目的:1.建立不同機(jī)械通氣時(shí)間致大鼠急性肺損傷（Acute Lung Injury,ALI）模型,觀察肺組織水腫及損傷程度。2.評估水通道蛋白-5（Aquaporin-5,AQP5）在各組肺組織中的表達(dá),分析水通道蛋白-5與肺系數(shù)之間的關(guān)系,探討AQP5在機(jī)械通氣致大鼠ALI中的作用。3.探討ALI中釋放的炎癥因子TNF-a、IL-6對AQP5的表達(dá)是否有影響。方法:將30只SD大鼠,按照機(jī)械通氣時(shí)間（hour Mechanical Ventilation,h MV）不同完全隨機(jī)分為5組,即對照組、0.5h MV組、1h MV組、1.5h MV組和2h MV組,每組6只。觀察指標(biāo):通過肺組織大體標(biāo)本圖、肺系數(shù)、HE染色,以觀察肺組織水腫及損傷程度;通過免疫組化,采用病理切片染色評分法,以評估各組肺組織中AQP5表達(dá)量;采用Spearman相關(guān)性分析法分析AQP5表達(dá)量與肺系數(shù)之間的關(guān)系;采用RT-PCR法分別檢測肺組織中TNF-am RNA、IL-6m RNA的表達(dá)。結(jié)果:隨著機(jī)械通氣時(shí)間延長,肺組織水腫及損傷逐漸加重;肺組織中TNF-a m RNA、IL-6 m RNA的表達(dá)均增加,... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠肺組織大體標(biāo)本注：圖a大鼠肺組織，體積正常，表面光滑，色澤粉嫩，質(zhì)軟；與圖a比較，圖b大鼠肺組織，

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文8注：a表示與對照組相比P<0.01,b表示與0.5hMV組相比P<0.01,c表示與1hMV組相比P<0.01,d表示與1.5hMV組相比P<0.01。2.3肺組織病理切片HE染色如圖2所示，圖a肺泡腔大小正常，形態(tài)規(guī)整，肺泡壁完整、無炎性細(xì)胞浸潤，肺間質(zhì)無水腫；與圖a比較，圖b～圖e中箭頭所指可見不同程度肺泡壁破裂、肺大泡形成，肺泡腔內(nèi)有紅細(xì)胞及粉紅色水腫液滲出，肺間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤，形成典型ALI病理形態(tài)學(xué)特征，表明機(jī)械通氣致大鼠ALI建模成功。對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組圖2各組大鼠肺組織切片HE染色（光鏡×100）注：圖a中肺組織，肺泡腔大小正常，形態(tài)規(guī)整，肺泡壁完整、無炎性細(xì)胞浸潤，肺間質(zhì)無水腫；與圖a比較，圖b中肺泡腔形態(tài)較規(guī)整，有少量肺大泡形成，腔內(nèi)有少量紅細(xì)胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁較完整，少量炎性細(xì)胞浸潤，肺間質(zhì)稍水腫；圖c中肺泡腔破裂融合形成肺大泡，腔內(nèi)紅細(xì)胞及粉紅色水腫液滲出，部分肺泡壁塌陷，大量炎性細(xì)胞浸潤，肺間質(zhì)明顯水腫；圖d中大量肺大泡形成，腔內(nèi)較多紅細(xì)胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁破裂、塌陷，大量炎性細(xì)胞浸潤，肺間質(zhì)明顯水腫；圖e中肺泡腔結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重，腔內(nèi)大量紅細(xì)胞及粉紅色水腫液滲出，肺泡壁斷裂，肺間質(zhì)明顯水腫及炎性細(xì)胞浸潤。2.4肺組織病理切片免疫組化染色如圖3所示，圖a中AQP5染色均勻一致、呈棕褐色；與圖a比較，圖b～圖e圖中箭頭所指可見AQP5出現(xiàn)染色不均勻，染色呈現(xiàn)棕黃色、淺黃色，表達(dá)量逐漸減少甚至無。表明隨著機(jī)械通氣對肺組織中AQP5表達(dá)量減少有顯著影響。

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文9對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組圖3各組大鼠肺組織大體標(biāo)本（光鏡×100）注：圖a肺組織中，AQP5染色均勻一致、呈棕褐色；與圖a比較，圖b肺組織中AQP5染色不均勻，部分呈棕黃色，表達(dá)量未見明顯減少；圖c肺組織中AQP5染色呈淺黃色，表達(dá)量減少；圖d肺組織中AQP5染色呈淺黃色，表達(dá)量明顯減少；圖e肺組織中AQP5染色呈淺黃色或無色，表達(dá)量極少甚至無。2.5肺組織病理切片免疫組化AQP5染色評分如表2所示，對照組肺組織染色強(qiáng)度評分和陽性細(xì)胞占比評分分別為2.8+0.11、3.8+0.13。與對照組相比，隨著機(jī)械通氣時(shí)間延長，各組評分均降低，且組間比較，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1hMV組和1.5hMV組染色強(qiáng)度評分為1.4+0.26、1.3+0.18，陽性細(xì)胞占比評分2.4+0.16、2.2+0.19，各自進(jìn)行組間比較，P>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明機(jī)械通氣對肺組織中AQP5表達(dá)減少有影響。表2各組肺組織免疫組化AQP5染色評分比較(分，sx)分組對照組0.5hMV組1hMV組1.5hMV組2hMV組例數(shù)66666染色強(qiáng)度評分2.8+0.112.5+0.13a1.4+0.26ab1.3+0.18ab0.4+0.22abcd陽性細(xì)胞占比評分3.8+0.133.6+0.18a2.4+0.16ab2.2+0.19ab0.7+0.27abcd注：a表示與對照組相比P<0.01,b表示與0.5hMV組相比P<0.01,c表示與1hMV組相比P<0.01,d表示與1.5hMV組相比P<0.01。2.6肺系數(shù)與免疫組化染色評分相關(guān)性分析肺系數(shù)與AQP5染色強(qiáng)度評分之間相關(guān)性分析結(jié)果顯示，r=-0.925，P<0.01，表示兩者之間顯著負(fù)相關(guān)；肺系數(shù)與AQP5染色陽性細(xì)胞占比評分之間相關(guān)性分析結(jié)果顯示，r=-0.951，P<0.01，表示兩者之間呈顯著負(fù)相關(guān)。


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