發(fā)布時間：2019-07-11 08:27

【摘要】：目的:基于mRNA和miRNA芯片,構(gòu)建基因水平中樞-外周炎癥調(diào)控網(wǎng)絡(luò),闡釋益氣解毒方抗缺血性腦卒中的作用機制。方法:1.基于mRNA基因芯片技術(shù),設(shè)定差異分析閾值,從時間和空間兩個角度,對所采集到的mRNA芯片數(shù)據(jù)依次進行差異分析、共有分析、富集分析,根據(jù)分析結(jié)果,依次構(gòu)建mRNA水平的不同時間點共有基因背景網(wǎng)絡(luò)圖、炎癥相關(guān)基因背景網(wǎng)絡(luò)圖及基于時間變化的缺血性腦卒中進程中樞和外周臟器關(guān)聯(lián)調(diào)控圖。2.基于mRNA水平分析結(jié)果,篩選出炎癥背景圖中關(guān)鍵的節(jié)點基因,采取PCR技術(shù),對關(guān)鍵節(jié)點基因的表達(dá)情況進行驗證。3.基于益氣解毒方給藥組和模型組的mRNA芯片表達(dá)結(jié)果,設(shè)定閾值后依次進行差異分析、共有分析和富集分析,并將具有表達(dá)差異映射到之前步驟中所構(gòu)建的共有基因網(wǎng)絡(luò)和炎癥基因網(wǎng)絡(luò)中,構(gòu)建益氣解毒方給藥組基于mRNA水平對缺血性腦卒中的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)圖。4.基于miRNA芯片數(shù)據(jù)分析結(jié)果,預(yù)測具有表達(dá)差異的miRNA所調(diào)控的目標(biāo)mRNA,并結(jié)合mRNA水平的分析結(jié)果及益氣解毒方的映射結(jié)果,構(gòu)建基于miRNA水平上的益氣解毒方的基因調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。實驗結(jié)果:1.通過mRNA芯片數(shù)據(jù)的分析和PCR結(jié)果的驗證,證實中樞-外周炎癥網(wǎng)絡(luò)在缺血性腦卒中的病理過程中是真實存在的。通過對mRNA基因數(shù)據(jù)的分析,構(gòu)建出基于時間(6小時和8小時兩個時間點)以及基于空間(腦、脾、血三個臟器)的mRNA水平的炎癥網(wǎng)絡(luò)圖,并通過PCR技術(shù)驗證了所構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)的可靠性。2.通過對益氣解毒方給藥組的數(shù)據(jù)進行富集分析,發(fā)現(xiàn)映射到所構(gòu)建的mRNA炎癥網(wǎng)絡(luò)中,發(fā)現(xiàn) NF-kappa B signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、Chemokine signaling pathway、Jak-STAT signaling pathway等四條炎癥通路為益氣解毒方主要的調(diào)節(jié)通路。3.通過miRNA的分析和其目標(biāo)基因的預(yù)測,并聯(lián)系mRNA水平的分析結(jié)果,發(fā)現(xiàn)miRNA水平上也存在一個與炎癥有關(guān)的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。同時,結(jié)合益氣解毒方對miRNA水平的映射結(jié)果,發(fā)現(xiàn)在miRNA水平上,益氣解毒方可以通過影響miRNA的表達(dá),來影響關(guān)鍵節(jié)點基因的表達(dá)情況,來調(diào)節(jié)中樞和外周的炎癥水平,影響整個炎癥網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控,從而達(dá)到對腦卒中的治療。結(jié)論:本實驗研究表明,在以腦卒中為代表的中樞炎癥過程中,中樞免疫器官與外周免疫器官存在著關(guān)聯(lián)作用,益氣解毒方可能基于mRNA和miRNA網(wǎng)絡(luò)對腦卒中過程中的炎癥狀態(tài)進行調(diào)控,對腦卒中進行治療。
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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1 師寧;高曉嶸;高亞軍;劉峰;薛藝東;解建國;周璇;屈文英;;中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者的病原菌分布特征及其外周血細(xì)胞因子對預(yù)后的影響[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2016年17期

2 孫奎亮;楊凡喜;王軍;王峰;;腦卒中的炎癥免疫機制研究進展[J];中國老年學(xué)雜志;2015年18期

3 劉海婷;母得志;;誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和缺氧缺血腦損傷[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2014年09期

4 文麗梅;李韶菁;吳傳鴻;高健;王軍玲;段飛鵬;黃志英;李德鳳;馬超英;;益氣解毒方對局灶性腦缺血大鼠線粒體損傷的保護作用[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2014年03期

5 溫宏峰;王瑞彤;李繼來;;缺血性腦卒中患者阿司匹林或氯吡格雷及其聯(lián)合應(yīng)用抗血小板治療的研究[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2013年03期

6 朱麗;高健;吳傳鴻;劉安;蘇培瑜;李德鳳;張寧;楊陽;李韶菁;;益氣解毒方對大鼠局灶性腦缺血氧化應(yīng)激的影響[J];中國實驗方劑學(xué)雜志;2013年06期

7 楊琴;承歐梅;彭國光;董為偉;謝鵬;;降纖酶治療腦梗死65例療效觀察[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2008年S1期

8 闞學(xué)平;;降纖酶與分子肝素聯(lián)合治療進展性腦卒中的臨床分析[J];人人健康(醫(yī)學(xué)導(dǎo)刊);2008年04期

9 張仲林;鐘玲;臧志和;;抗感染中藥作用機理研究方法概況[J];四川生理科學(xué)雜志;2008年01期

10 張改芹;;低分子肝素鈣聯(lián)合降纖酶治療短暫性腦缺血發(fā)作38例療效觀察[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2007年04期

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1 姜永軍;經(jīng)鼻給予腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子治療大鼠缺血性腦卒中[D];南京大學(xué);2012年

2 關(guān)健;靶向室管膜區(qū)膠原的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子治療大鼠腦缺血卒中的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

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本文編號：2513020