主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.BSCA的成分鑒定及其對(duì)野生型N2線蟲生理指標(biāo)的影響。通過(guò)高效液相鑒定發(fā)現(xiàn)BSCA的主要成分為矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)、飛燕草素-3-O-葡萄糖苷(D3G)、矮牽牛素-3-O-葡萄糖苷(Pt3G)、矮牽牛素。BSCA可以延長(zhǎng)N2線蟲壽命,改善年老線蟲運(yùn)動(dòng)能力,減少線蟲腸道褐脂素積累,但對(duì)生殖能力、咽抽速率等生理指標(biāo)沒有影響。2.BSCA延長(zhǎng)野生型N2線蟲壽命的機(jī)制。利用應(yīng)激(氧化應(yīng)激、熱應(yīng)激)抵抗、熒光探針、抗氧化酶活性檢測(cè)試劑盒等方法,探究BSCA調(diào)控壽命的機(jī)制。結(jié)果顯示BSCA增強(qiáng)線蟲應(yīng)激抵抗,...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 黑豆皮花青素
        1.1.1 黑豆皮花青素種類
        1.1.2 黑豆皮花青素生物活性
    1.2 衰老
        1.2.1 衰老理論
        1.2.2 與衰老相關(guān)疾病-阿爾茨海默癥(AD)
    1.3 秀麗隱桿線蟲
        1.3.1 秀麗隱桿線蟲生理特征
        1.3.2 秀麗隱桿線蟲的生命周期
        1.3.3 秀麗隱桿線蟲作為抗衰老研究?jī)?yōu)勢(shì)
    1.4 胰島素/胰島素樣生長(zhǎng)因子信號(hào)通路
    1.5 研究目的與意義
第二章 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲健康壽命的影響
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 線蟲菌株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 培養(yǎng)基及緩沖液的配制
        2.2.2 E.coli OP50 的培養(yǎng)與保存
        2.2.3 秀麗隱桿線蟲的培養(yǎng)
        2.2.4 BSCA的提取及鑒定
        2.2.5 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲壽命影響
        2.2.6 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲生殖力影響
        2.2.7 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲運(yùn)動(dòng)能力和咽抽速率影響
        2.2.8 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲褐脂素積累影響
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 BSCA成分的HPLC分析
        2.3.2 BSCA延長(zhǎng)野生型N2 線蟲壽命
        2.3.3 BSCA對(duì)野生型N2 線蟲生殖力、咽抽速率沒有影響
        2.3.4 BSCA增加野生型N2 線蟲運(yùn)動(dòng)能力
        2.3.5 BSCA減少野生型N2 線蟲腸道褐脂素積累
    2.4 討論
第三章 BSCA延長(zhǎng)野生型N2 線蟲壽命機(jī)制
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 線蟲株系
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 BSCA對(duì)應(yīng)激脅迫下N2 線蟲存活的影響
        3.2.2 ROS水平測(cè)定
        3.2.3 抗氧化酶活性檢測(cè)
        3.2.4 BSCA對(duì)突變株線蟲壽命影響
        3.2.5 線蟲總RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
        3.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 BSCA增加野生型N2 線蟲應(yīng)激抵抗
        3.3.2 BSCA降低野生型N2 線蟲體內(nèi)ROS水平
        3.3.3 BSCA增加野生型N2 線蟲體內(nèi)抗氧化酶活性
        3.3.4 BSCA增加DAF-16 轉(zhuǎn)錄活性
        3.3.5 BSCA沒有增加突變株線蟲壽命
    3.4 討論
第四章 BSCA對(duì) AD的影響及其機(jī)制研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 線蟲品系
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 線蟲培養(yǎng)
        4.2.2 壽命實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 運(yùn)動(dòng)能力檢測(cè)
        4.2.4 癱瘓實(shí)驗(yàn)
        4.2.5 CL4176 線蟲體內(nèi)ROS水平測(cè)定
        4.2.6 抗氧化酶活性檢測(cè)
        4.2.7 硫磺素S染色
        4.2.8 線蟲RNA提取及qRT-PCR
        4.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 BSCA延長(zhǎng)CL4176 線蟲壽命
        4.3.2 BSCA增強(qiáng)CL4176 年老線蟲運(yùn)動(dòng)能力
        4.3.3 BSCA減緩CL4176 線蟲癱瘓
        4.3.4 BSCA降低CL4176 線蟲細(xì)胞內(nèi)ROS水平
        4.3.5 BSCA增加CL4176 線蟲體內(nèi)抗氧化酶活性
        4.3.6 BSCA減少CL4176 線蟲中Aβ聚集
        4.3.7 BSCA增加DAF-16 轉(zhuǎn)錄活性
    4.4 討論
總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄 縮略詞
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式



本文編號(hào)：3804727