本文選題：生物組織光學(xué)透明　切入點(diǎn)：組織透明　出處：《深圳大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：近年來(lái)隨著生物醫(yī)學(xué)迅速發(fā)展的進(jìn)程,生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究從人工痕跡較重的細(xì)胞研究過(guò)渡到了更具生理含義的組織、器官、胚胎甚至模式動(dòng)物的研究。為了獲得這些組織器官的三維光學(xué)成像,傳統(tǒng)技術(shù)是進(jìn)行組織切片再分層成像,這使得整個(gè)過(guò)程費(fèi)時(shí)費(fèi)力而且其切片過(guò)程破壞了器官的完整性和某些細(xì)胞亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的連續(xù)性,易導(dǎo)致獲得的細(xì)胞病生理信息部分丟失,因而促進(jìn)了生物組織光學(xué)透明技術(shù)產(chǎn)生和快速發(fā)展。生物組織光學(xué)透明技術(shù)是一種新穎的將完整的不透明的生物組織經(jīng)過(guò)光學(xué)透明處理后實(shí)現(xiàn)高透明且完整的樣本的技術(shù),可進(jìn)一步結(jié)合光學(xué)成像技術(shù)實(shí)現(xiàn)完整組織器官的熒光/吸收三維立體成像,具有傳統(tǒng)切片技術(shù)無(wú)法替代的性能,是生物醫(yī)學(xué)光子學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。生物組織光學(xué)透明技術(shù)的這些特點(diǎn)使得它在生物學(xué)醫(yī)學(xué)藥物開發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用并發(fā)揮著越來(lái)越重大的作用。本文先綜述了組織光學(xué)透明技術(shù)的概念、原理及具體的實(shí)現(xiàn)方法和步驟,介紹了其在生物醫(yī)學(xué)尤其是腦科學(xué)領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀和部分成果,比較了各方法不同參數(shù)的優(yōu)劣,并就未來(lái)的挑戰(zhàn)和發(fā)展應(yīng)用進(jìn)行了討論,之后開展了實(shí)驗(yàn)研究,具體內(nèi)容與結(jié)果如下:(1)對(duì)國(guó)際上現(xiàn)有的組織光學(xué)透明技術(shù)進(jìn)行比較研究,結(jié)果表明:uDISCO透明技術(shù)熒光蛋白信號(hào)保存效果較差,SeeDB透明技術(shù)對(duì)成年小鼠大組織透明度很低,Scale透明技術(shù)樣本體積膨脹較大,CUBIC透明技術(shù)不能和DiI染料相兼容,ScaleS透明技術(shù)對(duì)成年小鼠大組織樣本透明速率較低。同時(shí)針對(duì)目前SeeDB透明技術(shù)透明速率較慢的問(wèn)題,提出通過(guò)添加化學(xué)促滲透劑二甲基亞砜的方法提高了SeeDB的透明速率。(2)針對(duì)目前現(xiàn)有的組織光學(xué)透明技術(shù)存在的熒光淬滅問(wèn)題、破化細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)(不能和Di I染料相互兼容問(wèn)題)、透明速率較低問(wèn)題、組織體積形態(tài)變化大等問(wèn)題,開發(fā)出新型的組織透明技術(shù) UbasM透明技術(shù):篩選到了尿素、葡甲胺、蔗糖、1,3-二甲基-2-咪唑啉酮、Triton X-100具有較好清洗功能的試劑,并將其相互搭配發(fā)明了UbasM-1溶液:25wt%葡甲胺+25wt%尿素+20wt%1,3-二甲基-2-咪唑啉酮+0.2wt%Triton X-100,UbasM-2溶液:25wt%尿素+40wt%蔗糖+20wt%1,3-二甲基-2-咪唑啉酮,同時(shí)提出一套完整的樣本清洗方法流程。(3)對(duì)UbasM透明技術(shù)的透明速率、透明度、熒光蛋白信號(hào)保存度、能否與DiI染色相互兼容(膜結(jié)構(gòu)保護(hù))、組織體積形態(tài)變化以及在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)行研究,結(jié)果表明:UbasM技術(shù)具有對(duì)熒光蛋白質(zhì)信號(hào)影響較少、能和DiI染料相互兼容、透明速率較快、樣本透明度較高、組織體積形態(tài)變化極小,安全性好和操作簡(jiǎn)單以及成本低廉等多個(gè)方面的優(yōu)勢(shì)。同時(shí),將該技術(shù)應(yīng)用在阿爾茲海默癥和乳腺癌研究等生物醫(yī)學(xué)實(shí)際研究中,取得了較好的實(shí)驗(yàn)效果。綜上所述,與其它的生物組織光學(xué)透明技術(shù)比較,本研究開發(fā)的UbasM透明技術(shù)是一種簡(jiǎn)單、高效、適用性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣的新型組織光學(xué)透明技術(shù),在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)以及藥物開發(fā)領(lǐng)域中具有廣闊的應(yīng)用前景。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R318

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊杰;張智紅;駱清銘;;熒光蛋白研究進(jìn)展[J];生物物理學(xué)報(bào);2010年11期

2 張維;王sョ，

本文編號(hào)：1568613