草麻黃（Ephedra sinica Stapf）作為一味常用中藥,是中藥麻黃和麻黃根在《中國藥典》中收錄的基源植物之一,其莖和根藥效相反,是本植物最大的特點。麻黃莖多用于發(fā)汗散寒,而麻黃根多用于固表止汗,此“同源異效”現(xiàn)象與其莖和根化學(xué)成分的差異密切相關(guān)。內(nèi)生真菌與宿主植物長期的協(xié)同進(jìn)化過程中,形成穩(wěn)定的互利共生關(guān)系,高度多樣化且功能專一的真菌群落可以對宿主植物的代謝物組成產(chǎn)生極大影響。由于宿主的“選擇”作用,它們在宿主不同組織的分布不同,且對不同組織的影響也不同。因此,本文綜合采用宏基因組和代謝組學(xué)技術(shù),系統(tǒng)探究草麻黃莖和根的內(nèi)生真菌群落組成和分布以及莖和根的整體代謝物組成差異,進(jìn)而分析探索內(nèi)生真菌與差異代謝標(biāo)志物形成的相關(guān)關(guān)系。研究結(jié)果如下:1.首先采用ITS2條形碼技術(shù)對采自山西大同地區(qū)的野生草麻黃進(jìn)行物種鑒定,采用BLAST法將其序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的物種序列進(jìn)行比對。相似性高達(dá)100%,確定了采集樣本為草麻黃（E.sinica）。2.基于Illumina Miseq高通量測序結(jié)果,對五月、九月采集野生草麻黃莖和根內(nèi)生真菌群落組成及多樣性進(jìn)行分析,結(jié)果表明,草麻黃莖和... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果

內(nèi)生真菌與草麻黃根-莖代謝差異物形成的相關(guān)關(guān)系研究12取的基因組DNA電泳條帶整齊、純度較高，適宜用作PCR反應(yīng)。PCR產(chǎn)物的電泳圖譜如圖3.2所示，選取條帶均一且明亮的樣本M1，進(jìn)行下一步測序。3.4.2序列比對結(jié)果將測序ITS2序列上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，與數(shù)據(jù)庫中草麻黃物種序列進(jìn)行分析比對。結(jié)果如圖3.3所示，相似性介于98.7%與100%之間，確定采集的植物樣本為草麻黃（Ephedrasinica）。3.5討論與小結(jié)我國野生麻黃資源豐富，分布范圍較廣。即使同一個物種，不同時間和不同地點，都存在著微進(jìn)化、變異的可能，同時伴隨著其附屬內(nèi)生菌和代謝物含量的變化[66]。因此，對所采集樣本進(jìn)行準(zhǔn)確的物種鑒定成為后續(xù)工作的基礎(chǔ)和前提。本實驗采用圖3.3草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果圖3.1基因組DNA的PCR電泳圖圖3.2PCR產(chǎn)物電泳圖

內(nèi)生真菌與草麻黃根-莖代謝差異物形成的相關(guān)關(guān)系研究12取的基因組DNA電泳條帶整齊、純度較高，適宜用作PCR反應(yīng)。PCR產(chǎn)物的電泳圖譜如圖3.2所示，選取條帶均一且明亮的樣本M1，進(jìn)行下一步測序。3.4.2序列比對結(jié)果將測序ITS2序列上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，與數(shù)據(jù)庫中草麻黃物種序列進(jìn)行分析比對。結(jié)果如圖3.3所示，相似性介于98.7%與100%之間，確定采集的植物樣本為草麻黃（Ephedrasinica）。3.5討論與小結(jié)我國野生麻黃資源豐富，分布范圍較廣。即使同一個物種，不同時間和不同地點，都存在著微進(jìn)化、變異的可能，同時伴隨著其附屬內(nèi)生菌和代謝物含量的變化[66]。因此，對所采集樣本進(jìn)行準(zhǔn)確的物種鑒定成為后續(xù)工作的基礎(chǔ)和前提。本實驗采用圖3.3草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果圖3.1基因組DNA的PCR電泳圖圖3.2PCR產(chǎn)物電泳圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]淺談麻黃與麻黃根的異同[J]. 李慧,楊會,宋珂,白云綺,聶波.  中國現(xiàn)代中藥. 2018(09)
[2]麻黃屬植物化學(xué)成分及臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 孫興姣,李紅嬌,劉婷,李驍.  中國藥事. 2018(02)
[3]內(nèi)生菌與植物的互作關(guān)系及對藥用植物的影響[J]. 崔晉龍,郭順星,肖培根.  藥學(xué)學(xué)報. 2017(02)
[4]麻黃臨床應(yīng)用與藥理作用研究進(jìn)展[J]. 楊昕宇,肖長芳,張凱熠,程磐基.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2015(12)
[5]麻黃內(nèi)生真菌產(chǎn)麻黃類生物堿情況研究[J]. 蔡盡忠,何少貴,胡佳.  中國生化藥物雜志. 2015(10)
[6]黃花蒿內(nèi)生菌Myrothecium roridum IFB-E091產(chǎn)生的一個新吲哚衍生物[J]. 申麗,李玲玉,張小君,李明,宋勇春.  藥學(xué)學(xué)報. 2015(10)
[7]中藥麻黃根的研究概述[J]. 岳樂樂,王隸書,程東巖,趙大慶.  中國藥師. 2015(08)
[8]藥用植物DNA條形碼研究進(jìn)展[J]. 楊慧潔,楊世海,張淑麗,路放.  中草藥. 2014(18)
[9]HPLC法測定不同產(chǎn)地和種屬麻黃中麻黃堿與偽麻黃堿的含量[J]. 晉玲,張弦飛,崔治家,朱田田,王振恒,馬毅,林麗,高天鵬.  中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2013(01)
[10]真菌誘導(dǎo)植物次生代謝產(chǎn)物積累的信號機(jī)制及在藥用植物中的應(yīng)用[J]. 崔晉龍,付少彬,高芬,王夢亮.  中草藥. 2012(08)

博士論文
[1]麻黃根及羊齒天門冬化學(xué)成分研究[D]. 陶華明.吉林大學(xué) 2009

碩士論文
[1]麻黃內(nèi)生真菌及其主要活性研究[D]. 孟竹.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]草麻黃化學(xué)成分研究[D]. 趙巍.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號：3428466