STAG2基因在腎癌的表達(dá)及功能研究
本文選題:STAG + 腎腫瘤; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2018年01期
【摘要】:目的研究骨髓基質(zhì)抗原2(STAG2)基因在人腎癌組織和腎癌細(xì)胞中的表達(dá)水平并研究STAG2基因?qū)δI癌細(xì)胞生物學(xué)表型的影響。方法使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)STAG2基因在5株腎癌細(xì)胞、1株正常腎細(xì)胞和68對(duì)腎癌及其對(duì)應(yīng)的癌旁組織中的表達(dá)水平;使用Western blot法分析STAG2蛋白在5株腎癌細(xì)胞、1株正常腎細(xì)胞的表達(dá)特點(diǎn);使用慢病毒包裝感染ACHN、786-O細(xì)胞并使用qRT-PCR檢測(cè)感染效率;CCK8試劑盒檢測(cè)STAG2過(guò)表達(dá)后對(duì)腎癌細(xì)胞增殖的影響;Transwell法檢測(cè)STAG2過(guò)表達(dá)后對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)STAG2過(guò)表達(dá)后對(duì)腎癌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果 (1)qRT-PCR結(jié)果顯示,與正常腎細(xì)胞相比,STAG2基因在5株腎癌細(xì)胞的表達(dá)顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);(2)Western blot結(jié)果顯示在5株腎癌細(xì)胞中STAG2蛋白表達(dá)明顯低于正常腎細(xì)胞;(3)qRT-PCR檢測(cè)腎癌及其癌旁組織的STAG2表達(dá)水平結(jié)果顯示與其對(duì)應(yīng)癌旁組織相比,72.06%(49/68)腎癌組織中STAG2表達(dá)水平下降(P0.01);腎癌組織中STAG2表達(dá)水平與腫瘤的臨床病理分期相關(guān)(P=0.029),與患者年齡、性別、腫瘤組織學(xué)分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)性;(4)慢病毒感染ACHN、786-O細(xì)胞后STAG2表達(dá)水平明顯升高(P0.01);(5)體外實(shí)驗(yàn)中,過(guò)表達(dá)STAG2基因明顯抑制腎癌細(xì)胞的增殖和遷移能力,促進(jìn)腎癌細(xì)胞的早期凋亡(P0.05,P0.01)。結(jié)論 (1)在腎癌細(xì)胞和腎癌組織中STAG2的表達(dá)水平均有明顯的下降,提示STAG2可能參與腎癌的發(fā)生和發(fā)展的過(guò)程,STAG2低表達(dá)對(duì)腎癌的早期診斷可能提供一些幫助;(2)上調(diào)STAG2基因的表達(dá)明顯抑制腎癌細(xì)胞的增殖和遷移能力、促進(jìn)腎癌細(xì)胞的凋亡,提示STAG2可能成為治療腎癌的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to study the expression of bone marrow stromal antigen 2STAG2) gene in human renal cell carcinoma (RCC) and the effect of STAG2 gene on the biological phenotype of RCC cells. Methods the expression of STAG2 gene in 5 normal renal cell lines and 68 pairs of renal cell carcinoma and its corresponding adjacent tissues were detected by real-time fluorescence quantitative PCRQ RT-PCR. Western blot assay was used to analyze the expression of STAG2 protein in 5 renal cell lines and 1 normal renal cell line. ACHN 786-O cells were infected with lentivirus packaging and the effect of STAG2 overexpression on the proliferation of renal cell carcinoma cells was detected by qRT-PCR kit. Transwell method was used to detect the effect of STAG2 overexpression on the invasion of renal cancer cells. The effect of overexpression of STAG2 on apoptosis of renal carcinoma cells was detected by flow cytometry. Results the results of QRT-PCR showed that the expression of statin G2 gene in 5 renal cancer cells was significantly decreased compared with that in normal renal cells. The expression of STAG2 protein in 5 renal cell lines was significantly lower than that in normal renal cell line and its adjacent tissues. The results showed that the expression level of STAG2 in renal cell carcinoma and its adjacent tissues was 72.06g / 4968%. The expression of STAG2 in renal cell carcinoma was correlated with the clinicopathologic stage of the tumor and the age of the patients. Sex and histological grade of tumor were not significantly correlated with the expression of STAG2 after lentivirus infection in ACHNN78-O cells. In vitro, overexpression of STAG2 gene significantly inhibited the proliferation and migration of renal cancer cells and promoted the early apoptosis of renal cancer cells. Conclusion the expression of STAG2 in RCC and RCC was significantly decreased. The results suggest that the low expression of STAG2 may be involved in the pathogenesis and development of renal cell carcinoma. The low expression of STAG2 may provide some help for the early diagnosis of renal carcinoma.) upregulating the expression of STAG2 gene can significantly inhibit the proliferation and migration of renal cancer cells and promote the apoptosis of renal cancer cells. The results suggest that STAG2 may be a potential target for the treatment of renal cell carcinoma.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)深圳二院臨床學(xué)院;深圳市第二人民醫(yī)院泌尿外科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81503616) 中國(guó)博士后科學(xué)基金(編號(hào):2016M600708) 深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):JSGG20160301162913683、JCYJ20130329104732074) 深圳市高水平大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)科建設(shè)專項(xiàng)資金
【分類號(hào)】:R737.11
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,本文編號(hào):1849249
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