背景及目的骨質(zhì)疏松癥（Osteoporosis）是一種常見的多發(fā)病,以骨量減少、骨組織微結(jié)構(gòu)退化為特征,臨床表現(xiàn)為疼痛、骨脆性增加、骨折等,WHO已經(jīng)將其列為影響公眾健康的第二大疾病。隨著老齡社會到來,骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率也在逐年提升,因此骨質(zhì)疏松防治方法的研究已經(jīng)成為一項(xiàng)緊迫的醫(yī)學(xué)課題。近年來,多種動物模型被用于骨質(zhì)疏松癥的研究,其中包括一種新的生物模型斑馬魚。斑馬魚具有個體小、體外受精發(fā)育、發(fā)育周期短、與人類基因同源性高等優(yōu)勢。目前基于斑馬魚開展的研究對骨的評價方法仍然以病理為主,以至于相關(guān)研究進(jìn)展緩慢,亟待探索一種可媲美病理技術(shù)的活體成像方法。光學(xué)相干層析術(shù)是一種利用低相干干涉原理和共聚焦掃描模式的光學(xué)成像技術(shù),可對生物組織進(jìn)行高分辨率的斷層成像,具備大的成像深度和無損成像能力,有望解決斑馬魚骨相關(guān)研究中缺乏活體評價工具的問題。本課題探討了光學(xué)相干層析術(shù)（Optical coherence tomography,OCT）在活體評估成年斑馬魚骨質(zhì)疏松模型中的可行性。研究方法首先建立實(shí)驗(yàn)室斑馬魚的繁育體系,將德國AB品系的野生型斑馬魚親魚產(chǎn)下的二代幼魚培育到3月齡,選擇發(fā)育正常的二代成... 

【文章來源】：廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

OCT系統(tǒng)結(jié)構(gòu)說明圖

第一部分：實(shí)驗(yàn)材料與儀器15如分辨率和成像深度進(jìn)行了檢測。OCT系統(tǒng)的軸向分辨率取決于光源的光譜特性。該系統(tǒng)的超發(fā)光二極管的光譜如圖2A所示，其中心波長和帶寬分別為846.7nm和43.7nm，理論軸向分辨率在空氣中為7.24μm，由公式R_axial=(2ln2/π)*(λ^2/λ)計(jì)算，其中λ為中心波長，λ為光譜帶寬。OCT系統(tǒng)的橫向分辨率是通過對具有銳邊的刀片成像來計(jì)算的，圖2B給出了橫跨刀片邊緣的B掃描的OCT信號的歸一化幅度，并獲得了相應(yīng)的邊緣擴(kuò)展函數(shù)。取邊緣擴(kuò)展函數(shù)的導(dǎo)數(shù)得到線擴(kuò)展函數(shù)如圖2C所示，并且線擴(kuò)展函數(shù)的一半最大值處的全寬度量化了橫向分辨率。OCT系統(tǒng)的橫向分辨率約為12μm，用于成像深度測量的體模，是通過將頭發(fā)絲傾斜鑲嵌在瓊脂塊中制成的，圖2D顯示了不同位置毛發(fā)的三幅OCT圖像。用白色短箭頭標(biāo)記頭發(fā)的位置，可以清楚地看到頭發(fā)絲所處的位置及成像結(jié)果。結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)室的OCT系統(tǒng)的成像深度可達(dá)2mm。圖2.OCT系統(tǒng)的性能表征A：OCT系統(tǒng)的超輻射發(fā)光二極管的光譜；B：刀鋒的歸一化OCT信號；C：OCT成像系統(tǒng)的橫向分辨率；D：頭發(fā)不同位置的OCT圖像。

廣州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16第二部分：實(shí)驗(yàn)方法1.實(shí)驗(yàn)方案本研究的實(shí)驗(yàn)流程如下：第一：斑馬魚的培養(yǎng)與繁殖；第二：斑馬魚骨質(zhì)疏松模型的構(gòu)建；第三：斑馬魚骨質(zhì)疏松模型的評估。具體實(shí)驗(yàn)方案如圖3所示。圖3.實(shí)驗(yàn)流程圖2.斑馬魚的培育與繁殖2.1草履蟲的培育在已配制完成的0.5g/L酵母培養(yǎng)液中加入幾粒已滅菌的麥粒（提高草履蟲密度），然后將草履蟲母液與酵母培養(yǎng)液按1:5的比例混合在一起，置于28℃的恒溫箱培養(yǎng)7天后，每毫升溶液中草履蟲密度可達(dá)2000個（圖4）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]補(bǔ)腎通絡(luò)方對骨質(zhì)疏松斑馬魚效應(yīng)評價及破骨細(xì)胞自噬機(jī)制[J]. 譚登,張玉,張農(nóng)山,劉軍,萬仕煒,韓龍,方彭華,閔文.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2020(07)
[2]眼科光學(xué)相干層析成像的圖像處理方法[J]. 蔡懷宇,張瑋茜,陳曉冬,劉珊珊,韓曉艷.  中國光學(xué). 2019(04)
[3]Smad2/3a對斑馬魚神經(jīng)嵴細(xì)胞標(biāo)記基因crestin表達(dá)的影響[J]. 李麗芳,陳露西,賈順姬,顏光玗.  中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報. 2019(04)
[4]原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的中醫(yī)證素辨證法[J]. 李娜,杜麗坤,王冰梅.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2019(07)
[5]白藜蘆醇對潑尼松誘導(dǎo)的斑馬魚骨質(zhì)疏松的影響[J]. 郭東貴,俸婷婷,李俐,張敏,王慧娟.  時珍國醫(yī)國藥. 2019(07)
[6]芍藥苷干預(yù)成骨細(xì)胞凋亡抗骨質(zhì)疏松作用研究[J]. 林紫微,楊菲,黃天一,陳婷婷,崔杰,李夢雨,華永慶.  南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[7]骨質(zhì)疏松癥相關(guān)危險因素分析[J]. 韓棟,盧曉棟.  繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2019(06)
[8]補(bǔ)腎運(yùn)脾方對糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松斑馬魚模型骨代謝的調(diào)節(jié)作用[J]. 徐宇,黃維琛,郭禮躍,梁江,黃彥昌,盧云,蘇強(qiáng).  中藥藥理與臨床. 2019(03)
[9]糖皮質(zhì)激素脂質(zhì)體在常見自身免疫病治療中的研究進(jìn)展[J]. 俞葉,高小玲,呂良敬.  中華風(fēng)濕病學(xué)雜志. 2019 (06)
[10]骨質(zhì)疏松癥的藥物治療研究進(jìn)展[J]. 李慧敏,方康權(quán).  黑龍江醫(yī)學(xué). 2019(05)

碩士論文
[1]基于TGF-β與NF-κB信號探討龜鹿二仙膠對GIOP斑馬魚治療作用機(jī)制[D]. 錢哲.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]龜鹿二仙膠對成年斑馬魚骨質(zhì)疏松模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 謝斌.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2016



本文編號：3516142