本文關(guān)鍵詞：腸道微生物相互作用的研究及體外腸道模擬系統(tǒng)的構(gòu)建和應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 腸道微生物 qPCR 菌群平衡 模擬腸道系統(tǒng) 腸道微生態(tài)

【摘要】：腸道微生物能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫力,改善腹瀉。腸道是腸道微生物賴(lài)以生存的環(huán)境,腸道微生物的含量占整個(gè)人體微生物含量的78%,是臨床研究的重點(diǎn)[1,2]。能夠影響腸道微生物的因素主要有4個(gè)方面:第一,人體自身的因素;第二,人體攝入的飲食;第三,細(xì)菌自身因素;第四,腸道微生物之間的相互作用。而腸道微生物的相互作用最為主要、復(fù)雜,為科研研究的重點(diǎn)。為了研究腸道微生物,我們引入了腸道微生物模擬系統(tǒng)。體外腸道模擬模型是基于對(duì)人體體內(nèi)消化道的仿生模擬而建立,用來(lái)培養(yǎng)單種或多種微生物的培養(yǎng)系統(tǒng)。綜上所述,為了研究腸道微生態(tài)系統(tǒng),我們做了兩方面工作:研究腸道微生物的相互作用,構(gòu)建模擬腸道系統(tǒng)及應(yīng)用。具體實(shí)驗(yàn)如下:利用qPCR(Quantitative Polymerase Chain Reaction)檢測(cè)腸道微生物:首先設(shè)計(jì)經(jīng)過(guò)分離得到的鼠李糖乳桿菌、納豆芽孢桿菌、保加利亞乳桿菌、干酪乳桿菌、糞腸乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、唾液乳桿菌的qPCR引物,保證了qPCR檢測(cè)的特異性。然后將上述腸道微生物混合培養(yǎng),用得到的qPCR引物檢測(cè)混合培養(yǎng)體系中每一種腸道微生物的活菌數(shù)。結(jié)果為:發(fā)酵乳桿菌為4.1×107CFU/mL,唾液乳桿菌為2.2×107 CFU/mL,納豆芽孢桿菌為0.8×107 CFU/mL,植物乳桿菌為2.3×107 CFU/mL,干酪乳桿菌為4.1×107 CFU/mL,保加利亞乳桿菌為2×107 CFU/mL,糞腸乳桿菌6.8×107 CFU/mL。可得出結(jié)論:qPCR通過(guò)特異性引物設(shè)計(jì)提高了檢測(cè)的特異性,qPCR能夠在混合腸道微生物體系中精準(zhǔn)檢測(cè)一種或多種腸道微生物的種類(lèi)和含量。為后續(xù)開(kāi)展研究腸道微生物的相互作用的研究提供技術(shù)保障。腸道微生物相互作用的研究:將分離得到的8種腸道細(xì)菌即:鼠李糖乳桿菌、保加利亞乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、糞腸乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、唾液乳桿菌、納豆芽孢桿菌兩兩混合培養(yǎng)測(cè)活菌數(shù)。與上述8種菌單菌發(fā)酵結(jié)果相比較,得到以下結(jié)論:糞腸乳桿菌對(duì)保加利亞乳桿菌、干酪乳桿菌、納豆芽孢桿菌生長(zhǎng)起促進(jìn)作用,納豆芽孢桿菌對(duì)唾液乳桿菌、鼠李糖乳桿菌生長(zhǎng)起抑制作用。并可做出如下推測(cè):推測(cè)糞腸乳桿菌可能分泌某種次級(jí)代謝產(chǎn)物促進(jìn)保加利亞、干酪乳桿菌,納豆芽孢桿菌生長(zhǎng);推測(cè)納豆芽孢桿菌可能分泌某種次級(jí)代謝產(chǎn)物抑制唾液、鼠李糖乳桿菌的生長(zhǎng)。模擬腸道系統(tǒng)的構(gòu)建及應(yīng)用:現(xiàn)有模擬腸道系統(tǒng)按照功能分類(lèi)主要可分為3類(lèi):人體腸道芯片、體外消化模型、人體型腸道微生態(tài)模擬系統(tǒng)。其中,實(shí)驗(yàn)?zāi)c道微生態(tài)系統(tǒng)更有利于實(shí)驗(yàn)室研究,我們的模擬腸道系統(tǒng)在其基礎(chǔ)之上進(jìn)行了改進(jìn),簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)、加入了原位培養(yǎng)系統(tǒng)。我們的模擬腸道系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于:在同等條件下獲得了更多的腸道微生物,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建的模擬腸道系統(tǒng)有四個(gè)部分:小型發(fā)酵罐、培養(yǎng)基及流加系統(tǒng)、廢液流出系統(tǒng)和動(dòng)力系統(tǒng)。通過(guò)模擬腸道系統(tǒng)得到的腸道微生物有43種,分別屬于乳桿菌屬、腸球菌屬、大腸桿菌屬、沙門(mén)氏菌屬、摩根氏菌屬。隨后我們利用腸道模擬系統(tǒng)研究了人體腸道微生物的種類(lèi)及豐度,所做的工作如下:我們將受試者進(jìn)行兩方面處理,讓受試者一周之內(nèi)大量食用高脂食物,檢測(cè)其腸道微生物,再讓該受試者一周內(nèi)食用素食檢測(cè)其腸道微生物,得到結(jié)果如下,一周大量食用高脂食物后,培養(yǎng)得到的腸道微生物主要有:腸球菌屬、大腸桿菌屬、乳桿菌屬、沙門(mén)氏菌屬、摩根氏菌屬。而一周大量食用素食后,培養(yǎng)得到的腸道微生物主要有:乳桿菌屬、腸球菌屬、大腸桿菌屬。得到了以下結(jié)論:短期內(nèi)大幅度更改飲食結(jié)構(gòu),腸道微生物種類(lèi)相對(duì)保持不變,高脂飲食可導(dǎo)致腸道內(nèi)有害菌增加。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R37

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙永娟;;肥胖和腸道微生物群[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2007年07期

2 武娜;朱寶利;;人體腸道微生物與健康[J];科學(xué);2013年02期

3 吳桂林;徐晶;;腸道微生物對(duì)動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝的影響[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;1993年02期

4 馮玉龍;;腸道微生物:人類(lèi)身體的一部分[J];科學(xué)世界;2010年08期

5 劉威;姚文;朱偉云;;人體與腸道微生物間的互惠共生關(guān)系[J];世界華人消化雜志;2006年11期

6 余章斌;郭錫熔;;重視腸道微生物組的研究[J];臨床兒科雜志;2013年04期

7 ;研發(fā)動(dòng)態(tài)[J];中國(guó)生物工程雜志;2014年07期

8 蔣婕;郭抗蕭;周賽男;張華玲;譚周進(jìn);;一種提取小鼠腸道中活體微生物的方法[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2013年05期

9 ;Science:通過(guò)移植腸道微生物可“傳染”肥胖[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2013年05期

10 黃秀艷;曾耀英;;腸道微生物群的病理生理學(xué)進(jìn)展[J];中國(guó)病理生理雜志;2014年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王繼華;杜叢;;動(dòng)物腸道微生物的相關(guān)研究[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

2 王俐;;雞的腸道微生物與其營(yíng)養(yǎng)的關(guān)系[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第六屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第八屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2000年

3 朱偉云;姚文;毛勝勇;;腸道微生物研究:從組成到功能——腸道健康功能微生物的研究進(jìn)展[A];第三屆第八次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集[C];2006年

4 陳漢清;高迪;汪冰;柴之芳;趙宇亮;豐偉悅;;氧化石墨烯對(duì)腸道微生物增殖及生物學(xué)功能的影響[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集——第35分會(huì)：納米生物醫(yī)學(xué)中的化學(xué)問(wèn)題[C];2014年

5 李彤彤;李?lèi)?ài)華;;應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)比較三種不同魚(yú)腸道微生物的群落結(jié)構(gòu)[A];中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)魚(yú)病專(zhuān)業(yè)委員會(huì)2013年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

6 姚琨;張日俊;;宿主腸道微生物群落多樣性和演替分析技術(shù)的演變和發(fā)展[A];第三屆第八次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集[C];2006年

7 閻桂玲;咼于明;袁建敏;;啤酒酵母甘露寡糖對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、腸道微生物及免疫的影響[A];家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技進(jìn)展——第二屆全國(guó)家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技研討會(huì)論文集[C];2007年

8 趙國(guó)先;趙興鑫;張振紅;賀永康;左曉磊;胡雪靜;;中草藥益生元對(duì)肉雞腸道微生物和形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[A];2010畜牧業(yè)與低碳經(jīng)濟(jì)科技論文集[C];2010年

9 徐良梅;李滿(mǎn)雨;單安山;;五味子提取物對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能和腸道微生物的影響[A];家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技進(jìn)展——第二屆全國(guó)家禽營(yíng)養(yǎng)與飼料科技研討會(huì)論文集[C];2007年

10 弓劍;任海軍;史彬林;閆素梅;王登峰;;殼聚糖對(duì)奶�？寡趸δ芗昂竽c道微生物數(shù)量的影響[A];第六次全國(guó)飼料營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 記者 吳春燕 通訊員 祝和平;人類(lèi)腸道微生物大清點(diǎn)[N];光明日?qǐng)?bào);2014年

2 記者 王小龍;調(diào)節(jié)腸道微生物可治療糖尿病和肥胖[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

3 記者 劉傳書(shū);人類(lèi)腸道微生物基因集數(shù)據(jù)庫(kù)問(wèn)世[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

4 常麗君;可依據(jù)腸道菌群將人群分為三類(lèi)[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 孫丙華;社群環(huán)境下的短尾猴腸道微生物群落結(jié)構(gòu)及適應(yīng)進(jìn)化[D];安徽大學(xué);2016年

2 王保紅;腸道微生物多樣性及其與人體代謝相關(guān)性的研究[D];浙江大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 范忠原;家養(yǎng)水貂腸道微生物多樣性分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 姚瑛瑛;高脂飼料及藥物干預(yù)對(duì)大鼠腸道微生物的影響[D];山西大學(xué);2014年

3 王丹;艾滋病合并丙肝感染者腸道微生物移位對(duì)機(jī)體免疫和肝功能的影響[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

4 趙晗旭;不同野生動(dòng)物腸道微生物多樣性分析及功能初步研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 尹金寶;四環(huán)素脅迫下小鼠腸道微生物群落變化及代謝毒理效應(yīng)研究[D];南京大學(xué);2014年

6 劉棟;野生與養(yǎng)殖大鯢腸道微生物多樣性分析及產(chǎn)酶活性研究[D];陜西理工學(xué)院;2016年

7 陳挺強(qiáng);香蕉低聚糖的通便功能評(píng)價(jià)及其對(duì)腸道微生物的影響研究[D];華南理工大學(xué);2016年

8 梁穗莎;基于二代測(cè)序技術(shù)的大腸癌發(fā)展過(guò)程中腸道微生物變化研究[D];華南理工大學(xué);2016年

9 杜向禹;基于無(wú)菌小鼠研究腸道微生物對(duì)抑郁行為的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

10 舒山;Wilson病患者腸道微生物多樣性及其與臨床相關(guān)性分析[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：1281265