本文選題：DBA/1小鼠 + CIA模型��； 參考：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的本研究以雄性DBA/1小鼠為對象,采用牛Ⅱ型膠原蛋白與弗氏佐劑混合的方式進(jìn)行CIA造模,研究多種因素及造模條件對CIA模型發(fā)病率、持續(xù)時(shí)間及穩(wěn)定性的影響,初步探討優(yōu)化后CIA模型的整體行為學(xué)改變和病理損傷。在此基礎(chǔ)上,以不同劑量穿藤通痹湯干預(yù)給藥,觀察其對DBA/1小鼠CIA模型關(guān)節(jié)炎癥的抑制作用和骨破壞的保護(hù)及修復(fù)作用。方法(1)SPF級雄性DBA/1小鼠20只,體重15-18g,7周齡,實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)3-5天,自由飲水飲食。然后分為空白組和模型組,每組10只,空白組不給于干預(yù)措施,模型組進(jìn)行常規(guī)CIA造模。將牛Ⅱ型膠原溶液與完全佛氏佐劑混合均勻,于實(shí)驗(yàn)第1天經(jīng)尾根部免疫注射,21天時(shí)牛Ⅱ型膠原溶液與不完全佛氏佐劑混合均勻相同部位加強(qiáng)免疫一次。實(shí)驗(yàn)進(jìn)程為56d。(2)SPF級雄性DBA/1小鼠60只,體重16-19g,8周齡,實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)3天,自由飲水飲食。然后分為空白組、模型組、來氟米特組以及穿藤通痹湯低劑量組、中劑量組和高劑量組6組。模型組按照實(shí)驗(yàn)日程,以摸索好的成熟條件進(jìn)行CIA造模。于第21天二次免疫誘導(dǎo)CIA后開始干預(yù)給藥,來氟米特組2.80mg/kg/d給藥干預(yù),以體重給藥。穿藤通痹湯各劑量組給藥濃度分別為0.44g/ml,0.88g/ml,1.76g/ml。每天灌胃一次,每次0.4ml。實(shí)驗(yàn)設(shè)定日期為49d,從第21d開始干預(yù)給藥,連續(xù)給藥4周。(3)整體觀察各組小鼠的不同表現(xiàn):以體重、關(guān)節(jié)評分、踝關(guān)節(jié)直徑、足趾容積、關(guān)節(jié)抓力、熱板效應(yīng)、紅外溫度、踝關(guān)節(jié)X光表現(xiàn)、HE染色及細(xì)胞免疫因子TNF-α等指標(biāo)評價(jià)藥物干預(yù)效果結(jié)果(1)采用牛Ⅱ型膠原蛋白分別與CFA、IFA混合于第1和21天經(jīng)尾根部免疫注射的方法可使小鼠發(fā)病率高達(dá)100%,是一種高致病率的免疫方法。(2)經(jīng)各項(xiàng)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)DBA/1小鼠CIA模型有明顯的RA進(jìn)展分期。動(dòng)物一般在二次免疫后一周內(nèi)發(fā)病,各組指標(biāo)開始上升,約10天之內(nèi)即可全部發(fā)病,而后進(jìn)入急性期,腫脹持續(xù)發(fā)展,持續(xù)2-3周左右,而后進(jìn)入慢性遷延期,腫脹有所消退,病理損傷持續(xù)加重。(3)穿藤通痹湯不同劑量對于RA模型的抑制作用不同,高劑量組的綜合調(diào)節(jié)作用要優(yōu)于中、低劑量組。(4)與來氟米特組相比,穿藤通痹湯高劑量組對于DBA/1小鼠CIA模型骨及軟骨損傷的保護(hù)和修復(fù)作用更加明顯。結(jié)論(1)經(jīng)過對DBA/1小鼠CIA模型致敏原、免疫時(shí)間、注射部位及免疫劑量的改良,基于傳統(tǒng)CIA造模方法改良的RA模型從發(fā)病率、持續(xù)時(shí)間及關(guān)節(jié)損傷程度來看是成熟穩(wěn)定的RA動(dòng)物模型。(2)穿藤通痹湯對于DBA/1小鼠CIA模型有一定的治療作用,能夠抑制動(dòng)物模型急性期的RA進(jìn)展,對后期骨及軟骨有一定的保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of various factors and conditions on the incidence, duration and stability of DBA/1 model in male DBA/1 mice by mixing bovine type 鈪，

本文編號：1864252