目的:分離鑒定紫花杜鵑葉（Rhododendron amesiae Rehd.et Wils.）的95%乙醇提取物的化學成分,并分別從酶水平和細胞水平研究紫花杜鵑葉的抗炎作用,為杜鵑屬植物的進一步開發(fā)利用提供參考。方法:1.紫花杜鵑葉的95%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯進行萃取。所得石油醚部位、乙酸乙酯部位通過硅膠柱色譜、十八烷基鍵合硅膠（ODS）柱色譜、羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）柱色譜、MCI柱色譜、半制備高效液相色譜等方法分離純化。通過核磁共振氫譜、核磁共振碳譜、質(zhì)譜等波譜學手段對單體化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定。2.測定單體化合物對磷酸二酯酶4（PDE4）的抑制活性,并采用Autodock4.2、SYBYL分子對接軟件研究單體化合物與酶的結(jié)合作用。3.采用抑制LPS誘導的RAW264.7細胞釋放NO活性的方法研究所分離得到的二萜類化合物的抗炎活性。結(jié)果:1.從紫花杜鵑葉95%乙醇提取物共分離得到了20個單體化合物。包括6個二萜類化合物,分別鑒定為grayanotoxinⅢ（1）、grayanotoxinⅠ（2）、grayanotoxinⅣ（3）、grayanoto... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

紫花杜鵑分離流程圖

山西醫(yī)科大學碩士學位論文8204.0mgC18H35NO1H-NMR13C-NMR2.2化合物結(jié)構(gòu)解析化合物1：白色粉末。易溶于甲醇、吡啶。在GF254薄層板上噴1%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱后，先變紫后變藍，放置24h后變?yōu)榫G色。碳譜顯示20個碳信號，以上信息提示該化合物為二萜類化合物。1H-NMR（Pyridine-d5，400MHz）顯示高場有4個角甲基信號δH1.89（3H，s，20-CH3），1.72（3H，s，19-CH3），1.51（3H，s，17-CH3），1.14（3H，s，18-CH3），低場中有六個活潑氫質(zhì)子信號6.55（1H，d，J=7.1Hz，14-OH），6.41（1H，d，J=4.8Hz，3-OH），6.36（1H，s，10-OH），5.27（1H，s，5-OH），5.05（1H，s，6-OH），4.84（1H，s，16-OH）。圖1-2化合物1的氫譜（Pyridine-d5，400MHz）13C-NMR(Pyridine-d5，101MHz)中δC84.7，82.7，79.8，79.4，78.2，74.4為連氧碳信號。其余信號為亞甲基、次甲基及甲基碳信號。綜合上述信號，符合木藜蘆烷型二萜類化合物核磁信號特征，經(jīng)過進一步與文獻[11]數(shù)據(jù)對照，鑒定該化合物為grayanotoxinⅢ。

山西醫(yī)科大學碩士學位論文9圖1-3化合物1的碳譜（Pyridine-d5，101MHz）化合物2：白色粉末。易溶于甲醇、吡啶。在GF254薄層板上噴1%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱后，先變紫后變藍，放置24h后變?yōu)榫G色。提示該化合物為萜類化合物。化合物2的譜圖與化合物1非常相似，提示為木藜蘆烷型二萜。1H-NMR（Pyridine-d5，400MHz）顯示高場有4個角甲基信號1.87（3H，s，20-CH3），1.70（3H，s，19-CH3），1.48（3H，s，17-CH3），1.28（3H，s，18-CH3）以及一個酰甲基質(zhì)子信號1.98（3H，s，21-CH3）。低場中顯示5個活潑氫質(zhì)子信號6.51（1H，d，J=4.8Hz，3-OH），5.56（1H，brs，6-OH），5.52（1H，s，10-OH），4.80（1H，s，5-OH），4.42（1H，s，16-OH）。此外，14位的質(zhì)子信號明顯低場位移，提示14位羥基可能被乙�；�。13C-NMR（Pyridine-d5，101MHz）譜中顯示有22個碳原子，與化合物1相比，在δc170.5和21.3處多了兩個碳原子，提示為乙酰基碳信號。δC82.6，84.5，73.8，77.9，78.5為五個連氧碳信號。綜上，推測化合物2為化合物1的14位羥基的乙�；a(chǎn)物，經(jīng)過與文獻[12]報道對照基本一致，故鑒定該化合物為grayanotoxinⅠ化合物3：白色粉末。易溶于甲醇、吡啶。硅膠拌樣時，嗆鼻。在GF254薄層板上噴1%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱后，先變紫后變藍，放置24h后變?yōu)榫G色。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]照山白化學成分和生物活性研究[D]. 雷亮.華中科技大學 2012
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本文編號：3489150