【摘要】：[目的]本研究采用手術(shù)手段建立Balb/c小鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型,探討中藥扶正祛邪藥對——黃芪-莪術(shù)水提物與奧沙利鉑(L-OHP)聯(lián)合應(yīng)用抑制鼠結(jié)腸癌CT26 wild-type(CT26.WT)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,并調(diào)控CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20在mRNA及蛋白水平的表達(dá)。[方法]1.建立Balb/c小鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型,觀察各組腫瘤在小鼠體內(nèi)的生長情況,初步觀察小鼠肝臟轉(zhuǎn)移的情況。2.通過黃芪-莪術(shù)分別以高、中、低劑量聯(lián)合L-OHP對小鼠治療,觀察用藥后小鼠體重,瘤體大小,肝臟轉(zhuǎn)移情況的變化。3.采用Real time-PCR方法分別檢測原位移植腫瘤灶與肝轉(zhuǎn)移灶CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20mRNA 的表達(dá)情況。4.采用Western Blotting方法分別檢測原位移植腫瘤灶與肝轉(zhuǎn)移灶CXCR3、CCR6、CXCL9、CCL20的蛋白表達(dá)情況。[結(jié)果]1.成功建立Balb/c小鼠結(jié)腸癌原位移植瘤模型,成模率達(dá)到100%。2.L-OHP單獨(dú)應(yīng)用和聯(lián)合中藥應(yīng)用均能抑制原位移植瘤體的增大,陽性藥抑制原位移植瘤生長的效果最好(P0.01)。聯(lián)合用藥能降低肝轉(zhuǎn)移灶的發(fā)生(P0.05)。3.陽性藥組及聯(lián)合用藥低劑量組CXCR3及CCR6mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)(P0.01)。用藥組CXCL9、CCL20mRNA表達(dá)未見統(tǒng)計學(xué)意義。4.與空白對照組相比,聯(lián)合用藥能不同程度下調(diào)CXCR3、CCR6蛋白表達(dá)(P0.05,P0.01)。在肝組織內(nèi),聯(lián)合用藥可以下調(diào)CXCL9、CCL20蛋白表達(dá)(P0.01)。[結(jié)論]L-OHP聯(lián)合黃芪-莪術(shù)作用于荷瘤小鼠能夠顯著地抑制原位移植結(jié)腸癌的肝轉(zhuǎn)移,降低趨化因子CXCR3、CCR6蛋白與mRNA的表達(dá),低劑量聯(lián)合效果最顯著,具有濃度依賴性。中藥聯(lián)合化療藥抗腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制可能與下調(diào)CXCR3、CCR6蛋白與mRNA相關(guān),對CXCL9、CCL20蛋白與mRNA的影響尚待進(jìn)一步實驗證明。CXCR3、CCR6可成為判斷結(jié)腸癌預(yù)后的潛在靶點(diǎn)。
[Abstract]:[objective] to establish an orthotopic transplanted tumor model of colon cancer in Balb/c mice by surgical method. Objective: to investigate the effect of traditional Chinese medicine (TCM) on inhibiting the metastasis of rat colon cancer CT26 wild-type (CT26.WT) cells and regulating the expression of CXCR3,CCR6,CXCL9,CCL20 in mRNA and protein levels by combined application of Astragalus curcumae aqueous extract and oxaliplatin (L-OHP). [methods] 1. The orthotopic transplanted tumor model of colon cancer in Balb/c mice was established to observe the growth of tumor in mice and the liver metastasis in mice. 2. The mice were treated with high, middle and low doses of Astragalus curcumae combined with L-OHP respectively. The changes of body weight, tumor size and liver metastasis were observed after administration of Astragalus curcumae. 3. Real time-PCR method was used to detect the expression of CXCR3,CCR6,CXCL9,CCL20mRNA in orthotopic transplantation tumor and liver metastasis respectively. 4. Western Blotting method was used to detect the expression of CXCR3,CCR6,CXCL9,CCL20 protein in tumor focus and liver metastases of orthotopic transplantation. [result] 1. The orthotopic transplanted tumor model of colon cancer in Balb/c mice was successfully established. The rate of model formation reached that of 100%.2.L-OHP alone and combined with traditional Chinese medicine (TCM), both of which could inhibit the enlargement of orthotopic transplantation tumor. The positive drug had the best effect on tumor growth in orthotopic transplantation (P0.01). Combined use of drugs can reduce the incidence of liver metastasis (P0.05). The expression of CXCR3 and CCR6mRNA in positive group and low dose group was significantly decreased (P0.01). The expression of CXCL9,CCL20mRNA in the medication group was not statistically significant. 4. 4. Compared with the control group, the expression of CXCR3,CCR6 protein was down-regulated (P0.05, P0.01). In liver tissue, the expression of CXCL9,CCL20 protein could be down-regulated by combined medication (P0.01). [conclusion] L-OHP combined with astragalus curcuma can significantly inhibit liver metastasis and decrease the expression of chemokine CXCR3,CCR6 protein and mRNA in tumor-bearing mice. The mechanism of anti-tumor metastasis of traditional Chinese medicine combined with chemotherapy may be related to down-regulation of CXCR3,CCR6 protein and mRNA, and the effect on CXCL9,CCL20 protein and mRNA remains to be proved by further experiments. CXCR3,CCR6 may be a potential target for judging the prognosis of colon cancer.
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R73-36

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張靈;田勇;李揚(yáng);賈慧婕;汲坤;李馨;徐德啟;趙雪儉;;減毒沙門氏菌運(yùn)載Stat3-shRNA質(zhì)粒靶向治療小鼠肝原位移植瘤研究[J];中國病理生理雜志;2010年10期

2 羅明華;人癌裸小鼠原位移植瘤模型的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1997年04期

3 徐賢綢;劉岸;王兆洪;林勝璋;;大黃素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤的實驗研究[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2011年04期

4 賈小飛;閆博;張熠杰;蔣帥;趙晶;楊安鋼;;肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活體熒光成像檢測[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年04期

5 王磊;陳衛(wèi)昌;謝學(xué)順;何揚(yáng);白霞;;塞來昔布對實驗性結(jié)腸癌原位移植瘤生長及血管形成的影響[J];中華腫瘤防治雜志;2006年17期

6 徐曉;陳衛(wèi)昌;王磊;謝學(xué)順;何楊;;塞來昔布對實驗性結(jié)腸癌原位移植瘤生長及環(huán)氧化酶-2表達(dá)的影響[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

7 鄧鑫;梁健;劉東華;周薇;覃黎葵;李龍華;;胃寧顆粒對人胃癌裸鼠原位移植瘤生長及轉(zhuǎn)移的抑制作用[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年08期

8 閔亮;祁宏;;不同活血方劑對高轉(zhuǎn)移人肝癌裸鼠原位移植瘤生長和轉(zhuǎn)移及腫瘤血管生成的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2014年03期

9 張翔;張偉杰;李開艷;陳必成;郭暉;湯高楓;;雷帕霉素對人肝癌裸鼠原位移植瘤生長的抑制作用[J];中華實驗外科雜志;2006年04期

10 韋長元,黎丹戎,曹驥,侯華新,秦菁,莫軍楊,梁安民;板藍(lán)根組酸誘導(dǎo)耐藥人肝癌原位移植瘤的細(xì)胞凋亡研究[J];廣西醫(yī)學(xué);2004年05期

相關(guān)會議論文 前4條

1 沈克平;潘傳芳;梁未末;顧賢;胡兵;;胃腸安方對人胃癌裸鼠原位移植瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響及對其血管生成的響[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議暨消化疾病診治進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

2 蔡利軍;呂賓;倪桂寶;胡萍萍;鄭華君;張璐;;溫郁金對人胃癌裸鼠原位移植瘤生長轉(zhuǎn)移的抑制作用及對COX-2、VEGF表達(dá)的影響[A];2005年浙江省消化系疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

3 張曉龍;楊銘;范冬梅;李真真;鮑世琦;顏次慧;熊冬生;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)載甲胎蛋白啟動子驅(qū)動的IST-sTRAIL與5-FU聯(lián)合應(yīng)用對HepG2肝癌原位移植瘤的治療作用[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第三十四屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2014年

4 王曉敏;閆明霞;梁琳慧;李金枝;朱淼鑫;孔韓衛(wèi);趙方瑜;吳一遷;姚明;;GFP和Luc雙標(biāo)技術(shù)在小鼠腫瘤模型建立中的應(yīng)用[A];實驗動物與藥理學(xué)、毒理學(xué)研究學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 方凡夫;有氧運(yùn)動對肝原位移植瘤小鼠術(shù)后免疫功能和代謝組學(xué)影響的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 史學(xué)蓮;Ktrans值評估裸鼠胃癌原位移植瘤抗血管生成藥物療效的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

3 陳代倫;siRNA干擾FPR后U87細(xì)胞裸鼠腦原位移植瘤生物學(xué)行為及血管生成特點(diǎn)改變及機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 郝英杰;siRNA-ZNF139胃癌細(xì)胞對化療藥物敏感性及ZNF139相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

5 陳紅錦;黃芩苷干預(yù)錯配修復(fù)基因功能缺失的裸鼠結(jié)腸原位移植瘤的作用及分子機(jī)制研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張洲姬;蟾毒靈對裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長與轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 劉靜;不良心理應(yīng)激對人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤差異蛋白表達(dá)的影響[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

3 劉U，

本文編號：2381027