本文選題：微生物污染 + 單增李斯特氏菌��； 參考：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:了解吉林省出入境食品中微生物的污染狀況及其趨勢,為采取有效措施降低進出口食品中微生物污染的風(fēng)險提供理論依據(jù)。同時進行dd PCR檢測單增李斯特氏菌方法的建立和優(yōu)化。方法:1.2014年、2015年吉林省出入境8類食品中微生物檢測(1)該項研究對2014年、2015年吉林省出入境食品1668份進行微生物檢測。樣品包括肉制品、乳及乳制品、豆制品、糧食及糧食制品、飲料和礦泉水、水樣、飼料及飼料添加劑、即食果蔬品共8類。其中2014年樣品574份,2015年1094份。(2)采集方法按照《食品安全抽樣檢驗管理辦法》。(3)檢測項目包括:細菌總數(shù)、大腸菌群、霉菌及酵母菌、食源性致病菌檢測。檢測方法:依據(jù)《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗》GB/T4789—2003/2010,對采集樣品進行4項微生物檢測。(4)統(tǒng)計方法:檢測數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0進行錄入和統(tǒng)計學(xué)分析。對各項指標(biāo)評價進行統(tǒng)計學(xué)描述,采用X2檢驗和四格表確切概率法進行統(tǒng)計學(xué)推斷,α=0.05。2.微滴數(shù)字PCR(dd PCR)方法檢測單增李斯特氏菌方法建立(1)增菌培養(yǎng)(2)以單增李斯特氏菌的Hly A基因為靶基因建立微滴數(shù)字PCR(dd PCR)方法。(3)對dd PCR反應(yīng)中的探針濃度進行優(yōu)化,驗證所建方法的特異性、敏感度、定量限和檢出限。結(jié)果:1.1668份8類食品進行微生物檢測。主要包括肉制品727份,占43.6%;乳類及乳制品207份,占12.4%;即食果蔬類98份,占5.9%;豆類及豆制品97份,占5.8%;水樣187份,占11.2%;飲料及礦泉水102份,占6.1%;糧食及其制品178份,占10.7%;飼料及添加劑72份,占4.3%。2.2014年樣品中肉制品、飲料及礦泉水、糧食及其制品、飼料及添加劑、水樣均有不同程度的微生物污染,而乳類及乳制品即食果蔬類、豆類及豆制品合格率均為百分之百。2015年樣品中肉制品、糧食及其制品、水樣均有不同程度的微生物污染,而乳類及乳制品、即食果蔬類、豆類及豆制品、飲料及礦泉水、飼料及添加劑合格率均為百分之百。1668份樣品菌落總數(shù)的檢測檢出48份,總合格率為97.12%;其中,水樣合格率最低,為80.75%;豆及豆制品、乳及乳制品、即食果蔬類合格率最高,為100%。3.1596份樣品進行了大腸菌群的檢測,檢出15份,總合格率為99.06%;肉制品的合格率最低,為98.76%;豆及豆制品、乳及乳制品和飼料及飼料制品合格率最高,為100%。各類食品大腸菌群合格率2015年較2014年均有所提高。4.754份樣品進行了霉菌及酵母菌的檢測,檢出5份,總合格率為99.34%;乳及乳制品合格率最低,為98.55%;豆類及豆制品、即食果蔬類合格率最高,為100%。各類食品的霉菌及酵母菌合格率2015年較2014年均有所提高。5.1481份樣品(水樣按檢測標(biāo)準(zhǔn)無該檢測項目)進行了6種食源性致病菌的檢測。其中,單增李斯特氏菌檢出率最高為1.21%,其次為沙門氏菌為1.19%,金黃色葡萄球菌0.55%,阪崎腸桿菌0.48%,未檢出腸出血性大腸桿菌O157∶H7和志賀氏菌。采用Fisher確切概率法比較不同食源性致病菌檢出率,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=20.401,P0.05)。6.1481份樣品食源性致病菌的檢測,檢出28份,總合格率為98.11%;飼料及飼料添加劑的合格率最低,為94.44%;糧食及糧食制品、豆類及豆制品、即食果蔬類、飲料和礦泉水合格率最高,為100%。各類食品食源性致病菌2015年合格率較2014年均有所提高。7.2015年各類食品微生物總體檢測合格率高于2014年,兩年合格率分別為94.97%、92.51%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.133,P=0.042,P0.05),其中,除飼料及添加劑、水樣差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其他各類食品微生物檢測合格率2015年較2014年均有所提高,未見統(tǒng)計學(xué)差異。8.特異性驗證結(jié)果表明,建立的dd PCR方法特異性良好。從本次實驗采用的幾種實驗方法的結(jié)果可以看出,敏感性最高的方法是dd PCR法,能夠達到10-9。結(jié)論:1.1668份樣品菌落總數(shù)檢出48份,總合格率為97.12%;其中,水樣合格率最低,為80.75%;豆及豆制品、乳及乳制品、即食果蔬類合格率最高,為100%。2.1596份樣品大腸菌群檢測總合格率為99.06%;肉制品的合格率最低,為98.76%;豆及豆制品、乳及乳制品和飼料及飼料制品合格率最高,為100%。3.754份霉菌及酵母菌的檢測總合格率為99.34%;乳及乳制品合格率最低,為98.55%;豆類及豆制品、即食果蔬類合格率最高,為100%。4.1481份樣品食源性致病菌的檢測中,單增李斯特氏菌檢出率最高為1.21%。食源性致病菌的檢測總合格率為98.11%;飼料及飼料添加劑的合格率最低,為94.44%;糧食及糧食制品、豆類及豆制品、即食果蔬類、飲料和礦泉水合格率最高,為100%。5.2015年吉林省出入境食品微生物檢測總合格率高于2014年。6.dd PCR方法無需核酸標(biāo)準(zhǔn)品,靈敏性高、特異性強,操作簡便,可用于單增李斯特氏菌基因的定量檢測。
[Abstract]:Objective : To understand the microbial contamination of imported and imported foods in Jilin Province and to provide a theoretical basis for effective measures to reduce the risk of microbial contamination in import and export foods . ( 3 ) The concentration of probes in dd PCR reaction was optimized to verify the specificity , sensitivity , quantification limit and detection limit of the proposed method . The results showed that 1.1668 parts of 8 kinds of food were detected by microorganisms . Milk and milk products , ready - to - eat fruits and vegetables have the highest qualification rate , 100 % . 3.1596 samples were tested , 15 samples were detected , the total qualified rate was 99.06 % , and the qualified rate was 98.76 % . The results showed that the highest qualified rate was 98.76 % , the highest qualified rate was 98.76 % , and the highest qualified rate was 98.76 % .
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R155.5

【參考文獻】

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本文編號：2082589