本文關鍵詞：金口寶對兔口腔潰瘍治療作用的機制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《四川醫(yī)科大學》 2015年

金口寶對兔口腔潰瘍治療作用的機制探討

陳琪  

【摘要】：目的：觀察金口寶對兔口腔潰瘍的作用,探討其對兔口腔潰瘍的作用機制。方法：1.選取3000g-3500g新西蘭白兔72只,利用冰醋酸制作口腔潰瘍的動物模型。2.制備金口寶藥膜與生理鹽水藥膜。3.評估金口寶對兔的藥物毒性作用。采用雙盲法將兔隨機分為2組：正常對照組(normal control group, NC組,n=6),不做任何處理；金口寶藥膜組(Jin Kou Bao pellicles group, JK組,n=6),潰瘍處貼敷金口寶藥膜2次／天,即早上8：00,下午5：00。用藥7天后,抽取腔靜脈血液檢測肝功、凝血、血常規(guī)；膀胱穿刺采集尿液行尿常規(guī)檢驗；取心臟、腎臟、肝臟標本,用HE染色,光鏡下對比觀察。4.觀察金口寶對兔口腔潰瘍的療效。采用隨機數(shù)字表法將兔隨機分為3組：正常對照組(normal control group, NC組,n=18),不做任何處理；生理鹽水藥膜組(normal saline pellicles group, NS組,n=18),潰瘍處貼敷生理鹽水藥膜；金口寶藥膜組(Jin Kou Bao pellicles group, JK組,n=18),潰瘍處貼敷金口寶藥膜。2次／天,即早上8：00,下午5：00。另有6只用于口腔潰瘍模型鑒定(提供正常組織和潰瘍組織標本)。分別于第3 d,5 d,7 d早上8：00取兔雙側口腔黏膜組織。5.使用HE染色法(hematoxylin-eosin staining, HE)觀察取材組織中的炎癥細胞數(shù)目、黏膜上皮破損程度、血管數(shù)目等的情況。6.使用逆轉錄聚合酶聯(lián)反應(reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)檢測口腔頰部黏膜組織中Tnf-a, bfgf, Egf基因mRNA表達情況。7.使用免疫組織化學法(Immunohistochemistry, IHC)檢測口腔頰部黏膜組織TNF-α,bFGF的平均積光密度值。免疫組織化學結果采用Imageproplus-IPP圖像系統(tǒng)半定量測定TNF-α, bFGF的平均積光密度值。8.采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件,結果以均數(shù)±標準差(x±s)表示。對于單因素兩水平的計量資料采用t檢驗,對于兩因素的計量資料采用兩因素方差分析,其多重比較采用Duncan方法。以a=0.05為檢驗水準,P0.05則有統(tǒng)計學意義。結果：1.利用冰醋酸燒灼法成功制備了兔口腔潰瘍動物模型。2.藥物毒性實驗結果：JK組與NC組之間肝功、凝血、血常規(guī)及尿常規(guī)指標的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),證明金口寶無毒。3.潰瘍的愈合速度：JK組快于NS組(P0.05),JK組7天愈合率為66%,平均面積為(16.23±1.37)mm2; NS組7天愈合率為16%,平均面積為(27.33±3.06)mm2。金口寶對兔口腔潰瘍有治療效果。4.HE染色切片顯示：在用藥的第3d,5d,7d,JK組較NS組炎癥細胞少,上皮增生情況好。5. RT-PCR結果顯示：①Tnf-α mRNA相對表達量：造模成功當天,NC組為0.40±0.09,低于NS組1.72±0.17,JK組1.72±0.17(P0.01)。JK組與NC組比較,其差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。在用藥的第3 d,5 d,7 d,NC組Tnf-α mRNA的相對表達量分別為0.39±0.09,0.41±0.08,0.94±0.05。NS組分別為1.44±0.15,1.22±0.20,0.70±0.10。JK組分別為1.11±0.10,0.71±0.05,0.53±0.03(P0.01)。同NC、NS組比較,JK組的口腔潰瘍愈合速度明顯增快,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。② bfgf mRNA相對表達量：造模成功當天,NC組為0.34±0.03,低于NS組0.60±0.06,JK組0.60±0.06(P0.01)。NS組與JK組比較,其差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。在用藥的第3d,5d,7d, NC組bfgf mRNA的相對表達量分別為0.35±0.03,0.33±0.03,0.34±0.03。NS組分別為0.75±0.05,0.10±0.10,1.16±0.07。JK組分別為1.11±0.10,1.42±0.20,1.63±0.20。同NC、NS組比較,JK組的口腔潰瘍愈合速度明顯增快,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。③Egf mRNA相對表達量：造模成功當天,NC組0.23±0.03,低于NS組0.44±0.03,JK組0.44±0.03(P0.01)。NS組與JK組比較,差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在用藥的第3d,5d,7d, NC組Egf mRNA的相對表達量分別為0.27±0.03,0.19±0.08,0.233±0.03。NS組分別為0.75±0.05,0.10±0.103,1.16±0.07,JK組分別為0.90±0.08,1.48±0.15,1.72±0.13(P0.01)。同NC、NS組比較,JK組的口腔潰瘍愈合速度明顯增快,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。6.IHC結果顯示：① TNF-α平均光密度值：造模成功當天,NC組為0.23±0.031,低于NS組0.44±0.03,JK組0.44±0.03(P0.01)。NS組與JK組比較,其差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。在用藥的第3d,5d,7d, NC組TNF-α的平均光密度值分別為0.27±0.03,0.19±0.081,0.23±0.03。NS組分別為0.78±0.06,0.87±0.05,1.30±0.10。JK組分別為0.90±0.08,1.48±0.15,1.72±0.13(P0.01)。同NC、NS組比較,JK組的口腔潰瘍愈合速度明顯增快,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。②bFGF的平均光密度值：造模成功當天,NC組0.01±0.00,低于NS組0.02±0.01,JK組0.02±0.00(P0.01)。NS組與JK組比較,差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在用藥的第3d,5d,7d, NC組bFGF的蛋白表達量分別為0.01±0.01,0.01±0.01,0.01±0.01。NS組分別為0.08±0.03,0.10±0.01,0.13±0.01。JK組分別為0.12±0.01,0.14±0.01,0.17±0.03(P0.01)。同NC、NS組比較,JK組的口腔潰瘍愈合速度明顯增快,且差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論：1.冰醋酸燒灼法可以制備兔復發(fā)性口腔潰瘍模型。2.金口寶可縮短口腔潰瘍愈合時間,加快口腔潰瘍創(chuàng)面的愈合。3.金口寶可能通過調節(jié)TNF-α, bFGF,EGF的表達促進口腔潰瘍愈合。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R276.8
【目錄】：

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