【摘要】：由于近年來(lái)化學(xué)藥物的大量使用、環(huán)境及空氣污染的日益嚴(yán)重,肺間質(zhì)性纖維化的發(fā)病率日趨上升,自確診之日起患者的存活率僅為2-5年。本論文對(duì)肺纖維化從肺痿論、肺痹論、肺絡(luò)論進(jìn)行了相關(guān)論述,旨在較為全面的了解古人對(duì)肺病的認(rèn)知及治療經(jīng)驗(yàn),以求指導(dǎo)中醫(yī)藥更好的治療肺纖維化疾病。另從實(shí)驗(yàn)方面,對(duì)黃芪當(dāng)歸各有效成分優(yōu)化配方對(duì)肺細(xì)胞新生的影響進(jìn)行了相關(guān)研究,通過(guò)不同的給藥方案,初步找到治療肺纖維化的最佳優(yōu)化配方治療方案,并初步探索其理論機(jī)制,為IPF的臨床防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。理論研究理論探討一:首先從從進(jìn)化論和三胚層角度來(lái)看,肺的出現(xiàn)是在高等脊椎動(dòng)物時(shí)期,主要由內(nèi)胚層和外胚層所主;經(jīng)絡(luò)是按照脾肺胃膽等順序逐條進(jìn)化,由中胚層演化而來(lái),有力印證了肺合皮毛、起于中焦還循胃口的科學(xué)性。從文獻(xiàn)學(xué)角度來(lái)講,肺絡(luò)早在《內(nèi)經(jīng)》即有出現(xiàn),且散在于《臨證指南醫(yī)案》、《醫(yī)門法律》等著作中,其功能貫通營(yíng)衛(wèi)、溢奇邪,滲灌氣血,在肺的功能中起著舉足輕重的作用。肺心經(jīng)絡(luò)相連、氣血相依,若心火亢勝灼肺可導(dǎo)致肺痿,故提出肺纖維化病機(jī)為心火灼肺、陰虛絡(luò)瘀,為中醫(yī)防治肺纖維化提供新的理論思路。理論探討二:中醫(yī)沒有與肺纖維化相對(duì)應(yīng)的病名,歷代醫(yī)家多以肺痿、肺痹論之,自葉天士提出肺絡(luò)之后,近代醫(yī)家關(guān)于肺纖維化隸屬肺絡(luò)的理論研究日趨完善,故本論文從《黃帝內(nèi)經(jīng)》、《傷寒雜病論》、《景岳全書》等古代書籍以及近代文獻(xiàn)出發(fā),綜合闡述肺纖維化與肺痿、肺痹、肺絡(luò)在病名、病因病機(jī)及治療方藥等相關(guān)方面的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)研究動(dòng)物模型與給藥方法:SPF級(jí)雄性ICR小鼠105只,體重18-20g,來(lái)源于北京斯貝福實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司[發(fā)貨單號(hào)11401500007203,許可證號(hào)SCXK(京)2011-0004]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)在避光、安靜且溫暖的清潔級(jí)動(dòng)物房,喂養(yǎng)3天以使其適應(yīng)壞境,實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由進(jìn)食與飲水。隨機(jī)分為7組,即正常組、模型組以及5個(gè)黃芪當(dāng)歸組分優(yōu)化各方治療組(即優(yōu)化方1組、優(yōu)化方2組、優(yōu)化方3組、優(yōu)化方4組、優(yōu)化方5組),每組編號(hào)1-15。觀察記錄小鼠生存狀態(tài)及死亡情況,21天后取肺組織及血清備用。進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)一:黃芪當(dāng)歸各有效組分優(yōu)化配方對(duì)肺纖維化小鼠生存狀態(tài)及形態(tài)學(xué)的影響。觀察小鼠體重變化,描繪小鼠死亡率曲線,用HE染色和苯胺藍(lán)染色法觀察IPF小鼠肺組織形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果顯示,黃芪當(dāng)歸各有效成分優(yōu)化配方治療對(duì)提高小鼠生存狀態(tài)和生存率有一定幫助,均能降低小鼠死亡率,且以優(yōu)化1方和優(yōu)化5方效果較明顯。病理形態(tài)學(xué)顯示,與模型組比較,中藥治療組均有不同程度的改善,且以優(yōu)化1方組肺泡組織增生改善明顯,肺泡結(jié)構(gòu)已基本恢復(fù),炎性滲出明顯減少,說(shuō)明治療效果顯著;優(yōu)化方3、5組肺纖維化病灶也有所改善。實(shí)驗(yàn)二:黃芪當(dāng)歸各有效組分優(yōu)化配方對(duì)肺纖維化小鼠羥脯氨酸及膠原蛋白的影響。采用堿水解法測(cè)定IPF小鼠肺組織勻漿液中羥脯氨酸含量;采用RT-PCR法測(cè)定肺組織中TGF-β、VEGF、Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型、Ⅴ型膠原基因表達(dá)水平。HYP含量結(jié)果顯示,模型組優(yōu)方2組優(yōu)方5組優(yōu)方4組優(yōu)方1組優(yōu)方3組正常組,從統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果來(lái)看優(yōu)方3組和優(yōu)方1組更有顯著性意義。從各膠原基因表達(dá)水平來(lái)看,與正常組相比,模型組TGF-β、VEGF基因表達(dá)水平均有所升高,Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型、Ⅴ型膠原基因表達(dá)水平都有增高,可能是導(dǎo)致肺中膠原含量最終升高的原因之一。中藥治療優(yōu)化各組都能不同程度的下調(diào)肺中TGF-β、VEGF、Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型、Ⅴ型膠原基因表達(dá)水平,且以優(yōu)化方1組綜合效果較好。實(shí)驗(yàn)三:黃芪當(dāng)歸各有效組分優(yōu)化配方對(duì)IPF小鼠支氣管肺泡干細(xì)胞的影響。在實(shí)驗(yàn)一、二的基礎(chǔ)上,選取最優(yōu)組即優(yōu)化方1組,與正常組、模型組一起進(jìn)行肺上皮制備,BASCS染色,以及流式細(xì)胞儀對(duì)肺組織中Sca-1、EPCAM進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,與正常組相比,模型組基因含量Q2有所下降,與模型組相比,優(yōu)化方1組基因含量Q2明顯升高,可能與黃芪當(dāng)歸有效組分配方可以促進(jìn)肺纖維化小鼠支氣管肺泡干細(xì)胞數(shù)量有關(guān)。結(jié)論:優(yōu)化方1組為最佳治療組,即黃芪水提物與當(dāng)歸醇提物比重較大,且二者比例接近1:1時(shí),對(duì)肺纖維化的防治效果最佳,其他比例優(yōu)化組都不是最佳的方案選擇。并與降低肺中羥脯氨酸的含量,抑制肺中TGF-β基因、VEGF、Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型、Ⅴ型膠原基因正常表達(dá),促進(jìn)肺中細(xì)胞Sca-1、EPCAM,增加支氣管肺泡干細(xì)胞數(shù)量有關(guān),但其具體機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 傅玉瓊;周偉;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β_1及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因敲除對(duì)塵肺小鼠肺纖維化的影響[J];解放軍醫(yī)藥雜志;2017年01期

2 屈艷;張崇;賈巖龍;宋宇;牛秉軒;詹合琴;;大黃酸通過(guò)抑制miR-21而干預(yù)TGF-β1/Smad通路并減輕博萊霉素所致大鼠肺纖維化[J];中國(guó)病理生理雜志;2017年01期

3 邱新萍;馬萬(wàn)千;孫頌歌;張艷珍;;從“肺腎相關(guān)”理論探討腎虛與肺痹發(fā)生的相關(guān)性研究[J];中醫(yī)臨床研究;2016年36期

4 劉e，

本文編號(hào)：2459395