目的:本實(shí)驗(yàn)以D-半乳糖致衰老模型大鼠為研究對(duì)象,對(duì)比七氟烷吸入麻醉后衰老大鼠神經(jīng)行為學(xué)、海馬體積以及海馬神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變,并進(jìn)一步評(píng)價(jià)?7煙堿型乙酰膽堿受體（?7nAChR）激動(dòng)劑及拮抗劑干預(yù)后的效應(yīng)。旨在探索衰老大鼠七氟烷麻醉后,中樞?7nAChR調(diào)控對(duì)大鼠海馬結(jié)構(gòu)及認(rèn)知功能改變的作用,從而為術(shù)后認(rèn)知功能障礙（POCD）尋求更方便可靠的臨床診斷依據(jù)。方法:本研究采用SPF級(jí)健康雄性4月齡SD大鼠72只,所有大鼠經(jīng)頸背部皮下注射10%的D-半乳糖0.125 g/kg.d,連續(xù)6周,參照文獻(xiàn)^[1,2]構(gòu)建衰老大鼠模型。建模后將大鼠隨機(jī)分為4組:對(duì)照組（n=18）、七氟烷組（n=18）、?7nAChR激動(dòng)劑組（n=18）、?7nAChR拮抗劑組（n=18）。對(duì)照組吸入運(yùn)載氣體（1 L/min O₂+1 L/min air）6 h;七氟烷組吸入3.2%七氟烷+運(yùn)載氣體6 h;α7nAChR激動(dòng)劑組單次腹腔注射?7nAChR激動(dòng)劑（PNU-282987）5 mg/kg,24 h后處理同七氟烷組;α7nAChR拮抗劑組單次腹腔注射?7nACh... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

水迷宮示意圖

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文林夏妃16所得的圖像傳入GEADW4.6后處理工作站，打開MIP系統(tǒng)重組圖像后，預(yù)覽所攝圖像，若圖像顯示欠清，則需重新進(jìn)行掃描。于冠狀面顱腦圖像上，手動(dòng)逐層描繪顱腦及海馬邊界。逐層描繪完畢時(shí)，軟件自動(dòng)計(jì)算并顯示顱腦及海馬體積等指標(biāo)，所有體積均測(cè)量3次取平均值以增加其可靠性。主要測(cè)量指標(biāo)有：顱腦容積(Brainvolume，BV)，最大顱腦長(zhǎng)度（Maximumbrainlength，BL），最大顱腦寬度（Maximumbrainwidth，BW）；右側(cè)海馬體積(Righthippocampalvolume，RHV)，右側(cè)最大海馬長(zhǎng)度（Rightmaximumhippocampallength，RHL），右側(cè)最大海馬寬度（Rightmaximumhippocampalwidth，RHW）；左側(cè)海馬體積（Lefthippocampalvolume，LHV），左側(cè)最大海馬長(zhǎng)度（Leftmaximumhippocampallength，LHL），左側(cè)最大海馬寬度（Leftmaximumhippocampalwidth，LHW）。為減少個(gè)體化差異導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差，使用顱腦容積對(duì)雙側(cè)海馬、最大顱腦長(zhǎng)度對(duì)雙側(cè)最大海馬長(zhǎng)度，最大顱腦寬度對(duì)雙側(cè)最大海馬寬度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化比較：LHV/BV、RHV/BV、RHL/BL、LHL/BL、RHW/BW、LHW/BW。圖3大鼠大腦MRI矢狀位及冠狀位海馬結(jié)構(gòu)示意圖

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文林夏妃17圖a~h分別為七氟烷組某大鼠MRI圖像逐層手動(dòng)描繪過程，圖i為系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算海馬體積及海馬最大長(zhǎng)度、寬度。圖4MIP系統(tǒng)自動(dòng)測(cè)量海馬體積示意圖1.2.2.4大鼠海馬組織透射電鏡樣本制備(1)各亞組大鼠MRI拍攝完畢后，予2%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉，待麻醉起效，斷頭、去除顱骨，暴露并取出腦組織，于冰塊上快速、完整剝離海馬組織，將修整后的海馬組織置于3%戊二醛固定液中，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)脫水：將上述海馬組織進(jìn)行梯度脫水（70%丙酮15min+80%丙酮15min+90%丙酮15min+100%丙酮10min），重復(fù)進(jìn)行2次。(3)浸透及包埋：將海馬組織放入環(huán)氧樹脂包埋劑中，依次添加十二烷琥珀酸酐（硬化劑）、二乙基苯丙胺（加速劑）、苯二甲酸丁二酯（增塑劑），置于烘干箱中（45℃12h、60℃36h)，聚合硬塊成包埋塊。(4)切片及染色：在顯微鏡下將包埋塊削去表面包埋劑，用超薄切片機(jī)切成厚度為40nm的切片，然后置于含有支持膜的載網(wǎng)上。將滴染液（醋酸鈾+硝酸鉛）滴于制作好的蠟板上，并將載網(wǎng)浮于滴染液上，染色15min。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3411307