橋本甲狀腺炎患者ILC2、B10活性與自身抗體水平關(guān)系的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-06-22 16:53
本文選題:橋本甲狀腺炎 + Ⅱ型固有淋巴細(xì)胞; 參考:《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:目的:橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)是一種器官特異性的自身免疫性疾病,其甲狀腺球蛋白抗體(anti-thyroglobulin antibody,ATG)和甲狀腺過氧化物酶抗體(anti-thyroid peroxidase antibody,ATPO)等自身抗體均顯著升高是HT發(fā)病的重要機(jī)制,但其原因尚未很好闡明。通過檢測橋本甲狀腺炎患者外周血2型固有免疫淋巴細(xì)胞(Group II innate lymphoid cell,ILC2)特征性細(xì)胞因子(IL-5、IL-13)和轉(zhuǎn)錄因子(retinoid-related orphan receptorα,RORα)的表達(dá)水平,并對(duì)其與血漿ATG和ATPO水平的相關(guān)性進(jìn)行了分析,探討ILC2的活性與橋本甲狀腺炎患者產(chǎn)生的自身抗體的關(guān)系;同時(shí)檢測橋本甲狀腺炎患者外周血B10的特征性細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)水平,對(duì)其與血漿ATG和ATPO水平也進(jìn)行了相關(guān)性分析,探討IL-10與橋本甲狀腺炎患者產(chǎn)生的自身抗體的關(guān)系。方法:1、選取在江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院就診的30例橋本甲狀腺炎患者,患者均在本院初次獲診斷,其中女26例,男4例,平均年齡(41±14)歲,所有患者診斷均符合《中國甲狀腺疾病診治指南》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組為健康體檢者,其中女25例,男5例,平均年齡(44±10)歲,無甲狀腺疾病、自身免疫性疾病及家族史。2、采用免疫化學(xué)發(fā)光法(化學(xué)發(fā)光分析儀為美國Beckman Coulter公司的LDX800)檢測血漿ATG、ATPO、游離三碘甲腺原氨酸(Freetriiodothyronine,FT3)、游離甲狀腺素(free thyroxine,FT4)、促甲狀腺激(Thyroid Stimulating Hormone,TSH)水平。3、利用Ficoll-泛影葡胺密度梯度離心法分離橋本甲狀腺炎患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞,提取總RNA。用分光光度計(jì)測量OD260/280值,計(jì)算RNA濃度及純度。4、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析橋本甲狀腺炎患者外周血ILC2轉(zhuǎn)錄因子(RORα)和特征性細(xì)胞因子(IL-5、IL-13)的m RNA表達(dá)水平,以及B10特征性細(xì)胞因子(IL-10)的m RNA表達(dá)水平。5.通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血漿中ILC2特征性細(xì)胞因子(IL-5、IL-13)蛋白的表達(dá)水平,以及B10特征性細(xì)胞因子(IL-10)蛋白的表達(dá)水平。6、應(yīng)用Graphpad5.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩組間的比較采用非配對(duì)Student-t檢驗(yàn),相關(guān)性分析用Pearson法,以P0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、橋本甲狀腺炎患者的血漿中ATG和ATPO均明顯升高,而FT3稍有降低,FT4下調(diào)明顯且TSH顯著升高,呈現(xiàn)出明顯的橋本甲狀腺炎的病理特征。2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,橋本甲狀腺炎患者外周血ILC2轉(zhuǎn)錄因子RORα和特征性細(xì)胞因子IL-5、IL-13的m RNA表達(dá)水平均明顯高于健康對(duì)照者,提示在橋本甲狀腺炎患者中的ILC2活性水平是升高的。而B10特征性細(xì)胞因子IL-10的m RNA表達(dá)水平有下降趨勢。3、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果顯示,與健康對(duì)照者相比橋本甲狀腺炎患者血漿中ILC2特征性細(xì)胞因子IL-5、IL-13表達(dá)水平是顯著增高的,B10特征性細(xì)胞因子IL10是顯著降低的。4、基于橋本甲狀腺炎患者ILC2相關(guān)分子和患者血漿自身抗體水平分析的基礎(chǔ)上,開展了IL-5、IL-13及RORα的表達(dá)水平和患者血漿自身抗體ATG和ATPO的相關(guān)性進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,RORα的表達(dá)水平與ATPO、ATG的血漿含量均呈現(xiàn)明顯正相關(guān);IL-5的表達(dá)水平與ATPO的血漿含量是正相關(guān)的,IL-5與ATG及IL-13的表達(dá)水平與ATG、ATPO的血漿含量存在著正相關(guān)的趨勢;IL-10的表達(dá)水平與ATPO的血漿含量存在顯著負(fù)相關(guān),IL-10與ATG的血漿含量存在著負(fù)相關(guān)的趨勢,但差異不顯著,有待進(jìn)一步的探討。結(jié)論:HT患者甲狀腺自身抗體水平的升高與ILC2活性增強(qiáng)及IL-10水平下降關(guān)系密切,這可能是HT發(fā)病的重要免疫學(xué)機(jī)制。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between IL - 10 and ATPO levels , and to investigate the relationship between IL - 10 and anti - thyroid peroxidase antibody ( ATPO ) . Methods : 1 . The serum ATG , ATPO and free triiodomethamine ( FT3 ) were detected by immunochemical luminescence ( LDX800 ) . The levels of IL - 5 , IL - 13 , IL - 5 and IL - 13 in patients with Hashimoto ' s disease were analyzed by means of real - time fluorescence quantitative PCR . The results showed that IL - 5 , IL - 13 , IL - 5 and IL - 13 were significantly higher than those in healthy controls . Conclusion : The level of thyroid autoantibodies in HT patients is closely related to ILC2 activity and decrease of IL - 10 level , which may be an important immunological mechanism for HT pathogenesis .
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R581.4
【參考文獻(xiàn)】
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1 趙瑞娜;張波;楊筱;姜玉新;賴興建;朱沈玲;張曉燕;;超聲造影對(duì)橋本甲狀腺炎合并甲狀腺結(jié)節(jié)的診斷價(jià)值[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2015年01期
,本文編號(hào):2053523
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