【摘要】：角質(zhì)形成細胞增殖和遷移受損是糖尿病皮膚傷口難愈合甚至不愈合的主要原因之一。在正常皮膚傷口中,胰島再生源蛋白REG3A/RegⅢγ(Regenerating islet-derived protein 3A)通過促進角質(zhì)形成細胞的增殖來促進傷口愈合。而在糖尿病皮膚傷口中REG3A的表達顯著降低,從而延緩了糖尿病皮膚傷口愈合。miRNAs(microRNAs)作為一類短的非編碼RNA,通過與靶標的mRNA3'UTR(3'untranslatedregions)結合沉默基因的機制已經(jīng)研究得很清楚并應用于多種疾病的治療中。那么,REG3A在糖尿病皮膚傷口中低表達是否與miRNAs相關,目前尚不清楚。本論文首先通過TargetScan、miRanda、DIANA-microT三個數(shù)據(jù)庫分析REG3AmRNA3,UTR可能結合的miRNAs,推測并證實了 miR137能夠分別與人 REG3A mRNA 3'UTR 和小鼠 RegⅢγ mRNA 3'UTR 結合,從而抑制 REG3A/RegⅢγγ的表達。接著,通過細胞劃痕實驗證明miR137參與調(diào)節(jié)IL-33誘導的REG3A的表達,從而抑制角質(zhì)形成細胞的增殖。另外,在糖尿病皮膚傷口中miR137的表達顯著增加,高糖能夠呈時間依賴性地誘導角質(zhì)形成細胞表達miR137,推測在糖尿病皮膚傷口中高血糖通過誘導miR137的表達來抑制REG3A的表達。為了尋找調(diào)節(jié)miR-137表達的轉(zhuǎn)錄因子,我們首先利用PROMO、Jaspar數(shù)據(jù)庫分析得出p53可能是調(diào)節(jié)miR-137的轉(zhuǎn)錄因子,進一步通過熒素酶(luciferase)報告基因?qū)嶒炞C明轉(zhuǎn)錄因子p53的確可以調(diào)節(jié)miR137啟動子的轉(zhuǎn)錄活性來調(diào)節(jié)miR137的表達。另外,p53的激動劑Tevilion-1能回復IL-33抑制的miR137或促進高糖誘導的miR137的表達,從而抑制IL-33誘導的RGE3A的表達。除此之外,IL-33對miR137的調(diào)節(jié)部分依賴于DNA甲基化的作用,因為甲基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑也可回復IL-33對miR137的抑制作用。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)了 IL-33通過抑制miR137來誘導REG3A的表達,而高糖通過誘導miR-137抑制了 REG3A的表達。在糖尿病皮膚傷口中高血糖和IL-33的低表達都會引起miR137的表達增加,從而導致REG3A低表達來抑制角質(zhì)形成細胞的增殖。另外,p53作為miR137的轉(zhuǎn)錄因子參與了 IL-33和高糖調(diào)節(jié)的miR137的表達�？傊�,本研究揭示了 IL-33和高糖調(diào)節(jié)miR137表達的機制以及miR137抑制REG3A來抑制角質(zhì)形成細胞增殖的功能,為糖尿病傷口愈合的治療提供了潛在的新靶點。
[Abstract]:The damage of keratinocyte proliferation and migration is one of the main causes of difficult healing and even nonunion of diabetic skin wounds. In normal skin wounds, islet regeneration protein REG3A/Reg 鈪，

本文編號：2164137