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AMPK介導線粒體融合與裂變在抑制P2X7受體抗小鼠腦缺血/再灌注損傷中的作用

發(fā)布時間:2021-05-20 05:55
  缺血性腦卒中的發(fā)生是由腦部血液供應(yīng)不足造成的,目前主要的治療手段是恢復血液再灌注,但是在這一過程中會進一步加重腦組織損傷,這種病理生理改變稱為腦缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷。由于其發(fā)生機制復雜,近年來對腦I/R損傷的病理生理機制及如何減輕這一損傷成為研究的熱點。研究表明,P2X7受體受到抑制時可發(fā)揮抗腦I/R損傷的作用,但其作用機制仍需要進一步的研究。線粒體是為細胞提供能量的動態(tài)細胞器,在正常狀態(tài)下處于融合與裂變的平衡之中。但當發(fā)生I/R損傷時,其動態(tài)平衡會遭到破壞并趨向于裂變,從而加重損傷。研究表明AMP-activated protein kinase(AMPK)可以調(diào)節(jié)線粒體的融合與裂變,且在酒精性肝病中抑制P2X7受體可以增強AMPK的活性。但在小鼠腦I/R損傷中,抑制P2X7受體與AMPK是否存在相似的作用尚未有文獻報導。因此,本研究采用在體和離體兩部分實驗來探討AMPK介導的線粒體融合與裂變在抑制P2X7受體抗小鼠腦I/R損傷中的作用及具體的作用機制。目的:探討AMPK介導的線粒體融合與裂變在抑制P2X7受體抗小鼠腦I/R損傷中的作用... 

【文章來源】:蚌埠醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1. 材料與要儀器
        1.1. 實驗動物
        1.2. 主要藥品與試劑
        1.3. 主要儀器設(shè)備
    2. 方法
        2.1. 實驗分組與給藥處理
        2.2. 小鼠腦I/R損傷模型制備
        2.3. 小鼠神經(jīng)行為學評分
        2.4. 小鼠腦梗死體積百分率的計算
        2.5. 小鼠大腦皮層中線粒體形態(tài)的檢測
        2.6. Western Blot檢測小鼠腦組織中p-AMPK、p-Drp1、Mfn2蛋白表達的變化
        2.7. 神經(jīng)元細胞提取
        2.8. 神經(jīng)元細胞分組、給藥及H/R損傷模型制備
        2.9. 細胞存活率檢測
        2.10. ROS檢測
        2.11. 線粒體形態(tài)檢測
        2.12. Western Blot檢測神經(jīng)元細胞中p-AMPK、p-Drp1、Mfn2蛋白表達的變化
    3. 統(tǒng)計學分析
實驗結(jié)果
    1. 抑制P2X7受體對腦I/R損傷小鼠神經(jīng)行為學評分的影響
    2. 抑制P2X7受體對腦I/R損傷小鼠腦梗死體積百分率的影響
    3. 抑制P2X7受體對腦I/R損傷小鼠腦腦組織線粒體形態(tài)的影響
    4. 抑制P2X7受體對腦I/R損傷小鼠腦組織p-AMPK表達的影響
    5. 抑制P2X7受體對腦I/R損傷小鼠腦組織Mfn2、p-Drp1表達的影響
    6. 神經(jīng)元細胞生長狀態(tài)
    7. 抑制P2X7受體對H/R損傷神經(jīng)元細胞死亡率的影響
    8. 抑制P2X7受體對H/R損傷神經(jīng)元細胞線粒體形態(tài)的影響
    9. 抑制P2X7受體對H/R損傷神經(jīng)元細胞ROS產(chǎn)生的影響
    10. 抑制P2X7受體對H/R損傷神經(jīng)元細胞p-AMPK表達的影響
    11. 抑制P2X7受體對H/R損傷神經(jīng)元細胞Mfn2、p-Drp1表達的影響
討論
結(jié)論
課題創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
附錄A 主要英文縮略詞表
附錄B 主要試劑配制方法
附錄C 個人簡歷及論文發(fā)表情況
附錄D 綜述
    參考文獻



本文編號:3197215

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