葛根素對(duì)臂叢根性撕脫后脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF、GAP-43mRNA及蛋白表達(dá)的影響
本文選題:葛根素 + 臂叢損傷; 參考:《湖北民族學(xué)院》2017年碩士論文
【摘要】:目的:臂叢根性撕脫傷常發(fā)生于交通事故、產(chǎn)癱,可導(dǎo)致脊髓神經(jīng)元的大量死亡,進(jìn)而造成患者上肢的運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)障礙。針對(duì)這種發(fā)病機(jī)制,本研究從保護(hù)神經(jīng)元和促進(jìn)神經(jīng)元再生入手,探討葛根素對(duì)臂叢根性撕脫傷導(dǎo)致的神經(jīng)元死亡是否具有保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。方法:成年雄性SD大鼠252只,體重250±20 g,完全隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、葛根素低、中、高治療組。模型組和治療組行右側(cè)C5-C7脊神經(jīng)前后根撕脫術(shù),術(shù)后待動(dòng)物蘇醒即每日給予腹腔注射給藥,其中模型組給予生理鹽水,葛根素治療組的劑量分別為50 mg/kg/d、100 mg/kg/d、200 mg/kg/d。并于術(shù)后1w、2w、4w、6w、8w這5個(gè)時(shí)間點(diǎn)取材,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)12只。通過(guò)尼氏染色法觀(guān)察脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的形態(tài)及數(shù)量;免疫組織化學(xué)染色法及Western Blot法檢測(cè)NGF和GAP-43蛋白的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)NGF和GAP-43mRNA的表達(dá)。結(jié)果:尼氏染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與正常對(duì)照組比較,模型組各時(shí)間點(diǎn)脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元形態(tài)較差、細(xì)胞間隙增大、排列紊亂、且運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元數(shù)量及神經(jīng)元樹(shù)突明顯減少,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。與模型組比較,葛根素各治療組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元形態(tài)及排列均有所改善,運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元樹(shù)突亦比模型組有所增加,神經(jīng)元的存活率明顯升高,組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果示:與正常對(duì)照組比較,模型組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF蛋白表達(dá)量在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯降低,結(jié)果均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.001)。與模型組比較,葛根素各治療組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF蛋白表達(dá)量在第2周明顯升高,隨后一直維持高表達(dá),直至第8周NGF蛋白繼續(xù)維持高水平,趨勢(shì)更加明顯,差別亦更顯著。與正常對(duì)照組比較,模型組自術(shù)后1周開(kāi)始出現(xiàn)GAP-43陽(yáng)性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元表達(dá),第2周時(shí)達(dá)到高峰,第4周時(shí)降至較低水平維持至第8周末。與模型組比較,葛根素各治療組GAP-43蛋白在術(shù)后第1周時(shí)已達(dá)較高水平,第2周時(shí)達(dá)最高峰,隨后開(kāi)始下降,第8周時(shí)降至較低水平。Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果示:與正常對(duì)照組比較,模型組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF蛋白表達(dá)量在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯降低,結(jié)果均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.001)。與模型組比較,葛根素各治療組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF蛋白表達(dá)量在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于模型組。低劑量組只在第1周時(shí)與模型組的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);中劑量組在第4-8周與模型組比較,差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);高劑量組只在第8周時(shí)與模型組比較差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)合課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果,葛根素各治療組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元GAP-43蛋白表達(dá)的WB實(shí)驗(yàn)結(jié)果與免疫組化結(jié)果趨勢(shì)相符合,此處不予贅述。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)結(jié)果示:與正常對(duì)照組比較,模型組脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF mRNA第2周表達(dá)稍高于正常組,第4周開(kāi)始降低,第6周時(shí)降至最低,第8周時(shí)表達(dá)量有所回升;與模型組比較,葛根素低、中治療組在第6周時(shí)表達(dá)量開(kāi)始升高,差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),第8周時(shí)表達(dá)量更高,差別亦均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。與正常對(duì)照組比較,模型組GAP-43 mRNA表達(dá)在術(shù)后第1周時(shí)已開(kāi)始明顯升高,第2周達(dá)高峰,之后稍下降,第8周時(shí)降至較低水平,差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。與模型組相比,葛根素各治療組GAP-43 mRNA表達(dá)自第1周時(shí)便急劇升高,第2周時(shí)達(dá)到最高峰,以中劑量組差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。隨后開(kāi)始緩慢下降,至8周時(shí)表達(dá)量仍高于模型組。結(jié)論:葛根素能保護(hù)臂叢根性撕脫后脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,其機(jī)制可能與其能促進(jìn)脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元NGF、GAP-43 mRNA及蛋白的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the expression of NGF and GAP - 43 mRNA in spinal cord anterior horn motor neurons in rats . The results showed that the expression of NGF and GAP - 43 mRNA was significantly lower in the model group than in the normal control group , and the expression of NGF and GAP - 43 mRNA was significantly decreased in the model group and the treatment group . Compared with the normal control group , the expression level of GAP - 43 mRNA was significantly higher in the model group than in the normal control group ( p < 0.05 ) . Compared with the model group , the expression level of GAP - 43 mRNA in the spinal cord of the model group was significantly higher than that in the normal control group ( p < 0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】:湖北民族學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2083533
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