本文關(guān)鍵詞：抗肝癌和肺癌細(xì)胞活性物質(zhì)的篩選及其作用機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： MTT 順鉑 杠柳苷F 人參皂苷Rk1 細(xì)胞凋亡 Hoechst染色 TNF-α Caspase-8

【摘要】：目的:用MTT法對(duì)各種中藥樣品進(jìn)行抗人肝癌HEPG2細(xì)胞和肺癌A549細(xì)胞活性篩選,并進(jìn)行活性追蹤,篩選出活性較強(qiáng)的物質(zhì),然后對(duì)其相關(guān)的抗腫瘤作用機(jī)制進(jìn)行初步探究,從而對(duì)抗腫瘤藥物的研發(fā)提供可能的先導(dǎo)化合物和相關(guān)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:通過MTT法用不同濃度的順鉑(20、40、60、80、100mg/mL)對(duì)人肝癌HEPG2細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè),算出不同濃度對(duì)應(yīng)的抑制率,從而獲得一個(gè)最合適的細(xì)胞毒性篩選濃度;以順鉑為參照,在發(fā)現(xiàn)香加皮(XJP)和人參(RSY)提取物對(duì)這兩種細(xì)胞有抑制作用的基礎(chǔ)上,重點(diǎn)對(duì)分離純化XJP和RSY獲得的系列樣品進(jìn)行活性追蹤,最終選出了兩種抗腫瘤活性較強(qiáng)的單體物質(zhì)(XJP-12、RSY-28);確定它們的結(jié)構(gòu)。用Hoechst染色法進(jìn)行檢測(cè)XJP-12和RSY-28對(duì)HEPG2細(xì)胞和A549細(xì)胞的凋亡情況;采用Human TNF-α Elisa試劑盒和Caspase-8活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)XJP-12和RSY-28對(duì)HEPG2和A549細(xì)胞中的TNF-α含量和Caspase-8活性。結(jié)果:不同濃度的順鉑對(duì)人肝癌HEPG2細(xì)胞和A549細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,對(duì) HEPG2 和 A549 細(xì)胞的 IC50 分別為(15.81±1.24)mg/mL、(24.67±2.12)mg/mL,當(dāng)順鉑濃度為60mg/mL時(shí),對(duì)兩種細(xì)胞的抑制率均達(dá)到了 75%以上,以此濃度作為后續(xù)樣品篩選的初篩濃度;經(jīng)過活性追蹤,發(fā)現(xiàn)XJP-12、RSY-11、RSY-28對(duì)HEPG2;XJP-12、RSY-25、RSY-28、RSY-30對(duì)A549細(xì)胞具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。其中XJP-12、RSY-28為單體物質(zhì)。它們分別是杠柳苷F和人參皂苷Rk1,其結(jié)構(gòu)式分別為:算為摩爾濃度后,杠柳苷F和人參皂苷Rk1對(duì)HEPG2細(xì)胞的IC50分別為13.5mM和12.1mM;對(duì)A549細(xì)胞的IC50分別為18.7mM和13.9mM,而同時(shí)兩次實(shí)驗(yàn)測(cè)得的順鉑的IC50分別為52.6mM和82.2mM。通過Hoechst染色發(fā)現(xiàn)XJP-12和RSY-28均能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,且凋亡情況跟兩種藥物濃度相關(guān);而且XJP-12和RSY-28均能增加細(xì)胞內(nèi)TNF-α含量和提高Caspase-8酶活性,并存在一定的劑量關(guān)系。結(jié)論:順鉑能有效的抑制HEPG2和A549細(xì)胞的增殖,且存在一定的劑量關(guān)系,可作為本次篩選的陽性對(duì)照。從香加皮和人參中篩選獲得了兩個(gè)對(duì)這兩種細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用的化合物杠柳苷F和人參皂苷Rk1。這兩個(gè)化合物對(duì)這兩種腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用的效價(jià)強(qiáng)度均大于順鉑。關(guān)于它們的抗癌作用研究還未見有報(bào)道。它們能提高細(xì)胞內(nèi)TNF-α含量和Caspase-8酶活性,通過TNFR1/TNF-α這條外源性死亡受體介導(dǎo)的信號(hào)通路來使細(xì)胞發(fā)生凋亡。
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

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5 肖東杰,汪運(yùn)山;B細(xì)胞被動(dòng)凋亡的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè));1998年05期

6 張運(yùn)濤,劉凡,姜茹,谷仲平,汪涌,張順,劉榮福,李玉梅;外源性p27與GRC-1細(xì)胞端粒酶活性及細(xì)胞凋亡關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2002年09期

7 石和元;王平;胡永年;邱幸凡;田代志;;溫膽湯改良方對(duì)Aβ_(25-35)誘導(dǎo)AD細(xì)胞模型bcl-2、bax蛋白表達(dá)的影響[J];世界科學(xué)技術(shù);2005年06期

8 孟威宏;王強(qiáng);王虹蛟;顏煒群;;牛胰蛋白酶抑制劑研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè));2008年04期

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10 張晨,黃世林,馬東初,孫英慧,馬小鋒;硫化砷誘導(dǎo)NB_4細(xì)胞調(diào)亡[J];白血病;2000年06期

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1 鄒萍;;血液系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞來源膜微粒的特征及生物學(xué)作用研究[A];第13屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

2 蔣爭凡;卞婕;翟中和;;非細(xì)胞體系誘導(dǎo)小鼠肝細(xì)胞核凋亡的超微觀察[A];第十次全國電子顯微學(xué)會(huì)議論文集（Ⅰ）[C];1998年

3 陳衛(wèi)銀;祝彼得;劉福友;馮雪梅;;參芎滴丸對(duì)急性腦梗死模型大鼠神經(jīng)細(xì)胞調(diào)亡的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

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5 綦淑芬;萬瑞香;姚如勇;;扇貝多肽對(duì)Hela細(xì)胞在紫外線損傷下的保護(hù)作用[A];第五屆全國自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

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10 吳耀輝;鄒萍;;Sunrivin基因沉默對(duì)K562細(xì)胞調(diào)亡影響的研究[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

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1 張?zhí)锟?細(xì)胞調(diào)亡的意義[N];中國人口報(bào);2002年

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1 羅曉明;載藥聚合物超細(xì)纖維作為腫瘤局部制劑的研究[D];西南交通大學(xué);2014年

2 王石;黃芪甲苷促進(jìn)血管新生的分子機(jī)制研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

3 宋楊;抗CD25單抗對(duì)腎移植患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞生存和功能改變影響的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 羅忠光;CRL E3泛素連接酶靶向新藥MLN4924在體內(nèi)外殺傷肝癌細(xì)胞的作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 肖林林;巨噬細(xì)胞對(duì)血管細(xì)胞的輻射旁效應(yīng)及其分子機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 張峰;戊型肝炎病毒基因4型在PLC/PRF/5細(xì)胞中的培養(yǎng)及其特征研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

7 陳鳳華;Tat-SmacN7融合肽對(duì)腫瘤細(xì)胞輻射增敏作用的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

8 虞志新;Th17/Treg失衡及其與中性粒細(xì)胞相互影響在ARDS發(fā)病中的作用和機(jī)制研究[D];江蘇大學(xué);2015年

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10 袁媛;let-7c介導(dǎo)c-Myc基因調(diào)控逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞多藥耐藥的機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2015年

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1 王帥帥;Marc-145細(xì)胞中豬繁殖與呼吸綜合癥病毒粒子與胞外體的分離與鑒定[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 杜文娟;NK-lysin通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制肝癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 張曉嬌;天然抗氧化劑對(duì)乳腺癌MCF-7/ADM細(xì)胞的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

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9 邢曉萌;白藜蘆醇對(duì)肺癌A549細(xì)胞的放射增敏作用及其機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

10 曹曰針;胞外泛素對(duì)Treg細(xì)胞免疫抑制活性的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：1291312