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電針對阿爾茨海默癥大鼠海馬區(qū)P35/P25-細胞周期素依賴性蛋白激酶5-Tau蛋白磷酸化路徑的影響

發(fā)布時間:2021-11-25 08:01
  目的:通過對阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠“百會”和雙側(cè)“腎俞”穴進行電針干預(yù),以探尋其對AD模型大鼠認知障礙的改善情況,及其對大鼠海馬區(qū)“P35/P25-細胞周期素依賴性蛋白激酶5(Cyclin-dependent Kinase 5,CDK5)-Tau蛋白磷酸化”信號轉(zhuǎn)導路徑的影響,從而更加深入的探討電針防治AD的相關(guān)機制。方法:首先,按照隨機數(shù)字表法將50只雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機均分為4組,分別命名為:對照組、假手術(shù)組、模型組以及電針治療組,每組各12只,另2只備用。然后,制作AD模型:對模型組及治療組大鼠進行兩側(cè)海馬區(qū)每側(cè)各10μL的Aβ25-35(1 g/L)注射。假手術(shù)組于同一位置注射相同體積的生理鹽水,治療組大鼠在成功造模后針刺其“百會”和雙側(cè)“腎俞”穴并正確連接電針儀進行電針干預(yù),1次/天,共處理10天。電針治療結(jié)束后第二天采用Morris水迷宮對各組大鼠的學習記憶能力進行檢測并統(tǒng)計分析;HE染色對比各組大鼠海馬部位基本細胞形態(tài)的差異;免疫組織化學檢測海馬區(qū)P35/P25、CDK5、... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

電針對阿爾茨海默癥大鼠海馬區(qū)P35/P25-細胞周期素依賴性蛋白激酶5-Tau蛋白磷酸化路徑的影響


AD模型制作示意圖

平面圖,迷宮,象限,平面圖


重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文17摸,不電針(盡可能保證僅有唯一變量,即:電針刺激)。與此同時,以上實驗操作,每次固定時間和操作人員,并在每日電針干預(yù)后對各組大鼠進行稱重,并觀察記錄每只大鼠的飲食、活動范圍、毛發(fā)、針刺局部皮膚及精神狀況等,作為造模與治療效果評價的輔助觀察指標。1.4.5Morris水迷宮實驗實驗前準備工作:首先,將所有大鼠放置到水迷宮環(huán)境中(每次進行水迷宮實驗前清潔房間環(huán)境),提前適應(yīng)實驗環(huán)境1-2天(適應(yīng)過程中保證溫度濕度與飼養(yǎng)室中一致),再進行水迷宮測試。在直徑為2m、深度為0.6m、溫度范圍為25±0.5℃、背景色為黑色的圓形水池內(nèi)蓄水。在水池上方放置攝影裝備,采用SMART行為分析軟件觀察并記錄各組大鼠的平均逃避潛伏期(EscapeLatency,s)與搜索路徑(EscapeLength,cm)(注意:在水迷宮實驗進行的7日內(nèi),每日對水池進行清掃、消毒并換水,以避免氣味導致的實驗誤差。與此同時,每次實驗均必須在同一時間,由同樣人員進行操作,實驗過程中保持安靜,避免誤差。實驗完成后,應(yīng)盡快采用保暖措施,避免大鼠由于生病等影響實驗結(jié)果)。圖1.2Morris水迷宮平面圖(第三象限內(nèi)的小圓圈表示平臺所在位置)Fig1.2Morriswatermazeplanedistributiondiagram(smallcirclesinquadrantindicatethepositionofplatform).(1)可視平臺實驗:第1-2天,RWD水迷宮設(shè)備已規(guī)定水池平均分為四個固

路徑圖,可視,路徑,平臺


重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文262結(jié)果2.1一般情況造模前各組大鼠反應(yīng)靈敏,正常飲食。假手術(shù)組注入生理鹽水后于對照組基本情況差異不大。模型組組大鼠雖未出現(xiàn)偏癱等不良癥狀,但不同程度的出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍(對外界刺激,如:聲音,光線等,缺乏興趣)、行動較緩慢、活動量和活動范圍均有所減少(大多數(shù)時候喜歡蜷縮在鼠籠角落)、食欲較之前明顯下降、毛發(fā)粗糙,喜睡等情況。經(jīng)電針治療后,大鼠行動更加靈活,活動范圍明顯擴大,飲食情況也較造模后有明顯好轉(zhuǎn)(基本與對照組無異)、毛發(fā)亦較前更為光滑。2.2Morris水迷宮實驗2.2.1可視平臺實驗四組間進行比較,各組大鼠游泳姿勢未見明顯差異,且尋找到平臺的平均逃避潛伏期(EscapeLatency,s)與搜索路徑(EscapeLength,cm)均無統(tǒng)計學差異(P>0.05),如圖2.1所示。圖2.1可視平臺實驗結(jié)果A:平均逃避潛伏期(s);B:搜索路徑(cm),P>0.05。Fig.2.1Theresultsofvisualplatformexperiment.A:theescapelatencytime(s);B:theescapelength(cm),P>0.05.

【參考文獻】:
期刊論文
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[7]Tau蛋白磷酸化在阿爾茨海默病中所處的地位[J]. 于艷紅,許杰,李文彬,李紅粉,溫世榮.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2015(08)
[8]急性CO中毒遲發(fā)腦病大鼠海馬中CDK5、p35及p25的表達[J]. 李勇軍,劉強,趙春梅,王振海.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2012(04)
[9]細胞周期蛋白依賴性蛋白激酶5在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病中的作用[J]. 陳潔,王中峰.  生理學報. 2010(04)
[10]Aβ25~35和人參皂苷Rb1對鼠神經(jīng)干細胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表達的影響[J]. 趙慶霞,鄢文海,韓雪飛,許燕,邢瑩.  中國應(yīng)用生理學雜志. 2010(02)



本文編號:3517726

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