目的:觀察不同途徑移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)的胰島樣細(xì)胞對(duì)于1型糖尿病鼠的治療效果。方法:1.采用組織貼壁法分離培養(yǎng)hUC-MSCs,并對(duì)其表面標(biāo)記物和向成骨、成脂肪細(xì)胞分化能力進(jìn)行檢測(cè);2.采用四步誘導(dǎo)法,誘導(dǎo)hUC-MSC向ILCs分化;3.ILCs的鑒定:雙硫腙染色、C肽含量、以及胰島β相關(guān)基因Insulin、PDX1mRNA相對(duì)表達(dá)含量進(jìn)行檢測(cè);4.雄性C57BL/6J小鼠,連續(xù)5 d腹腔注射55 mg/kg鏈脲佐菌素,制備1型糖尿病模型鼠;5.采用尾靜脈和腹腔2種移植方式,將ILCs細(xì)胞懸液(含5×10⁵個(gè)細(xì)胞)移植于1型糖尿病鼠體內(nèi)。分為正常組、糖尿病組、尾靜脈-ILCs組、腹腔-ILCs組;6.對(duì)移植后各組小鼠,進(jìn)行血糖、胰島素水平和葡萄糖耐量試驗(yàn)檢測(cè)。結(jié)果:1.培養(yǎng)出的hUC-MSCs呈梭形,并以漩渦狀生長。表面標(biāo)志物CD90、CD44、CD29、CD34、CD45的陽性率分別為99.2%、99.8%、100.0%,0.0%、0.1%,可分化為骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞;2.hUC-MSCs經(jīng)四步法誘導(dǎo)后,細(xì)胞形態(tài)由梭形轉(zhuǎn)變?yōu)閳A形,并有大量ILCs團(tuán)出現(xiàn);3...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
常用縮寫詞中英文對(duì)照表
前言
第一部分 hUC-MSCs的分離培養(yǎng)及鑒定
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 hUC-MSCs的形態(tài)觀察
        2.2 hUC-MSCs的表面標(biāo)志物鑒定
        2.3 hUC-MSCs的誘導(dǎo)分化能力鑒定
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 ILCs的制備及鑒定
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 hUC-MSCs向 ILCs分化的形態(tài)觀察
        2.2 雙硫腙染色
        2.3 C肽含量
        2.4 胰島β細(xì)胞相關(guān)基因mRNA的變化
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 不同途徑移植ILCs對(duì)于1 型糖尿病鼠的作用研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 各組小鼠血糖水平
        2.2 各組小鼠葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3 各組小鼠胰島素水平
    3 討論
    4 結(jié)論
總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3744773