目的:基于譜效關(guān)系和成分敲出技術(shù)對血紅鉚釘菇抗肝癌作用的主要活性成分進(jìn)行辨識;同時(shí)對血紅鉚釘菇中的主要活性成分進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究,預(yù)測其作用機(jī)制。方法:1、首先采用MTT法來考察血紅鉚釘菇不同極性部位對肝癌HepG2細(xì)胞的抑制作用,篩選出最佳活性部位;2、采用HPLC-DAD建立不同產(chǎn)地血紅鉚釘菇的化學(xué)指紋圖譜;結(jié)合各樣品的抗肝癌活性,通過SIMCA軟件進(jìn)行偏最小二乘法分析（PLS）,初步篩選出其中的活性成分;3、利用HPLC法敲出前期篩選的活性成分,并通過LC-ESI-MS/MS推測其可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)。采用MTT法評價(jià)其抗肝癌活性,進(jìn)一步辨識血紅鉚釘菇中的主要活性成分;4、采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法預(yù)測血紅鉚釘菇中主要活性成分的抗肝癌作用機(jī)制。結(jié)果:1、血紅鉚釘菇不同部位的對HepG2細(xì)胞的增殖均具有一定抑制作用,并且與藥物作用濃度具有劑量依賴關(guān)系,同時(shí)二氯甲烷部位的IC50值明顯低于其他給藥組,說明了血紅鉚釘菇的發(fā)揮抗肝癌作用的主要活性成分集中在二氯甲烷層;2、不同產(chǎn)地血紅鉚釘菇二氯甲烷提取液對于肝癌HepG2細(xì)胞的抑制作用有較大的差異;當(dāng)樣品濃度改變時(shí),對HepG2細(xì)胞的增殖抑制作用的影... 

【文章來源】：長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

甾醇類化合物結(jié)構(gòu)

長春中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文101.3酚類血紅鉚釘菇子實(shí)體中酚類化合物有[6,8]：4-羥基苯甲醛（4-Hydroxybenzaldehyde）、4-羥基苯乙酸（(4-Hydroxyphenyl)aceticacid）、4-羥基苯乙酸甲酯（Methyl(4-hydroxyphenyl)acetate）、3-（3,4-二羥基苯基）丙烯酸（3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-propenoicacid）、4-羥基苯乙酸丁酯（Butyl(4-hydroxyphenyl)acetate）、絨蓋牛肝菌酸（Xerocomicacid）。圖3酚類化合物結(jié)構(gòu)Figure3structureofphenols2血紅鉚釘菇的藥理作用研究進(jìn)展2.1抗腫瘤作用研究表明，血紅鉚釘菇既具有較好的體內(nèi)外抗腫瘤作用。馮建[10]從色釘菇（Chroogomphusrutilus）中分離純化出11種化合物，活性的結(jié)果顯示，5‐羥基尿嘧啶核苷對人胃癌BGC細(xì)胞的增殖有較強(qiáng)的抑制作用（IC50為7.92μg/mL）。李貞卓[6]從該血紅鉚釘菇中分離得到一種單體化合物絨蓋牛肝菌酸（Xerocomicacid），發(fā)現(xiàn)其具有顯著的抗腫瘤和增強(qiáng)免疫的作用，絨蓋牛肝菌酸能顯著抑制HepG2、Bel-7402、MCF-7、Hela的增殖（IC50為41.37±0.36μg/mL、37.09±0.69μg/mL、80.84±1.06μg/mL、68.25±0.58μg/mL），并且具有一定濃度依賴性，說明絨蓋牛肝菌酸具有較為廣譜的抗腫瘤效果。高琴琴[11]對絨蓋牛肝菌酸的抗腫瘤作用機(jī)制進(jìn)一步研究，認(rèn)為其可能是與染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄調(diào)

長春中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文193.2量化色譜峰的確定采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2004》軟件，以S1血紅鉚釘菇二氯甲烷提取物圖譜作參照，時(shí)間窗口設(shè)為0.5，釆用平均數(shù)法生成對照圖譜[39]，匹配的色譜圖和峰面積如圖4和表4所示。通過比較10批不同產(chǎn)地血紅鉚釘菇HPLC特征圖譜，可以發(fā)現(xiàn)其共有成分較多，但成分組成有所差異，同時(shí)各個(gè)樣品中的成分含量也有所不同，因此，共篩選出13個(gè)共有峰作為研究對象。圖4不同血紅鉚釘菇樣品的HPLC指紋圖譜Figure4HPLCfingerprintsofdifferentChroogomphusrutilussamples表4不同產(chǎn)地血紅鉚釘菇指紋圖譜的共有峰面積Table4CommonpeakareasoffingerprintsofdifferentChroogomphusrutilussamples共有峰編號S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10132.94624.00749.97946.75866.3443.4524.00761.69134.60420.093


本文編號：3491066