本文關(guān)鍵詞：分枝桿菌細胞全容物在細菌抵御巨噬細胞降解作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《大連醫(yī)科大學》 2015年

分枝桿菌細胞全容物在細菌抵御巨噬細胞降解作用的研究

秦彪杰  

【摘要】：結(jié)核桿菌是一種慢生長胞內(nèi)細菌,能夠在細胞內(nèi)存活并緩慢增殖,在免疫系統(tǒng)功能下降時,細菌爆發(fā)性增值并引起嚴重肺部炎癥,威脅生命。結(jié)核桿菌作為一種胞內(nèi)細菌,具有逃避免疫細胞攻擊的特點,研究其對免疫系統(tǒng)攻擊機制對研發(fā)特效抗結(jié)核藥物以及新的檢測手段的發(fā)現(xiàn)具有十分重要的意義。位于細胞壁外側(cè)的脂多糖可以引發(fā)多種免疫反應(yīng),尤其是LAM/LM(脂阿拉伯甘露糖聚糖/脂甘露糖聚糖)被認為介導了Thl/Th2型細胞免疫反應(yīng),決定了細菌在細胞內(nèi)的存活。然而,結(jié)核桿菌與細胞互作是一個復雜的免疫反應(yīng),尋找具有免疫逃避功能的分子,需要從不同水平進行檢測,包括從細菌水平到分子水平如LAM等,才能確認靶分子并對細菌與細胞互作進行真實的表述。由于結(jié)核桿菌具有高的致病性,恥夠桿菌常作為替代菌對結(jié)核相關(guān)特性進行研究。本論文使用恥垢分枝桿菌及其細胞全容物利用氣霧攻擊法,對小鼠肺部進行侵染,同時利用巨噬細胞做了相應(yīng)的體外實驗,對細菌在細胞以及肺部互作規(guī)律進行描述,為細菌在細胞內(nèi)存活相關(guān)活性因子提供了實驗依據(jù),并為進一步分選有效組分提供研究手段。本課題使用了恥垢分枝桿菌和大腸桿菌兩種細菌對小鼠肺臟進行了侵染,發(fā)現(xiàn)這兩種細菌在存活和被清除的特點上存在差異。在較低侵染濃度時(MOI≤10以及≤108CFU/mouse)兩種細菌都表現(xiàn)為迅速被清除,當侵染濃度較高時(MOI≥100以及≥109CFU/mouse)表現(xiàn)為肺臟清除細菌速率減慢,甚至不能控制細菌的增值,于是選擇適當?shù)募毦秩緷舛?MOI=10以及107CFU/mouse)進行實驗,發(fā)現(xiàn)細菌在24-72h內(nèi)表現(xiàn)為被清除,但恥垢分枝桿菌清除速率較大腸桿菌的要慢,于是利用兩種細菌的細胞全溶解物(WCL)對這兩種模型進行干預,發(fā)現(xiàn)細菌細胞全容物影響細菌存活和清除的規(guī)律,且恥垢分枝桿菌WCL(S)降低了大腸桿菌被清除的速率。進一步利用分離的細胞壁組分對這兩中模型進行干預,發(fā)現(xiàn)細菌細胞全容物影響巨噬細胞功能,對細菌存活率有較大影響,WCL(S)具有幫助大腸桿菌提高在細胞內(nèi)存活的能。同時檢測了細胞形態(tài)以及肺部損傷與細菌清除規(guī)律之間的關(guān)系。分別從動物和細胞水平,驗證了細菌存活能力的差異,以及WCL在其中所起的作用。實驗結(jié)果顯示,利用高濃度恥垢分枝桿菌侵染小鼠肺部后,肺部出現(xiàn)炎癥,短期出現(xiàn)了結(jié)核相類似的病理特征,提示該模型可用于模擬結(jié)核桿菌對肺部的早期感染。恥夠桿菌在巨噬細胞中表現(xiàn)出較大腸桿菌更長的存活時間,且清除速率較慢,且WCL(S)具有幫助大腸桿菌提高在細胞內(nèi)存活的能力。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R378.911
【目錄】：

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