目的:體外培養(yǎng)小鼠MIN-6細(xì)胞,進(jìn)行分組干預(yù),明確血管緊張素（1-7）對(duì)高糖應(yīng)力下胰島β細(xì)胞去分化的影響,為糖尿病治療提供新思路。方法:在紫外線(xiàn)消毒30分鐘的超凈工作臺(tái),將MIN-6小鼠胰島細(xì)胞吸入至提前配置好的完全培養(yǎng)基3ml（10%胎牛血清、1%青鏈霉素雙抗溶液、89%RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻配置）,吹打均勻后放于25T培養(yǎng)瓶,最后放置37℃,5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵化,24小時(shí)換液,顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),細(xì)胞貼壁均勻生長(zhǎng)至70%-80%可進(jìn)行傳代,傳至第5代時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)具體操作。將懸浮的MIN-6細(xì)胞均勻分布于6孔板中,分別標(biāo)記A、B、C、D組,分別為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、高糖組、高糖+Ang-（1-7）組、高糖+Ang-（1-7）+Mas受體阻斷劑A779組,共同培養(yǎng)24小時(shí),重復(fù)3次上述操作。用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)各組MIN-6成熟β細(xì)胞表面標(biāo)志物PDX-1蛋白以及去分化后祖細(xì)胞表面標(biāo)志物Oct4、Nanog蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.細(xì)胞形態(tài):顯微鏡下觀察,正常對(duì)照組中的MIN-6細(xì)胞,呈瓦片狀,貼壁均勻生長(zhǎng);高糖組可見(jiàn)懸浮細(xì)胞,貼壁細(xì)胞分布不均勻,且形態(tài)不一... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑
    1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
    1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制方法
2 研究方法
    2.1 MIN-6 小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)
        2.1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.1.2 細(xì)胞傳代
        2.1.3 細(xì)胞凍存
    2.2 實(shí)驗(yàn)分組
    2.3 細(xì)胞免疫熒光
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 顯微鏡下觀察各組MIN-6 細(xì)胞生長(zhǎng)狀況
    3.2 細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)各組MIN-6 成熟細(xì)胞表面標(biāo)志物PDX-1 以及去分化后祖細(xì)胞表面標(biāo)志物Oct4、Nanog3 蛋白表達(dá)
    3.3 小鼠 MIN-6 內(nèi)分泌祖細(xì)胞表型標(biāo)志物 Oct4、Nango 免疫熒光結(jié)
    3.4 MIN-6 細(xì)胞表型標(biāo)志物 PDX-1、Oct4、Nango 相對(duì)表達(dá)水平
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2型糖尿病的胰島β細(xì)胞衰竭新機(jī)制——胰島β細(xì)胞去分化[J]. 譚明紅,魏平.  中國(guó)糖尿病雜志. 2017(01)
[2]血管緊張素1-7對(duì)2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的影響及機(jī)制[J]. 何軍華,劉航,王麗,吳慧璐,丹妮,郭紅,李興.  中國(guó)藥物與臨床. 2017(01)
[3]高糖通過(guò)下調(diào)FoxO1磷酸化誘導(dǎo)β細(xì)胞去分化[J]. 劉嬋,鄭曉雅,夏佳佳,任偉,李林蔓,劉蘭.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(01)



本文編號(hào)：3189368