背景與目的:巨噬細胞吞噬并破壞顆粒物,這是重要的機體防御機制。巨噬細胞吞噬過程中會發(fā)生肌動蛋白細胞骨架的重塑,從而產生獨特的富含F(xiàn)-肌動蛋白（F-actin）的膜結構,稱為吞噬杯。吞噬杯是一種杯狀的細胞膜內陷,在吞噬過程中其遠端邊緣閉合形成吞噬體。通過其邊緣沿顆粒表面的行進,該吞噬杯包圍并通過吞噬體膜與細胞膜的分離最終包裹顆粒。白細胞分化抗原36（CD36）是B類清道夫受體家族的成員,可在多種細胞上表達。當前的工作表明,在巨噬細胞吞噬過程中,CD36通過調節(jié)肌動蛋白聚合來調控巨噬細胞的擴散,遷移和粘附。但是,尚不清楚CD36是否參與吞噬杯形成的調節(jié)。因此,本研究旨在探討CD36參與吞噬的潛在機制。方法:第一部分:體內吞噬試驗,給CD36野生型（CD36WT）,CD36敲低（CD36KD）和CD36敲除（CD36KO）小鼠（6-8周）腹腔注射1.0 ml液體石蠟。6天后,將表達綠色熒光蛋白（GFP）的大腸桿菌（E.coli）或CFSE標記的紅細胞（RBC）注射入小鼠的腹腔。2小時后收獲總腹腔細胞,用PE-F4/80抗體標記原代腹腔巨噬細胞,并通過流式細胞術檢測吞噬作用。吞噬杯的檢測,將分... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CD36下調對可以降低巨噬細胞吞噬Figure1.1EffectofCD36downregulationonmacrophagesphagocytosisA.流式細胞儀檢測巨噬細胞對大腸桿菌的吞噬

CD36下調導致吞噬杯形成減少Figure1.2InhibitionofCD36attenuatedphagocyticcupformation

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文25圖2.2CD36下調減少JNK磷酸化Figure2.2CD36downregulationdecreasedphosphorylationofJNKA.Westernblot檢測巨噬細胞中JNK的磷酸化。B.使用ImageJ計算p-JNK/JNK表達比。C.Westernblot檢測巨噬細胞中JNK的磷酸化。D.使用ImageJ計算p-JNK/JNK表達比。E.Westernblot檢測巨噬細胞中ERK的磷酸化。F.使用ImageJ計算p-ERK/ERK表達比。G.Westernblot檢測巨噬細胞中ERK的磷酸化。H.使用ImageJ計算p-ERK/ERK表達比。數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差表示（n≥3），*P<0.05與對照組NCi比較。A.WesternblotanalysisofphosphorylatedJNKinmacrophages.B.Theratiosofp-JNK/JNKexpressionwerecalculatedbyImageJ.C.WesternblotanalysisofphosphorylatedJNKinmacrophages.D.Theratiosofp-JNK/JNKexpressionwerecalculatedbyImageJ.E.WesternblotanalysisofphosphorylatedERKinmacrophages.F.Theratiosofp-ERK/ERKexpressionwerecalculatedbyImageJ.G.WesternblotanalysisofphosphorylatedERKinmacrophages.H.Theratiosofp-ERK/ERKexpressionwerecalculatedbyImageJ.Resultsareexpressedasmean±SEM(n≥3),*P<0.05versusNCigroup.


本文編號：3500527