目的:查閱參考獐牙菜苦苷與腦缺血再灌注損傷的相關(guān)文獻(xiàn),建立人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y缺氧缺糖/復(fù)氧（OGD/R）損傷模型,研究獐牙菜苦苷對(duì)OGD/R損傷的SH-SY5Y細(xì)胞的潛在神經(jīng)保護(hù)作用及作用機(jī)制。另建立獐牙菜苦苷高效液相色譜分析方法并對(duì)其進(jìn)行方法學(xué)考察,研究其溶解性和穩(wěn)定性的影響因素,為深入開(kāi)發(fā)利用獐牙菜苦苷提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和藥理基礎(chǔ)。方法:1.構(gòu)建人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y的OGD/R模型并隨機(jī)分為:正常組（Control）、OGD/R損傷模型組（Vehicle）、OGD/R損傷+STM組（120、60、30μM）共計(jì)5組;2.用CCK-8法檢測(cè)不同濃度（30μM,60μM和120μM）的STM作用于SH-SY5Y細(xì)胞24小時(shí)后的細(xì)胞毒性;利用CCK-8法檢測(cè)各組SH-SY5Y細(xì)胞的細(xì)胞活力;3.用Annexin V/PI法測(cè)定各組凋亡細(xì)胞的比例;4.采用JC-1探針檢測(cè)各組細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位（MMP）的變化;5.采用DCFH-DA染色法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）生成水平;6.觀(guān)察獐牙菜苦苷對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞OGD/R損傷的影響,采用Western blot方法對(duì)細(xì)... 

【文章來(lái)源】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一部分 細(xì)胞培養(yǎng)與OGD/R模型的建立
    1.材料
        1.1 細(xì)胞株
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2.方法
        2.1 SH-SY5Y細(xì)胞株的培養(yǎng)
        2.2 OGD/R模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組
    3.結(jié)果
    4.結(jié)論
    5.討論
第二部分 獐牙菜苦苷對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞OGD/R損傷的保護(hù)作用
    1.材料
        1.1 試劑
        1.2 儀器
    2.方法
        2.1 CCK-8 法測(cè)定細(xì)胞存活率
        2.2 Annexin V/PI法測(cè)定細(xì)胞凋亡情況
        2.3 JC-1 法測(cè)定細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位的變化
        2.4 DCFH-DA探針測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ROS水平
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    4.結(jié)果
        4.1 STM對(duì) SH-SY5Y細(xì)胞存活率的影響
        4.2 STM對(duì) OGD/R誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響
        4.3 STM對(duì) SH-SY5Y細(xì)胞OGD/R損傷線(xiàn)粒體膜電位的影響
        4.4 STM對(duì) SH-SY5Y細(xì)胞OGD/R損傷ROS的影響
    5.結(jié)論
    6.討論
第三部分 獐牙菜苦苷基于TLR4/PARP1/NF-κB信號(hào)途徑對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞OGD/R損傷的保護(hù)機(jī)制研究
    1.材料
        1.1 試劑
        1.2 儀器
    2.方法
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    4.結(jié)果
    5.結(jié)論
    6.討論
第四部分 獐牙菜苦苷在Hank’s平衡鹽溶液中的溶解性與穩(wěn)定性研究
    1.材料
        1.1 藥品
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2.方法
        2.1 HPLC分析方法建立
        2.2 助溶劑和增溶劑的選擇
        2.3 溶解性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
    3.結(jié)果
        3.1 pH值對(duì)STM在 HBSS中溶解性和穩(wěn)定性的影響
        3.2 溫度對(duì)STM在 HBSS中溶解性和穩(wěn)定性的影響
        3.3 光照對(duì)STM在 HBSS溶液中的穩(wěn)定性的影響
    4.結(jié)論
    5.討論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
    綜述
        參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺血性腦卒中的病理機(jī)制研究進(jìn)展及中醫(yī)藥防治[J]. 張艾嘉,王爽,王萍,王燁燃.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2020(05)
[2]腦缺血再灌注神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 王冬睿,范蕾.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2019(10)
[3]電針通過(guò)調(diào)節(jié)TLR4/MyD88/NF-κb信號(hào)通路改善缺血性腦卒中損傷研究現(xiàn)狀[J]. 莊麗華,詹松華,楊爍慧,陸方,孔營(yíng)楠,龔志剛.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2019(09)
[4]坎地沙坦對(duì)腦缺血再灌注大鼠抗氧化的作用[J]. 陳亞雪,宋嵐,尹加珍,李國(guó)春,張紅,黃新武.  廣東醫(yī)學(xué). 2019(S1)
[5]獐牙菜苦苷的抗炎活性及其對(duì)NF-κB通路相關(guān)因子p65和IKK-α表達(dá)的影響[J]. 王君燕,童曄玲,趙文慧.  中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(12)
[6]缺血性腦卒中損傷機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 吳詠梅,陶茹瑩,孟祥寶,孫曉波,孫桂波,張輝.  吉林中醫(yī)藥. 2018(03)
[7]Toll樣受體4對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的作用[J]. 邢海會(huì),丁曉慧,解輝,王忠華,謝菊華,陳豐洋,羅崟洲,周勝男.  中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(03)
[8]微小RNA與腦缺血再灌注損傷機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 李強(qiáng),王洪新.  中國(guó)城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生. 2018(02)
[9]腦缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 彭智遠(yuǎn),劉旺華,曹雯.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2017(08)
[10]NF-κB通路與川芎提取物抗腦缺血作用相關(guān)性研究[J]. 俞茹云,過(guò)憶,林莉莉.  南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)



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