背景與目的:巨噬細(xì)胞吞噬并破壞顆粒物,這是重要的機(jī)體防御機(jī)制。巨噬細(xì)胞吞噬過程中會(huì)發(fā)生肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的重塑,從而產(chǎn)生獨(dú)特的富含F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白（F-actin）的膜結(jié)構(gòu),稱為吞噬杯。吞噬杯是一種杯狀的細(xì)胞膜內(nèi)陷,在吞噬過程中其遠(yuǎn)端邊緣閉合形成吞噬體。通過其邊緣沿顆粒表面的行進(jìn),該吞噬杯包圍并通過吞噬體膜與細(xì)胞膜的分離最終包裹顆粒。白細(xì)胞分化抗原36（CD36）是B類清道夫受體家族的成員,可在多種細(xì)胞上表達(dá)。當(dāng)前的工作表明,在巨噬細(xì)胞吞噬過程中,CD36通過調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白聚合來調(diào)控巨噬細(xì)胞的擴(kuò)散,遷移和粘附。但是,尚不清楚CD36是否參與吞噬杯形成的調(diào)節(jié)。因此,本研究旨在探討CD36參與吞噬的潛在機(jī)制。方法:第一部分:體內(nèi)吞噬試驗(yàn),給CD36野生型（CD36WT）,CD36敲低（CD36KD）和CD36敲除（CD36KO）小鼠（6-8周）腹腔注射1.0 ml液體石蠟。6天后,將表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）的大腸桿菌（E.coli）或CFSE標(biāo)記的紅細(xì)胞（RBC）注射入小鼠的腹腔。2小時(shí)后收獲總腹腔細(xì)胞,用PE-F4/80抗體標(biāo)記原代腹腔巨噬細(xì)胞,并通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)吞噬作用。吞噬杯的檢測(cè),將分... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CD36下調(diào)對(duì)可以降低巨噬細(xì)胞吞噬Figure1.1EffectofCD36downregulationonmacrophagesphagocytosisA.流式細(xì)胞儀檢測(cè)巨噬細(xì)胞對(duì)大腸桿菌的吞噬

CD36下調(diào)導(dǎo)致吞噬杯形成減少Figure1.2InhibitionofCD36attenuatedphagocyticcupformation

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文25圖2.2CD36下調(diào)減少JNK磷酸化Figure2.2CD36downregulationdecreasedphosphorylationofJNKA.Westernblot檢測(cè)巨噬細(xì)胞中JNK的磷酸化。B.使用ImageJ計(jì)算p-JNK/JNK表達(dá)比。C.Westernblot檢測(cè)巨噬細(xì)胞中JNK的磷酸化。D.使用ImageJ計(jì)算p-JNK/JNK表達(dá)比。E.Westernblot檢測(cè)巨噬細(xì)胞中ERK的磷酸化。F.使用ImageJ計(jì)算p-ERK/ERK表達(dá)比。G.Westernblot檢測(cè)巨噬細(xì)胞中ERK的磷酸化。H.使用ImageJ計(jì)算p-ERK/ERK表達(dá)比。數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n≥3），*P<0.05與對(duì)照組NCi比較。A.WesternblotanalysisofphosphorylatedJNKinmacrophages.B.Theratiosofp-JNK/JNKexpressionwerecalculatedbyImageJ.C.WesternblotanalysisofphosphorylatedJNKinmacrophages.D.Theratiosofp-JNK/JNKexpressionwerecalculatedbyImageJ.E.WesternblotanalysisofphosphorylatedERKinmacrophages.F.Theratiosofp-ERK/ERKexpressionwerecalculatedbyImageJ.G.WesternblotanalysisofphosphorylatedERKinmacrophages.H.Theratiosofp-ERK/ERKexpressionwerecalculatedbyImageJ.Resultsareexpressedasmean±SEM(n≥3),*P<0.05versusNCigroup.


本文編號(hào)：3500527