目的:肝細(xì)胞癌（HCC）是世界上最常見的癌癥之一,在中國(guó)每年約有20多萬人死于肝癌。盡管HCC的治療藥物不斷發(fā)展,但生存率仍然不高。研究表明從頭脂肪酸合成異常是HCC發(fā)生和發(fā)展的重要原因,且抑制從頭脂肪酸合成關(guān)鍵酶脂肪酸合酶（FASN）的表達(dá)能夠抑制小鼠HCC的形成。中醫(yī)藥是我國(guó)的傳統(tǒng)科學(xué),在抑制腫瘤進(jìn)展、減輕手術(shù)并發(fā)癥以及提高化療和放射療法的敏感性等癌癥治療的多個(gè)過程中都發(fā)揮著重要作用。因此,從中藥提取物中尋找化合物抑制FASN的表達(dá)來抑制從頭脂肪酸異常合成,從而延緩HCC的發(fā)展是一個(gè)可能的方向。蛇床子素具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等多種藥理作用,且已有體外和裸鼠模型研究表明蛇床子素對(duì)HCC具有一定的治療作用,但其能否通過AKT/mTORC1/FASN通路調(diào)控從頭脂肪酸合成來抑制HCC的發(fā)展還未有人研究。本課題組前期研究結(jié)果表明采用高壓尾靜脈轉(zhuǎn)染技術(shù)在小鼠肝臟內(nèi)同時(shí)過表達(dá)AKT和c-Met質(zhì)�？山⑿∈驢CC模型,且該模型具有重度脂肪化和靶點(diǎn)明確等特點(diǎn)。本研究擬采用這一新型HCC模型來研究蛇床子素通過AKT/mTORC1/FASN和Erk信號(hào)通路延緩HCC發(fā)展的作用機(jī)制,旨在為蛇床子素... 

【文章來源】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蛇床子素延緩AKT/c-Met誘導(dǎo)小鼠肝細(xì)胞癌的發(fā)生（±,=5）

蛇床子素調(diào)控AKT/mTORC1/FASN和Erk信號(hào)通路延緩肝細(xì)胞癌發(fā)展的作用機(jī)制研究17幾乎不見胞漿；AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H小鼠肝臟組織病變減輕，細(xì)胞結(jié)構(gòu)較清晰，空泡變性減少，細(xì)胞核變孝多核細(xì)胞明顯減少，肝細(xì)胞內(nèi)充滿少量胞漿；且AKT/c-Met-Ost-H組改善更為明顯，腫瘤病變區(qū)域外可見正常組織區(qū)域。圖2蛇床子素改善AKT/c-Met誘導(dǎo)小鼠肝組織病理學(xué)變化（比例尺=100μm）Fig2OstholeimprovesthepathologicalchangesoflivertissueinAKT/c-Met-inducedmice.(scalebar=100μm)3.3蛇床子素對(duì)AKT/c-Met誘導(dǎo)HCC小鼠肝臟組織和血液中腫瘤標(biāo)記物的影響AFP和GPC3是HCC臨床上最常用的的診斷和預(yù)后標(biāo)志物。我們采用Elisa檢測(cè)了各組小鼠血清中AFP蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果如圖3所示。與WT組相比，AKT/c-Met模型組AFP蛋白表達(dá)量明顯升高（P<0.001）；經(jīng)蛇床子素干預(yù)后AKT/c-Met誘導(dǎo)的小鼠血清中AFP表達(dá)量減少（P<0.05）且AKT/c-Met-Ost-H組減少更為明顯（P<0.01）。接下來我們用qRT-PCR檢測(cè)了肝臟組織中AFP和GPC3mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果如圖3B、C所示。與WT組相比，AKT/c-Met模型組和GPC3的mRNA表達(dá)量明顯升高（P<0.05）；經(jīng)蛇床子素干預(yù)后AKT/c-Met誘導(dǎo)的小鼠肝臟組織中AFP和GPC3的mRNA表達(dá)量明顯減少

蛇床子素調(diào)控AKT/mTORC1/FASN和Erk信號(hào)通路延緩肝細(xì)胞癌發(fā)展的作用機(jī)制研究254A所示，與正常組相比，AKT/c-Met模型組肝臟組織內(nèi)PCNA和Ki67蛋白表達(dá)水平明顯升高；而蛇床子素干預(yù)后，AKT/c-Met-Ost-L和AKT/c-Met-Ost-H組與模型組相比，小鼠肝臟組織內(nèi)上述兩種增殖標(biāo)記物表達(dá)水平明顯降低且AKT/c-Met-Ost-H降低更明顯。同時(shí)我們還用WB檢測(cè)了PCNA如圖4A、B、C所示，PCNA蛋白WB檢測(cè)結(jié)果與免疫組化檢測(cè)結(jié)果一致。為了研究蛇床子素抑制HCC增殖可能的機(jī)制，我們用WB檢測(cè)了增殖相關(guān)蛋Erk的活化情況。從圖4B、C可知，各組小鼠肝臟組織中總Erk表達(dá)量不變。與WT組相比，模型組p-Erk1/2表達(dá)量顯著增加（P<0.001），Erk被激活；與模型組相比，蛇床子素干預(yù)后小鼠肝臟組織p-Erk1/2蛋白表達(dá)量顯著降低（P<0.05），Erk活性受到抑制；AKT/c-Met-Ost-H比AKT/c-Met-Ost-L抑制效果更顯著。注：##P<0.01,###P<0.001vsWT;*P<0.05,**P<0.01vsAKT/c-Met圖4蛇床子素抑制AKT/c-Met誘導(dǎo)小鼠肝臟腫瘤增殖和Erk磷酸化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Hepatic steatosis:A benign disease or a silent killer[J]. Abdel-Rahman,El-Zayadi.  World Journal of Gastroenterology. 2008(26)



本文編號(hào)：3212295