本文選題：針刺預處理　切入點：缺血預處理　出處：《黑龍江中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:通過對大鼠缺血心肌線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放的調(diào)節(jié)研究,探討針刺預處理抗心肌缺血的分子機制,并闡明針刺預處理對線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的開放的聯(lián)系;同時為本法用于臨床防治缺血性心臟病和研究線粒體與電針預處理抗心肌缺血的關(guān)系提供實驗科學依據(jù)。方法:將96只大鼠通過隨機數(shù)字表相應分成空白組、模型組、針刺預處理組(針刺心俞穴)、缺血預處理組。采取活體大鼠心左冠狀動脈前降支結(jié)扎方式復制心肌缺血及再灌注損傷模型�？瞻捉M:造模前,與針刺預處理組同固定大鼠30分鐘但不針刺;每日1次、連續(xù)15日;不造模直接取材,整個實驗過程不施加其他因素。模型組:造模前同空白組固定;心肌缺血及再灌注造模,整個實驗過程不施加其他因素。針刺預處理組:造膜前15日開始針刺;每日一次,每次30min,共15日;心肌缺血及再灌注造模。缺血預處理組:造模前與空白組相同;造模時在進行冠狀動脈結(jié)扎前先進行阻斷血流5min,再灌流5min;如此連續(xù)反復3次,共30min的缺血預處理。心肌缺血造模成功后分別于即刻、24h、48h檢測,血清CK、血清LDH、心肌缺血面積及心肌細胞線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔的開放程度。結(jié)果:1.模型組心肌梗死面積超過50%,血清CK、LDH檢測值顯著升高,激光共聚焦顯微鏡觀察染色的線粒體綠色熒光與空白組對比明顯減弱,實驗結(jié)果表明其線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔活性顯著減低(P0.01)。2.與模型組對照,缺血預處理組與針刺預處理即刻組的心肌梗死面積,血清CK、LDH均明顯減低,激光共聚焦顯微鏡觀察顯示,線粒體熒光強度明顯減低,但缺血預處理組與針刺預處理即刻組各項指標差異不顯著(P0.05)。3.針刺預處理24h組、48h組與缺血預處理組及針刺預處理組即刻組對照心肌梗死面積、血清CK、LDH進一步減低;同時激光共聚焦顯微鏡觀察到線粒體熒光強度有一定增強(P0.05或P0.01)。4.通過實驗數(shù)據(jù)可以看出針刺預處理組與缺血預處理組均可治療心肌缺血再灌注所引起的損傷;并且可能針刺預處理24h組為最佳治療方案。結(jié)論:1.針刺預處理后即刻、24h、48h對缺血心肌的保護作用存在差異,并且治療效果會隨時間的不同而呈增強-峰值-減弱的趨勢變化。2.針刺預處理與缺血預處理均可降低血清CK、LDH,減少再灌注損傷所引起的心肌梗死面積,從而減少心肌細胞凋亡。3.針刺預處理可能是通過抑制心肌缺血再灌注過程中mPTP的開放,從而減少線粒體的凋亡,減輕心肌缺血引起的損傷。4.針刺預處理可用于臨床防治心肌缺血再灌注損傷,并且在臨床治療方面具有良好的療效。
[Abstract]:Objective: to explore the molecular mechanism of acupuncture preconditioning in preventing myocardial ischemia by regulating the opening of mitochondrial permeability transition pore in ischemic myocardium of rats, and to elucidate the relationship between acupuncture preconditioning and opening of mitochondrial permeability transition pore. At the same time, it provides experimental scientific basis for clinical prevention and treatment of ischemic heart disease and the relationship between mitochondria and electroacupuncture preconditioning against myocardial ischemia. Methods: 96 rats were divided into blank group and model group by random digital table. Acupuncture preconditioning group (acupuncture at Xinshu acupoint, ischemic preconditioning group). The model of myocardial ischemia and reperfusion injury was established by ligating the anterior descending branch of left coronary artery in living rats. The rats in the acupuncture preconditioning group were fixed for 30 minutes without acupuncture; once a day, on 15th; no model was made directly and no other factors were applied throughout the experiment. Model group: fixed before modeling with blank group; model of myocardial ischemia and reperfusion, No other factors were applied in the whole experiment. Acupuncture preconditioning group: acupuncture began on 15th before membrane making; once a day for 30 minutes each time for 15th; myocardial ischemia and reperfusion modeling; ischemic preconditioning group: the model was the same as that in the blank group. Before coronary artery ligation, occlusion of blood flow was performed for 5 min and reperfusion for 5 min, then repeated for 3 times for 30 min. Myocardial ischemia was detected immediately at 24 h and 48 h after successful establishment of the model. Serum CK, serum LDH, myocardial ischemia area and opening degree of mitochondrial membrane permeability transition pore in myocardial cells. Results: the myocardial infarction area in the model group was more than 50, and the detection value of serum CK LDH was significantly higher than that in the model group. Compared with the blank group, the green fluorescence of mitochondria stained by laser confocal microscope was obviously weakened, and the results showed that the activity of mitochondrial membrane permeability transition pore was significantly decreased in the model group, compared with the model group. Myocardial infarction size and serum CK LDH in ischemic preconditioning group and acupuncture preconditioning group were significantly decreased, and the fluorescence intensity of mitochondria was significantly decreased by laser confocal microscopy. However, there was no significant difference between the ischemic preconditioning group and the acupuncture immediate preconditioning group (P 0.05). 3. The myocardial infarction size and the serum CKP LDH were further decreased in the 24h pretreatment group, the ischemic preconditioning group and the ischemic preconditioning group and the immediate acupuncture preconditioning group. At the same time, the fluorescence intensity of mitochondria was enhanced by laser confocal microscope. The experimental data showed that acupuncture preconditioning group and ischemic preconditioning group could treat myocardial ischemia-reperfusion injury. It is possible that 24 h acupuncture preconditioning group is the best therapeutic regimen. Conclusion 1. The protective effects of 24 h or 48 h acupuncture preconditioning on ischemic myocardium are different. And the therapeutic effect will change with time. 2.Acupuncture preconditioning and ischemic preconditioning can decrease the serum CKT LDH and reduce the myocardial infarction area caused by reperfusion injury. Acupuncture preconditioning may reduce the apoptosis of mitochondria by inhibiting the opening of mPTP during myocardial ischemia-reperfusion. Acupuncture preconditioning can be used to prevent and treat myocardial ischemia-reperfusion injury, and has a good effect in clinical treatment.
【學位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R245

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