本文關(guān)鍵詞：基于JAK-STAT信號(hào)通路探討加味小柴胡湯對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞影響的研究　出處：《福建中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的本課題擬通過(guò)體外實(shí)驗(yàn),研究加味小柴胡湯含藥血清對(duì)可穩(wěn)定表達(dá)乙肝病毒蛋白并分泌病毒顆粒的HepG2.2.15細(xì)胞及其JAK-STAT信號(hào)通路的影響,明確加味小柴胡湯是否通過(guò)調(diào)控JAK-STAT信號(hào)通路而影響慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)的發(fā)生發(fā)展,揭示加味小柴胡湯治療CHB的分子機(jī)制,為乙肝中醫(yī)治療和中西醫(yī)結(jié)合治療提供理論依據(jù),為開(kāi)發(fā)抗乙肝新藥打下基礎(chǔ)。方法1.納入研究的CHB患者分別以疏肝健脾立法的加味小柴胡湯和西藥恩替卡韋進(jìn)行治療,在服藥后分別抽血,制備(含藥)血清;2.對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng);3.應(yīng)用血清藥理學(xué)方法,以含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞進(jìn)行干預(yù);4.用MTT法檢測(cè)不同作用時(shí)長(zhǎng)、不同濃度含藥血清干預(yù)后的HepG2.2.15細(xì)胞的活力,評(píng)估加味小柴胡湯對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;5.收集不同作用時(shí)長(zhǎng)、不同濃度含藥血清干預(yù)后的HepG2.2.15細(xì)胞上清液,用ELISA法檢測(cè)HBsAg和HBeAg的分泌水平,評(píng)估加味小柴胡湯對(duì)HBV病毒的復(fù)制的影響;6.收集不同作用時(shí)長(zhǎng)、不同濃度含藥血清干預(yù)后的HepG2.2.15細(xì)胞,用Western Blot法檢測(cè)JAK-STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中JAK2、STAT3蛋白的表達(dá)水平,評(píng)估加味小柴胡湯對(duì)該通路的影響。結(jié)果1.MTT實(shí)驗(yàn):含藥血清干預(yù)HepG2.2.15細(xì)胞48h、96h、144h三個(gè)時(shí)間段,結(jié)果表明西藥和中藥均對(duì)細(xì)胞活力有抑制效果,西藥效果更明顯(P0.05);2.ELISA實(shí)驗(yàn):西藥與中藥均可達(dá)到減少HBsAg與HBeAg在血清含量的效果(P0.05),西藥組和10%中藥組沒(méi)有時(shí)間依賴性,20%中藥組有時(shí)間依賴性(隨藥物干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),中藥加味小柴胡湯的藥效日趨明顯),另外中藥組還有濃度依賴性(20%濃度的含藥血清比10%濃度的含藥血清藥效好)(P0.05);3.與對(duì)照組比較,西藥組、10%中藥組、20%中藥組中的JAK2、STAT3總蛋白表達(dá)依次下降,組與組之間有顯著性差異(P0.05);結(jié)論加味小柴胡湯對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞中的HBV病毒起到了抑制作用,同時(shí)具有保護(hù)細(xì)胞的作用,并可能具有調(diào)控JAK-STAT通路機(jī)制來(lái)治療CHB作用。
[Abstract]:Objective To study the effect of Jiawei Xiao Chai Hu Tang on the growth of HepG2.2 . 15 cells by regulating JAK - STAT signal pathway . Conclusion Jiawei Xiao Chai Hu Tang has an inhibitory effect on HBV virus in HepG2.2 . 15 cells , and has the function of protecting cells , and may have the function of regulating JAK - STAT pathway mechanism to treat hepatitis B .

【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R259

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1425349