目的:1.建立不同機械通氣時間致大鼠急性肺損傷（Acute Lung Injury,ALI）模型,觀察肺組織水腫及損傷程度。2.評估水通道蛋白-5（Aquaporin-5,AQP5）在各組肺組織中的表達,分析水通道蛋白-5與肺系數之間的關系,探討AQP5在機械通氣致大鼠ALI中的作用。3.探討ALI中釋放的炎癥因子TNF-a、IL-6對AQP5的表達是否有影響。方法:將30只SD大鼠,按照機械通氣時間（hour Mechanical Ventilation,h MV）不同完全隨機分為5組,即對照組、0.5h MV組、1h MV組、1.5h MV組和2h MV組,每組6只。觀察指標:通過肺組織大體標本圖、肺系數、HE染色,以觀察肺組織水腫及損傷程度;通過免疫組化,采用病理切片染色評分法,以評估各組肺組織中AQP5表達量;采用Spearman相關性分析法分析AQP5表達量與肺系數之間的關系;采用RT-PCR法分別檢測肺組織中TNF-am RNA、IL-6m RNA的表達。結果:隨著機械通氣時間延長,肺組織水腫及損傷逐漸加重;肺組織中TNF-a m RNA、IL-6 m RNA的表達均增加,... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數】：38 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠肺組織大體標本注：圖a大鼠肺組織，體積正常，表面光滑，色澤粉嫩，質軟；與圖a比較，圖b大鼠肺組織，

山西醫(yī)科大學碩士學位論文8注：a表示與對照組相比P<0.01,b表示與0.5hMV組相比P<0.01,c表示與1hMV組相比P<0.01,d表示與1.5hMV組相比P<0.01。2.3肺組織病理切片HE染色如圖2所示，圖a肺泡腔大小正常，形態(tài)規(guī)整，肺泡壁完整、無炎性細胞浸潤，肺間質無水腫；與圖a比較，圖b～圖e中箭頭所指可見不同程度肺泡壁破裂、肺大泡形成，肺泡腔內有紅細胞及粉紅色水腫液滲出，肺間質水腫、炎性細胞浸潤，形成典型ALI病理形態(tài)學特征，表明機械通氣致大鼠ALI建模成功。對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組圖2各組大鼠肺組織切片HE染色（光鏡×100）注：圖a中肺組織，肺泡腔大小正常，形態(tài)規(guī)整，肺泡壁完整、無炎性細胞浸潤，肺間質無水腫；與圖a比較，圖b中肺泡腔形態(tài)較規(guī)整，有少量肺大泡形成，腔內有少量紅細胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁較完整，少量炎性細胞浸潤，肺間質稍水腫；圖c中肺泡腔破裂融合形成肺大泡，腔內紅細胞及粉紅色水腫液滲出，部分肺泡壁塌陷，大量炎性細胞浸潤，肺間質明顯水腫；圖d中大量肺大泡形成，腔內較多紅細胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁破裂、塌陷，大量炎性細胞浸潤，肺間質明顯水腫；圖e中肺泡腔結構破壞嚴重，腔內大量紅細胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁斷裂，肺間質明顯水腫及炎性細胞浸潤。2.4肺組織病理切片免疫組化染色如圖3所示，圖a中AQP5染色均勻一致、呈棕褐色；與圖a比較，圖b～圖e圖中箭頭所指可見AQP5出現染色不均勻，染色呈現棕黃色、淺黃色，表達量逐漸減少甚至無。表明隨著機械通氣對肺組織中AQP5表達量減少有顯著影響。

山西醫(yī)科大學碩士學位論文9對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組圖3各組大鼠肺組織大體標本（光鏡×100）注：圖a肺組織中，AQP5染色均勻一致、呈棕褐色；與圖a比較，圖b肺組織中AQP5染色不均勻，部分呈棕黃色，表達量未見明顯減少；圖c肺組織中AQP5染色呈淺黃色，表達量減少；圖d肺組織中AQP5染色呈淺黃色，表達量明顯減少；圖e肺組織中AQP5染色呈淺黃色或無色，表達量極少甚至無。2.5肺組織病理切片免疫組化AQP5染色評分如表2所示，對照組肺組織染色強度評分和陽性細胞占比評分分別為2.8+0.11、3.8+0.13。與對照組相比，隨著機械通氣時間延長，各組評分均降低，且組間比較，P<0.01，差異有統(tǒng)計學意義。1hMV組和1.5hMV組染色強度評分為1.4+0.26、1.3+0.18，陽性細胞占比評分2.4+0.16、2.2+0.19，各自進行組間比較，P>0.05，差異無統(tǒng)計學意義。表明機械通氣對肺組織中AQP5表達減少有影響。表2各組肺組織免疫組化AQP5染色評分比較(分，sx)分組對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組例數66666染色強度評分2.8+0.112.5+0.13a1.4+0.26ab1.3+0.18ab0.4+0.22abcd陽性細胞占比評分3.8+0.133.6+0.18a2.4+0.16ab2.2+0.19ab0.7+0.27abcd注：a表示與對照組相比P<0.01,b表示與0.5hMV組相比P<0.01,c表示與1hMV組相比P<0.01,d表示與1.5hMV組相比P<0.01。2.6肺系數與免疫組化染色評分相關性分析肺系數與AQP5染色強度評分之間相關性分析結果顯示，r=-0.925，P<0.01，表示兩者之間顯著負相關；肺系數與AQP5染色陽性細胞占比評分之間相關性分析結果顯示，r=-0.951，P<0.01，表示兩者之間呈顯著負相關。


本文編號：3361280