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桑葉多糖SY01-23對(duì)人腸道菌群的活性篩選及其主要糖殘基半乳糖醛酸對(duì)胰島β細(xì)胞的毒性探究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-07 22:43
  桑葉(Morus alba L.)多糖在抗糖尿病、抗氧化、抗炎等方面都具有豐富的生物學(xué)活性,因此對(duì)桑葉多糖的研究越來越受關(guān)注,但該多糖是否通過調(diào)節(jié)腸道菌群發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)活性的研究卻未見報(bào)道。因此,我們探究了從桑葉中提取的均一多糖SY01-21、SY01-22以及SY01-23對(duì)腸道菌群的影響。我們發(fā)現(xiàn),SY01-21只能促進(jìn)解纖維擬桿菌(Bacteroides cellulosilyticus,BC)的增殖,SY01-22只能促進(jìn)卵形擬桿菌(Bacteroides ovatus,BO)的增殖,而SY01-23對(duì)BO以及BC兩種菌的增殖均有促進(jìn)作用。基于上述結(jié)果,我們選取了SY01-23進(jìn)行進(jìn)一步的探究。我們首先發(fā)現(xiàn),SY01-23對(duì)鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillus reuteri,LR)以及長雙歧桿菌(Bifidibacteria longum,BL)均無明顯活性。其次,BO及BC可以將SY01-23降解成為單糖以及寡糖片段,并生成對(duì)人體有益的短鏈脂肪酸乙酸和丙酸。此外,研究發(fā)現(xiàn)BO與多形擬桿菌(B... 

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 桑葉的活性成分及生物活性
        1.1.1 桑葉的活性成分
        1.1.2 桑葉多糖的生物活性
    1.2 腸道菌群
        1.2.1 腸道菌群的概述
        1.2.2 擬桿菌可代謝復(fù)雜的植物多糖
        1.2.3 腸道菌群之間的互利共生
        1.2.4 短鏈脂肪酸
    1.3 葡萄糖毒性
        1.3.1 葡萄糖毒性損害機(jī)體健康
        1.3.2 β細(xì)胞葡萄糖毒性的機(jī)理探究
        1.3.3 常見單糖研究概述
        1.3.4 科學(xué)問題及研究意義
第2章 桑葉多糖SY01-23 對(duì)人腸道菌群的活性篩選
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料及試驗(yàn)方法
        2.1.1 桑葉及菌株來源
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑、儀器及耗材
        2.1.3 多糖的提取、分離與純化
        2.1.4 桑葉多糖分子量測定
        2.1.5 單糖組成分析
        2.1.6 擬桿菌生長曲線測定
        2.1.7 益生菌生長曲線測定
        2.1.8 高效凝膠滲透色譜(HPGPC)檢測擬桿菌降解多糖產(chǎn)物
        2.1.9 薄層色譜分析(TLC)檢測擬桿菌降解多糖產(chǎn)物
        2.1.10 高效陰離子交換色譜-脈沖安培(HPAEC-PAD)檢測擬桿菌降解多糖產(chǎn)物
        2.1.11 短鏈脂肪酸的測定
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.2.1 桑葉多糖的分子量測定
        2.2.2 桑葉多糖的糖組成分析
        2.2.3 SY01-23 對(duì)擬桿菌的增殖有良好的促進(jìn)作用
        2.2.4 SY01-23 對(duì)三種益生菌的增殖無促進(jìn)作用
        2.2.5 擬桿菌降解SY01-23 機(jī)制初步探究
        2.2.6 SY01-23 促進(jìn)擬桿菌的互利共生
        2.2.7 擬桿菌可通過利用SY01-23 產(chǎn)生短鏈脂肪酸
    2.3 總結(jié)
第3章 半乳糖醛酸對(duì)胰島β細(xì)胞毒性機(jī)理初步探究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.1 細(xì)胞及動(dòng)物來源
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑、儀器及耗材
        3.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.4 MTT實(shí)驗(yàn)
        3.1.5 流式Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡
        3.1.6 Western blot
        3.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)
        3.1.8 Hoechst染色
        3.1.9 活性氧檢測
        3.1.10 小鼠血糖測試
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.2.1 單糖毒性的篩選
        3.2.2 半乳糖醛酸誘導(dǎo)INS-1E細(xì)胞凋亡
        3.2.3 半乳糖醛酸誘導(dǎo)INS-1E產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)并影響相關(guān)蛋白的表達(dá)
        3.2.4 半乳糖醛酸誘導(dǎo)INS-1E細(xì)胞GSIS信號(hào)通路相關(guān)基因下調(diào)
        3.2.5 半乳糖醛酸減少小鼠體重增加并誘導(dǎo)小鼠血糖升高
    3.3 總結(jié)
第4章 總結(jié)
    4.1 已解決的科學(xué)問題
        4.1.1 桑葉多糖SY01-23 調(diào)節(jié)擬桿菌的組成和代謝
        4.1.2 半乳糖醛酸對(duì)胰島β細(xì)胞毒性作用機(jī)理研究
    4.2 尚待解決的科學(xué)問題
        4.2.1 SY01-23 的結(jié)構(gòu)解析以及擬桿菌降解SY01-23 多糖的具體機(jī)制
        4.2.2 SY01-23 促進(jìn)腸道菌群互利共生的具體機(jī)制
        4.2.3 半乳糖醛酸在小鼠體內(nèi)對(duì)胰島β細(xì)胞的損傷機(jī)制
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]桑葉多糖調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群失調(diào)的研究[J]. 陳漣昊,張霞,孫世芳,王菱枝,車有,趙駿,宋存江.  現(xiàn)代藥物與臨床. 2015(06)
[2]桑葉多糖MLPⅡ的基本結(jié)構(gòu)及對(duì)糖尿病模型大鼠的降血糖作用[J]. 路國兵,任春久,崔為正,王彥文,高繪菊,牟志美.  蠶業(yè)科學(xué). 2011(06)



本文編號(hào):3713002

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