隱丹參酮對Hepal-6細胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用與機制的研究
發(fā)布時間:2021-06-26 18:56
目的研究中藥單體隱丹參酮對肝癌Hepa1-6細胞的抑制作用,建立Hepa1-6細胞小鼠皮下移植瘤模型,采用腹腔注射的給藥方式來檢測隱丹參酮對肝癌移植瘤體的抑制作用。在體外,培養(yǎng)Hepa1-6細胞,采用流式細胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡法及RT-PCR等方法檢測隱丹參酮對該細胞的增殖及凋亡的作用。進一步探討隱丹參酮抗肝癌作用的相關(guān)機制。方法1.使用CCK-8法檢測隱丹參酮對Hepa1-6細胞增殖活力的影響;流式細胞儀分析隱丹參酮對Hepa1-6細胞凋亡與周期的影響;蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測隱丹參酮對Hepa1-6細胞內(nèi)活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶Cleaved-PARP、Cyclin D1、P21和P53表達的影響;RT-PCR法檢測細胞凋亡相關(guān)基因P53、P21及Caspase9的表達。2.Hepa1-6細胞株于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。18只C57BL/6小鼠右側(cè)背部皮下接種Hepa1-6腫瘤細胞,建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,隨機分成3組,每組6只。分別為模型組、隱丹參酮40mg/kg組及隱丹參酮20mg/kg組。皮下移植瘤模型成瘤后,每隔一天給一次藥,給藥周期是2周,...
【文章來源】:山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
模型組和給藥組小鼠平均體重線性分析圖
山西中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文10圖1模型組和給藥組小鼠平均體重線性分析圖3.2隱丹參酮對Hepa1-6肝癌移植瘤的抑制作用給藥結(jié)束后,對小鼠進行安樂死,取出各組瘤體進行拍照,結(jié)果如圖2所示:直接觀察到隱丹參酮40mg/kg組腫瘤體積明顯小于其他組。將各組腫瘤終體積進行組間比較,得出隨著給藥劑量的增加,腫瘤體積逐漸減小,差異具有顯著性(p<0.05)。瘤體體積比較見圖3。圖2各組瘤體比較圖注:隱丹參酮40mg/kg組有一個缺失是瘤體經(jīng)2周給藥后最終消失,并非死亡
隱丹參酮對Hepa1-6細胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用與機制的研究11圖3各組小鼠瘤體終體積比較圖注:(A)隱丹參酮20mg/kg組,(B)隱丹參酮40mg/kg組,(C)模型組,*P<0.05vsControl,**P<0.01vsControl如表1所示,采用方差分析檢驗之后,模型組、隱丹參酮40mg/kg組及隱丹參酮20mg/kg組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),隱丹參酮40mg/kg組及20mg/kg組抑瘤率分別為55.83%和27.91%,經(jīng)查閱文獻[7],抑瘤率≥40%,則認為隱丹參酮40mg/kg組對腫瘤具有一定療效。表1隱丹參酮對各組小鼠腫瘤生長抑制率(XS,n=6)組別n(只)抑瘤率(%)模型組隱丹參酮40mg/kg組隱丹參酮20mg/kg組666-55.8327.91▲注:與模型組相比p<0.05,▲p<0.013.3隱丹參酮對凋亡相關(guān)蛋白表達的影響蛋白免疫印跡實驗結(jié)果如圖4所示,隱丹參酮40mg/kg組與模型組比較,隱丹參酮促進CleavedPARP、PARP及Caspase9凋亡蛋白水平的表達,抑制Bcl-2蛋白水平的表達。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]隱丹參酮誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-231細胞凋亡的研究[J]. 周南陽,趙虹. 中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2017(34)
[2]腫瘤微環(huán)境與免疫治療研究進展[J]. 陳雪曼,宋爾衛(wèi). 生物化學(xué)與生物物理進展. 2017(08)
[3]丹參活性成分及藥理作用研究進展[J]. 姜雪,史磊. 藥學(xué)研究. 2017(03)
[4]莪術(shù)主要單體成分抗炎、抗腫瘤作用研究進展[J]. 趙志梅,張立杰,夏天,肖志. 藥物評價研究. 2017(01)
[5]隱丹參酮抑制惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞C6增殖及對JAK2-STAT3信號通路的影響[J]. 唐煥煥,沈曉燕,段小群,徐慶,苑博,張嫦麗,呂良. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[6]免疫檢查點阻斷用于腫瘤治療的研究進展[J]. 盧伸,蘇丹. 實用腫瘤雜志. 2016(01)
[7]隱丹參酮對脂多糖誘導(dǎo)肝硬化大鼠肝性腦病的改善作用研究[J]. 方閱,朱蓓琳,張淵. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2016(01)
[8]隱丹參酮對腎癌干細胞增殖和凋亡的影響[J]. 馮敏,賈明華. 中國組織工程研究. 2016(01)
[9]隱丹參酮對白血病細胞伊馬替尼敏感性和P-糖蛋白表達作用的研究[J]. 葛宇清,程汝濱,楊波,黃真,陳喆. 中國中藥雜志. 2015(12)
[10]生物信息學(xué)方法分析人腎細胞癌中潛在的miRNAs生物標志物和其調(diào)控的關(guān)鍵通路[J]. 李偉,李曉宇,黃建華,王光春,彭波,劉敏,許云飛,姚旭東,鄭軍華. 臨床泌尿外科雜志. 2015(06)
本文編號:3251892
【文章來源】:山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
模型組和給藥組小鼠平均體重線性分析圖
山西中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文10圖1模型組和給藥組小鼠平均體重線性分析圖3.2隱丹參酮對Hepa1-6肝癌移植瘤的抑制作用給藥結(jié)束后,對小鼠進行安樂死,取出各組瘤體進行拍照,結(jié)果如圖2所示:直接觀察到隱丹參酮40mg/kg組腫瘤體積明顯小于其他組。將各組腫瘤終體積進行組間比較,得出隨著給藥劑量的增加,腫瘤體積逐漸減小,差異具有顯著性(p<0.05)。瘤體體積比較見圖3。圖2各組瘤體比較圖注:隱丹參酮40mg/kg組有一個缺失是瘤體經(jīng)2周給藥后最終消失,并非死亡
隱丹參酮對Hepa1-6細胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用與機制的研究11圖3各組小鼠瘤體終體積比較圖注:(A)隱丹參酮20mg/kg組,(B)隱丹參酮40mg/kg組,(C)模型組,*P<0.05vsControl,**P<0.01vsControl如表1所示,采用方差分析檢驗之后,模型組、隱丹參酮40mg/kg組及隱丹參酮20mg/kg組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),隱丹參酮40mg/kg組及20mg/kg組抑瘤率分別為55.83%和27.91%,經(jīng)查閱文獻[7],抑瘤率≥40%,則認為隱丹參酮40mg/kg組對腫瘤具有一定療效。表1隱丹參酮對各組小鼠腫瘤生長抑制率(XS,n=6)組別n(只)抑瘤率(%)模型組隱丹參酮40mg/kg組隱丹參酮20mg/kg組666-55.8327.91▲注:與模型組相比p<0.05,▲p<0.013.3隱丹參酮對凋亡相關(guān)蛋白表達的影響蛋白免疫印跡實驗結(jié)果如圖4所示,隱丹參酮40mg/kg組與模型組比較,隱丹參酮促進CleavedPARP、PARP及Caspase9凋亡蛋白水平的表達,抑制Bcl-2蛋白水平的表達。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]隱丹參酮誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-231細胞凋亡的研究[J]. 周南陽,趙虹. 中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2017(34)
[2]腫瘤微環(huán)境與免疫治療研究進展[J]. 陳雪曼,宋爾衛(wèi). 生物化學(xué)與生物物理進展. 2017(08)
[3]丹參活性成分及藥理作用研究進展[J]. 姜雪,史磊. 藥學(xué)研究. 2017(03)
[4]莪術(shù)主要單體成分抗炎、抗腫瘤作用研究進展[J]. 趙志梅,張立杰,夏天,肖志. 藥物評價研究. 2017(01)
[5]隱丹參酮抑制惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞C6增殖及對JAK2-STAT3信號通路的影響[J]. 唐煥煥,沈曉燕,段小群,徐慶,苑博,張嫦麗,呂良. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[6]免疫檢查點阻斷用于腫瘤治療的研究進展[J]. 盧伸,蘇丹. 實用腫瘤雜志. 2016(01)
[7]隱丹參酮對脂多糖誘導(dǎo)肝硬化大鼠肝性腦病的改善作用研究[J]. 方閱,朱蓓琳,張淵. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2016(01)
[8]隱丹參酮對腎癌干細胞增殖和凋亡的影響[J]. 馮敏,賈明華. 中國組織工程研究. 2016(01)
[9]隱丹參酮對白血病細胞伊馬替尼敏感性和P-糖蛋白表達作用的研究[J]. 葛宇清,程汝濱,楊波,黃真,陳喆. 中國中藥雜志. 2015(12)
[10]生物信息學(xué)方法分析人腎細胞癌中潛在的miRNAs生物標志物和其調(diào)控的關(guān)鍵通路[J]. 李偉,李曉宇,黃建華,王光春,彭波,劉敏,許云飛,姚旭東,鄭軍華. 臨床泌尿外科雜志. 2015(06)
本文編號:3251892
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