本文關(guān)鍵詞：嗎啡促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)阿霉素和紫杉醇抵抗的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究嗎啡對(duì)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A的增殖力的影響,研究嗎啡對(duì)干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Oct4和C-myc的影響。探索嗎啡與阿霉素和紫杉醇聯(lián)合使用對(duì)乳腺癌細(xì)胞藥物敏感性的影響。探索納美芬能否抑制嗎啡對(duì)腫瘤的作用。方法:1、以懸浮細(xì)胞無(wú)血清微球體培養(yǎng)(Sphere formation assay)技術(shù)檢測(cè)嗎啡對(duì)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A微球體形成能力的影響;細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)(Colony formation assay)觀察嗎啡對(duì)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A增殖能力的影響;2、利用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)和熒光定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)檢測(cè)嗎啡對(duì)乳腺癌細(xì)胞中腫瘤干細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Oct4,C-myc的表達(dá)變化;3、以噻唑藍(lán)染色(MTT)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry analysis)和Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)嗎啡與化療藥物阿霉素或紫杉醇聯(lián)合使用后對(duì)細(xì)胞活力,凋亡以及凋亡相關(guān)蛋白cleaved Caspase-3和cleaved PARP的變化;4、以懸浮細(xì)胞無(wú)血清微球體培養(yǎng)檢測(cè)納美芬抑制嗎啡促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖能力。結(jié)果:1、嗎啡增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A的微球體形成能力;與對(duì)照組相比,經(jīng)嗎啡(1,10μM)作用后的MCF-7和MCF-10A細(xì)胞形成的微球體數(shù)量明顯增加(P0.001),微球體體積顯著增大(P0.001);2、細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,嗎啡(1,10μM)作用于MCF-7和MCF10A細(xì)胞后,1μM嗎啡處理后的MCF-7和MCF-10A的細(xì)胞克隆形成能力分別增加到20.14%±1.32%,18.06%±0.76%(P0.01),而10μM嗎啡處理后,MCF-7和MCF-10A的細(xì)胞克隆形成能力分別增加到32.48%±0.85%,27.54%±0.76%(P0.001),顯示嗎啡增強(qiáng)MCF-7和MCF10A克隆形成能力;3、Real-time PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,嗎啡處理后的MCF-7細(xì)胞,其Oct4和C-myc的m RNA轉(zhuǎn)錄水平明顯增高,1μM和10μM嗎啡組Oct4分別增加2.4±0.15(p0.01)、13.6±0.21(P0.001),C-myc增加4.3±0.13(P0.01)、15.7±0.16(P0.001),而Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示,1μM和10μM嗎啡作用于MCF-7細(xì)胞后,MCF-7細(xì)胞中的Oct4和C-myc蛋白表達(dá)水平明顯增加;4、嗎啡降低阿霉素和紫杉醇對(duì)MCF-7細(xì)胞的毒性作用。在0.5μM阿霉素或10 n M紫杉醇作用下,單獨(dú)加入阿霉素或紫杉醇的為對(duì)照組,結(jié)果顯示,阿霉素或紫杉醇與嗎啡聯(lián)合應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)組中MCF-7細(xì)胞的cleaved PARP、cleaved caspase-3表達(dá)量下降,嗎啡降低阿霉素或紫杉醇誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡蛋白的表達(dá)變化;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,嗎啡(1μM、10μM)降低0.5μM阿霉素或10 n M紫杉醇作用下凋亡細(xì)胞的比例減少了19.73%±0.86%(P0.001),22.23%±0.50%(P0.001);7.43%±0.76%(P0.001),10.76%±0.56%(P0.01);5、納美芬(10μM)抑制嗎啡(10μM)促進(jìn)MCF-7、MCF-10A的微球體形成能力(P0.001)。結(jié)論:阿片類鎮(zhèn)痛藥嗎啡促進(jìn)MCF-7和MCF-10A細(xì)胞成球能力以及克隆形成能力;嗎啡增加腫瘤干細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Oct4、C-myc在蛋白水平和轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)量;嗎啡增強(qiáng)MCF-7細(xì)胞對(duì)化療藥物紫杉醇和阿霉素的耐受性,導(dǎo)致MCF-7細(xì)胞對(duì)紫杉醇和阿霉素耐藥;阿片類受體拮抗劑納美芬一定程度上抑制嗎啡所促進(jìn)MCF-7、MCF-10A細(xì)胞的成球能力。綜上所述,本研究揭示了嗎啡對(duì)化學(xué)藥物治療效果的影響,為嗎啡的臨床應(yīng)用提供了新的指導(dǎo)。
【關(guān)鍵詞】：嗎啡 化療藥物抵抗 阿霉素 紫杉醇 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R614;R737.9
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-21
• 1、材料14-16
• 1.1 細(xì)胞系14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)藥品、試劑14-16
• 2、方法16-21
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16
• 2.2 MTT細(xì)胞毒性測(cè)定16
• 2.3 細(xì)胞凋亡檢測(cè)16-17
• 2.4 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)17-18
• 2.5 微球體形成試驗(yàn)18-19
• 2.6 細(xì)胞克隆成形實(shí)驗(yàn)19
• 2.7 蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)19-20
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法20-21
• 結(jié)果21-28
• 1 嗎啡增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MCF-10A的增殖能力21-23
• 2 嗎啡誘導(dǎo)MCF-7 細(xì)胞對(duì)阿霉素和紫杉醇的耐藥23-26
• 3 納美芬（Nalmefene）逆轉(zhuǎn)嗎啡促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的微球體形成能力26-28
• 討論28-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 綜述35-44
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 病例報(bào)告44-48
• 參考文獻(xiàn)47-48
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況48-49
• 致謝49-50

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1 高維忠,翟新民,徐迅,朱岳,王明才,曹旭東;~(32)P標(biāo)記陽(yáng)離子交換樹脂微球體方法的研究[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1988年03期

2 李練兵;;覆蓋甘油三酯的環(huán)丙甲羥二羥嗎啡酮微球體釋放脂肪酶的效應(yīng)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊(cè);1992年06期

3 林友文,蔣智清,曾志斌,張婉春;5-氟尿嘧啶羧甲基殼聚糖微球體的制備及體外釋放[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年04期

4 陳國(guó)廣;陳鋒;陸高圣;李學(xué)明;韋萍;;響應(yīng)面分析法優(yōu)化利培酮微球體外加速釋放條件[J];中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué);2009年02期

5 董愛梅,張建強(qiáng);眼用微球制劑研究進(jìn)展[J];齊魯藥事;2005年01期

6 陳智;田景振;;藥用微球應(yīng)用概況[J];齊魯藥事;2009年03期

7 李元振,成光,李潔;微球給藥系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];河北醫(yī)藥;2004年12期

8 張華;王翔;王學(xué)清;張強(qiáng);;注射用利培酮微球的制備和體外性質(zhì)評(píng)價(jià)[J];中國(guó)新藥雜志;2013年20期

9 韓國(guó)華;李美琴;朱澄云;;載藥中空微球研究進(jìn)展[J];沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年07期

10 徐俊;王鵬華;董曉慶;常津;;表皮生長(zhǎng)因子微球的制備與評(píng)價(jià)[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2009年03期

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 劉玉梅 張自強(qiáng);微球制劑研究日益深入[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

2 陳恃雷、冷彤;墨發(fā)明抗癌“特洛伊木馬”[N];人民日?qǐng)?bào);2007年

3 陸志城;2002年美國(guó)批準(zhǔn)上市的新分子實(shí)體藥物[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王金霞;大型海藻微球體的生物反應(yīng)器培養(yǎng)和應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2010年

2 季翔;基于磺化聚苯乙烯模板的各向異性和多孔微球的制備[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2013年

3 王辰允;紫杉醇長(zhǎng)效緩釋注射微球的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

4 劉鳳霞;載蛋白藥物雙層微球的制備和性質(zhì)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

5 吳誠(chéng);鹽酸多柔比星長(zhǎng)效注射微球的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

6 周旋;殼聚糖微球制備優(yōu)化及其乙�；⑶蜃鳛闈撛谒ㄈ牧系难芯縖D];中國(guó)海洋大學(xué);2012年

7 苗宗成;多元吡喃葡萄糖環(huán)基微球雙相選擇吸附研究[D];陜西科技大學(xué);2010年

8 王吉有;光學(xué)微球腔中的若干光學(xué)新現(xiàn)象研究[D];南開大學(xué);2001年

9 肖桂勇;霧化干燥法制備羥基磷灰石微球的結(jié)構(gòu)表征及其生物學(xué)行為研究[D];山東大學(xué);2010年

10 潘吉錚;聚乳酸微球載體的結(jié)構(gòu)與控釋性能關(guān)系及模型[D];華南理工大學(xué);2004年

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1 曹晶晶;高溫?zé)峤夥ù笠?guī)模制備碗狀和籠狀微球的探索及其機(jī)理研究[D];鄭州大學(xué);2015年

2 王捷;懸浮聚合法制備物理熱膨脹發(fā)泡微球[D];浙江工業(yè)大學(xué);2014年

3 牛東革;嗎啡促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)阿霉素和紫杉醇抵抗的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

4 曾佳;彩色微球的制備及其應(yīng)用[D];江南大學(xué);2013年

5 靳美霞;利用天然陽(yáng)離子聚合物殼聚糖提高有效性的口服疫苗微球的研究[D];廣東藥學(xué)院;2009年

6 任皓;利培酮長(zhǎng)效注射微球的研究[D];南京工業(yè)大學(xué);2006年

7 蘭婷;聚乳酸微球的制備及性能研究[D];西北大學(xué);2007年

8 畢立軍;新型胃漂浮微球的研究[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2009年

9 楊靜;聚合物中空微球的制備及性能研究[D];南京理工大學(xué);2012年

10 曾燁婧;快速膜乳化法制備載紫杉醇聚乳酸類微球的研究[D];北京化工大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：320707