α7nACh受體調控對七氟烷麻醉后衰老模型大鼠海馬及認知功能的影響
發(fā)布時間：2021-09-28 05:10
目的:本實驗以D-半乳糖致衰老模型大鼠為研究對象,對比七氟烷吸入麻醉后衰老大鼠神經行為學、海馬體積以及海馬神經元細胞超微結構的改變,并進一步評價?7煙堿型乙酰膽堿受體（?7nAChR）激動劑及拮抗劑干預后的效應。旨在探索衰老大鼠七氟烷麻醉后,中樞?7nAChR調控對大鼠海馬結構及認知功能改變的作用,從而為術后認知功能障礙（POCD）尋求更方便可靠的臨床診斷依據。方法:本研究采用SPF級健康雄性4月齡SD大鼠72只,所有大鼠經頸背部皮下注射10%的D-半乳糖0.125 g/kg.d,連續(xù)6周,參照文獻[1,2]構建衰老大鼠模型。建模后將大鼠隨機分為4組:對照組（n=18）、七氟烷組（n=18）、?7nAChR激動劑組（n=18）、?7nAChR拮抗劑組（n=18）。對照組吸入運載氣體（1 L/min O2+1 L/min air）6 h;七氟烷組吸入3.2%七氟烷+運載氣體6 h;α7nAChR激動劑組單次腹腔注射?7nAChR激動劑（PNU-282987）5 mg/kg,24 h后處理同七氟烷組;α7nAChR拮抗劑組單次腹腔注射?7nACh...
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省
【文章頁數】：66 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
水迷宮示意圖
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文林夏妃16所得的圖像傳入GEADW4.6后處理工作站，打開MIP系統(tǒng)重組圖像后，預覽所攝圖像，若圖像顯示欠清，則需重新進行掃描。于冠狀面顱腦圖像上，手動逐層描繪顱腦及海馬邊界。逐層描繪完畢時，軟件自動計算并顯示顱腦及海馬體積等指標，所有體積均測量3次取平均值以增加其可靠性。主要測量指標有：顱腦容積(Brainvolume，BV)，最大顱腦長度（Maximumbrainlength，BL），最大顱腦寬度（Maximumbrainwidth，BW）；右側海馬體積(Righthippocampalvolume，RHV)，右側最大海馬長度（Rightmaximumhippocampallength，RHL），右側最大海馬寬度（Rightmaximumhippocampalwidth，RHW）；左側海馬體積（Lefthippocampalvolume，LHV），左側最大海馬長度（Leftmaximumhippocampallength，LHL），左側最大海馬寬度（Leftmaximumhippocampalwidth，LHW）。為減少個體化差異導致的實驗誤差，使用顱腦容積對雙側海馬、最大顱腦長度對雙側最大海馬長度，最大顱腦寬度對雙側最大海馬寬度進行標準化比較：LHV/BV、RHV/BV、RHL/BL、LHL/BL、RHW/BW、LHW/BW。圖3大鼠大腦MRI矢狀位及冠狀位海馬結構示意圖
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文林夏妃17圖a~h分別為七氟烷組某大鼠MRI圖像逐層手動描繪過程，圖i為系統(tǒng)自動計算海馬體積及海馬最大長度、寬度。圖4MIP系統(tǒng)自動測量海馬體積示意圖1.2.2.4大鼠海馬組織透射電鏡樣本制備(1)各亞組大鼠MRI拍攝完畢后，予2%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉，待麻醉起效，斷頭、去除顱骨，暴露并取出腦組織，于冰塊上快速、完整剝離海馬組織，將修整后的海馬組織置于3%戊二醛固定液中，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)脫水：將上述海馬組織進行梯度脫水（70%丙酮15min+80%丙酮15min+90%丙酮15min+100%丙酮10min），重復進行2次。(3)浸透及包埋：將海馬組織放入環(huán)氧樹脂包埋劑中，依次添加十二烷琥珀酸酐（硬化劑）、二乙基苯丙胺（加速劑）、苯二甲酸丁二酯（增塑劑），置于烘干箱中（45℃12h、60℃36h)，聚合硬塊成包埋塊。(4)切片及染色：在顯微鏡下將包埋塊削去表面包埋劑，用超薄切片機切成厚度為40nm的切片，然后置于含有支持膜的載網上。將滴染液（醋酸鈾+硝酸鉛）滴于制作好的蠟板上，并將載網浮于滴染液上，染色15min。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]GLYX-13通過NR2B-ERK-CREB信號通路改善氯胺酮麻醉后幼鼠認知功能障礙[J]. 鄭文婧,郄曉娟,鄭文芳. 中國免疫學雜志. 2020(02)
[2]七氟烷對衰老模型大鼠認知功能及海馬超微結構的影響[J]. 楊洋,吳振宇,林夏妃,張超,朱昭瓊. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2019(05)
[3]西格列汀減輕STZ所致的大鼠AD樣癡呆行為和腦病變[J]. 秦旭姣,周紅艷,張軍,楊俊婷,胡夢明,祁金順. 神經解剖學雜志. 2018(06)
[4]光遺傳學技術在中樞神經系統(tǒng)疾病中的應用進展[J]. 林夏妃,朱昭瓊. 遵義醫(yī)學院學報. 2018(05)
[5]右美托咪定可能通過SIRT1信號通路減輕老齡大鼠的術后認知功能障礙[J]. 方四通,陳勇,姚鵬,李依玲,楊玉軍,徐國海. 南方醫(yī)科大學學報. 2018(09)
[6]七氟烷對大鼠近期空間回憶能力、海馬APOE、Aβ表達的影響[J]. 徐珊,朱昭瓊,王義,唐春春,張超. 中國現代醫(yī)學雜志. 2018(05)
[7]Optogenetics and its application in neural degeneration and regeneration[J]. Josue D.Ordaz,Wei Wu,Xiao-Ming Xu. Neural Regeneration Research. 2017(08)
[8]大鼠學習記憶能力及其海馬內TNF-α、IL-6含量的增齡性改變[J]. 金海,陳晨,張明輝,吳芹,石京山,金鳳. 遵義醫(yī)學院學報. 2017(03)
[9]七氟烷對大鼠海馬Tau蛋白基因的調控作用及其對認知的影響[J]. 許凌懿,謝笛,朱宇航,朱昭瓊. 遵義醫(yī)學院學報. 2017(02)
[10]D-半乳糖誘導細胞衰老模型的線粒體能量代謝功能研究[J]. 曹建明,郝東杰,陳華樂,尉驍,侯淵博,葉薇. 中華老年醫(yī)學雜志. 2017 (02)
博士論文
[1]7 Tesla磁共振功能成像對癲癇大鼠腦損傷的長期跟蹤研究[D]. 湯翔宇.華中科技大學 2012
本文編號：3411307
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省
【文章頁數】：66 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
水迷宮示意圖
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文林夏妃16所得的圖像傳入GEADW4.6后處理工作站，打開MIP系統(tǒng)重組圖像后，預覽所攝圖像，若圖像顯示欠清，則需重新進行掃描。于冠狀面顱腦圖像上，手動逐層描繪顱腦及海馬邊界。逐層描繪完畢時，軟件自動計算并顯示顱腦及海馬體積等指標，所有體積均測量3次取平均值以增加其可靠性。主要測量指標有：顱腦容積(Brainvolume，BV)，最大顱腦長度（Maximumbrainlength，BL），最大顱腦寬度（Maximumbrainwidth，BW）；右側海馬體積(Righthippocampalvolume，RHV)，右側最大海馬長度（Rightmaximumhippocampallength，RHL），右側最大海馬寬度（Rightmaximumhippocampalwidth，RHW）；左側海馬體積（Lefthippocampalvolume，LHV），左側最大海馬長度（Leftmaximumhippocampallength，LHL），左側最大海馬寬度（Leftmaximumhippocampalwidth，LHW）。為減少個體化差異導致的實驗誤差，使用顱腦容積對雙側海馬、最大顱腦長度對雙側最大海馬長度，最大顱腦寬度對雙側最大海馬寬度進行標準化比較：LHV/BV、RHV/BV、RHL/BL、LHL/BL、RHW/BW、LHW/BW。圖3大鼠大腦MRI矢狀位及冠狀位海馬結構示意圖
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文林夏妃17圖a~h分別為七氟烷組某大鼠MRI圖像逐層手動描繪過程，圖i為系統(tǒng)自動計算海馬體積及海馬最大長度、寬度。圖4MIP系統(tǒng)自動測量海馬體積示意圖1.2.2.4大鼠海馬組織透射電鏡樣本制備(1)各亞組大鼠MRI拍攝完畢后，予2%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射麻醉，待麻醉起效，斷頭、去除顱骨，暴露并取出腦組織，于冰塊上快速、完整剝離海馬組織，將修整后的海馬組織置于3%戊二醛固定液中，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?2)脫水：將上述海馬組織進行梯度脫水（70%丙酮15min+80%丙酮15min+90%丙酮15min+100%丙酮10min），重復進行2次。(3)浸透及包埋：將海馬組織放入環(huán)氧樹脂包埋劑中，依次添加十二烷琥珀酸酐（硬化劑）、二乙基苯丙胺（加速劑）、苯二甲酸丁二酯（增塑劑），置于烘干箱中（45℃12h、60℃36h)，聚合硬塊成包埋塊。(4)切片及染色：在顯微鏡下將包埋塊削去表面包埋劑，用超薄切片機切成厚度為40nm的切片，然后置于含有支持膜的載網上。將滴染液（醋酸鈾+硝酸鉛）滴于制作好的蠟板上，并將載網浮于滴染液上，染色15min。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]GLYX-13通過NR2B-ERK-CREB信號通路改善氯胺酮麻醉后幼鼠認知功能障礙[J]. 鄭文婧,郄曉娟,鄭文芳. 中國免疫學雜志. 2020(02)
[2]七氟烷對衰老模型大鼠認知功能及海馬超微結構的影響[J]. 楊洋,吳振宇,林夏妃,張超,朱昭瓊. 四川大學學報(醫(yī)學版). 2019(05)
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[4]光遺傳學技術在中樞神經系統(tǒng)疾病中的應用進展[J]. 林夏妃,朱昭瓊. 遵義醫(yī)學院學報. 2018(05)
[5]右美托咪定可能通過SIRT1信號通路減輕老齡大鼠的術后認知功能障礙[J]. 方四通,陳勇,姚鵬,李依玲,楊玉軍,徐國海. 南方醫(yī)科大學學報. 2018(09)
[6]七氟烷對大鼠近期空間回憶能力、海馬APOE、Aβ表達的影響[J]. 徐珊,朱昭瓊,王義,唐春春,張超. 中國現代醫(yī)學雜志. 2018(05)
[7]Optogenetics and its application in neural degeneration and regeneration[J]. Josue D.Ordaz,Wei Wu,Xiao-Ming Xu. Neural Regeneration Research. 2017(08)
[8]大鼠學習記憶能力及其海馬內TNF-α、IL-6含量的增齡性改變[J]. 金海,陳晨,張明輝,吳芹,石京山,金鳳. 遵義醫(yī)學院學報. 2017(03)
[9]七氟烷對大鼠海馬Tau蛋白基因的調控作用及其對認知的影響[J]. 許凌懿,謝笛,朱宇航,朱昭瓊. 遵義醫(yī)學院學報. 2017(02)
[10]D-半乳糖誘導細胞衰老模型的線粒體能量代謝功能研究[J]. 曹建明,郝東杰,陳華樂,尉驍,侯淵博,葉薇. 中華老年醫(yī)學雜志. 2017 (02)
博士論文
[1]7 Tesla磁共振功能成像對癲癇大鼠腦損傷的長期跟蹤研究[D]. 湯翔宇.華中科技大學 2012
本文編號：3411307
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