LC3-Ⅱ與STS-1、MyD88在全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎患兒外周血淋巴細(xì)胞中的表達(dá)及相關(guān)性的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-08 13:49
本文選題:全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎 + 自噬; 參考:《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:目的:通過(guò)研究sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞中LC3-Ⅱ表達(dá),為進(jìn)一步探索自噬在sJIA發(fā)生發(fā)展中的作用提供線索;通過(guò)研究MyD88及STS-1的表達(dá),探索MyD88依賴的Toll樣受體信號(hào)通路及STS-1是否參與sJIA自噬的發(fā)生。進(jìn)而研究三者間是否有一定的相關(guān)性,為防治s JIA的發(fā)病提供新策略和新靶點(diǎn),為臨床治療提供新方向。方法:研究對(duì)象均來(lái)自2015年5月~2017年1月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院小兒內(nèi)科住院及門診確診的sJIA患兒及健康體檢的兒童各26例。晨起空腹采血后,用“人外周血淋巴細(xì)胞分離液”分離得到淋巴細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為兩組:(1)對(duì)照組:在我院兒童保健門診健康查體的兒童外周血淋巴細(xì)胞;(2)實(shí)驗(yàn)組:sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞。Western blotting檢測(cè)淋巴細(xì)胞中LC3-Ⅱ、STS-1、MyD88蛋白的表達(dá),結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,檢驗(yàn)有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;免疫熒光檢測(cè)LC3-Ⅱ在淋巴細(xì)胞胞漿中的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法:應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,檢測(cè)數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布時(shí)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩樣本間的比較應(yīng)用t檢驗(yàn);數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布時(shí)用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示,兩樣本間的比較應(yīng)用非參數(shù)檢驗(yàn);通過(guò)線性相關(guān)分析對(duì)實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析;P0.1為符合正態(tài)分布,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.01為具有顯著性差異。相關(guān)系數(shù)r0.2無(wú)相關(guān),0.2~0.4弱相關(guān),0.4~0.7顯著相關(guān),r0.7強(qiáng)相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均重復(fù)三次以上。結(jié)果:1與健康兒童比較,全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞STS-1表達(dá)增高,經(jīng)t檢驗(yàn)兩組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對(duì)Western所得條帶進(jìn)行半定量分析得到積分光密度值(IOD)終結(jié)果分別為健康兒童0.706±0.166,sJIA患兒1.031±0.275。2全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞中MyD88表達(dá)水平較健康兒童增高,經(jīng)t檢驗(yàn)兩組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western得到積分光密度值終結(jié)果分別為健康兒童0.881±0.509,sJIA患兒1.611±0.623。3全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞LC3-Ⅱ的表達(dá)水平較健康兒童表達(dá)增高,兩組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0040.05)。Western得到積分光密度值終結(jié)果分別為健康兒童0.597±0.179,sJIA患兒0.880±0.435。免疫熒光染色觀察LC3-Ⅱ在淋巴細(xì)胞胞漿中的表達(dá)水平,與Western結(jié)果一致。4全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞中LC3-Ⅱ與STS-1積分光密度值間的散點(diǎn)圖,經(jīng)直線相關(guān)分析無(wú)相關(guān)性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pearson積差相關(guān)系數(shù)0.336,P=0.0930.05)。5全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞中LC3-Ⅱ與MyD88積分光密度值呈正相關(guān),直線相關(guān)分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pearson積差相關(guān)系數(shù)0.478,P=0.0130.05)。6全身型幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(sJIA)患兒外周血淋巴細(xì)胞中STS-1與MyD88積分光密度值呈正相關(guān),直線相關(guān)分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pearson積差相關(guān)系數(shù)0.817,P=0.0000.01)。結(jié)論:1 sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞STS-1高表達(dá),提示STS-1基因在sJIA患兒與正常兒童間存在差異性表達(dá)。2 sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞LC3-Ⅱ高表達(dá),推測(cè)s JIA的發(fā)生發(fā)展與自噬過(guò)度表達(dá)有關(guān)。3 sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞MyD88表達(dá)升高,且MyD88與LC3-Ⅱ的表達(dá)存在線性相關(guān),提示在s JIA中Toll樣受體信號(hào)通路參與自噬的發(fā)生。4 sJIA患兒外周血淋巴細(xì)胞STS-1、LC3-Ⅱ表達(dá)不存在線性相關(guān),但是不除外樣本量小或者個(gè)體差異所致,且文獻(xiàn)中有STS-1參與自噬發(fā)生的相關(guān)報(bào)道,推測(cè)在s JIA中STS-1通過(guò)激活某些信號(hào)通路誘導(dǎo)自噬的發(fā)生。
[Abstract]:The expression of LC3 - 鈪,
本文編號(hào):1861656
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