目的研究清達(dá)顆粒（QDG）對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)活化的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞抗氧化作用,并探討其對p38MAPK/Nrf2/HO-1抗氧化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化是否存在影響。方法1體外培育BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞,采用LPS（1μg/mL）誘導(dǎo)氧化應(yīng)激模型,MTT法確定合適的QDG干預(yù)濃度范圍,在此濃度范圍內(nèi)不對細(xì)胞造成毒性,以及二者聯(lián)合使用時合適的干預(yù)濃度范圍。之后將實驗分為五組,分別為對照組,LPS組,LPS+QDG組,LPS+QDG組設(shè)置31.25,62.5,125μg/mL 3個濃度。2.檢測各組細(xì)胞中一氧化氮（NO）及活性氧（ROS）的熒光強度,細(xì)胞上清液中丙二醛（MDA）的含量以及細(xì)胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）以及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活力。3.Elisa法檢測各組細(xì)胞上清液中TNF-α的濃度。4.Western Blot法檢測p38MAPK（p38）、磷酸化p38MAPK（p-p38）、轉(zhuǎn)錄因子Nrf2、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2、血紅素加氧酶-1（HO-1）的蛋白表達(dá)情況以及p38MAP激酶抑制劑（LY2228820）與QDG聯(lián)合干預(yù)下LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞中HO-1蛋白的... 

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
引言
實驗材料與方法
    1 實驗細(xì)胞
    2 實驗藥物、試劑耗材、工具及儀器
        2.1 實驗藥物
        2.2 實驗試劑與耗材
        2.3 實驗儀器及工具
    3 實驗方法
        3.1 藥品制備
        3.2 細(xì)胞制備
        3.3 MTT檢測
        3.4 ROS含量測定
        3.5 NO表達(dá)水平檢測
        3.6 MDA含量測定
        3.7 SOD活力測定
        3.8 GSH-Px活力測定
        3.9 ELISA法檢測TNF-α濃度
        3.10 Western blot法檢測蛋白表達(dá)
    4 統(tǒng)計學(xué)方法
實驗結(jié)果
    1 清達(dá)顆粒及脂多糖對BV-2 細(xì)胞活力的影響
        1.1 不同濃度清達(dá)顆粒對BV-2 細(xì)胞活力的影響
        1.2 清達(dá)顆粒對LPS誘導(dǎo)的BV-2 細(xì)胞活力的影響
    2 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞中氧化應(yīng)激指標(biāo)及炎癥因子的影響
        2.1 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞中ROS含量檢測
        2.2 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞中NO含量檢測
        2.3 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞中MDA含量檢測
        2.4 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞上清液中SOD活力檢測
        2.5 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞上清液中GSH-Px活力檢測
        2.6 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞上清液中TNF-α濃度檢測
    3 Western blot檢測蛋白表達(dá)
        3.1 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞的p38、p-p38 蛋白表達(dá)的影響
        3.2 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞的Nrf2、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2 蛋白表達(dá)的影響
        3.3 清達(dá)顆粒對LPS干預(yù)的BV-2 細(xì)胞的HO-1 蛋白表達(dá)的影響
        3.4 p38 抑制劑作用下清達(dá)顆粒干預(yù)LPS誘導(dǎo)的BV-2 細(xì)胞HO-1 蛋白表達(dá)的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]天麻素在脂多糖誘導(dǎo)PC12細(xì)胞炎癥中的保護作用研究[D]. 盧志杰.昆明醫(yī)科大學(xué) 2013
[2]天麻素對脂多糖誘導(dǎo)PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激保護作用的研究[D]. 王艷.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號：3727448