大鼠脊髓神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷中鈣敏感受體對(duì)其凋亡的影響及意義
發(fā)布時(shí)間:2017-12-07 13:12
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【摘要】:目的探究大鼠脊髓神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷中鈣敏感受體對(duì)其凋亡的影響及意義。方法將新生SD大鼠脊髓神經(jīng)元隨機(jī)分為正常對(duì)照組、缺氧復(fù)氧組、激動(dòng)劑(Gd Cl3)組和抑制劑(NPS-2390)組4組。采用95%氮?dú)馔ㄈ胫糜屑?xì)胞培養(yǎng)板的密閉通氣盒中15 min,37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1 h,再用含2%B27、10%胎牛血清的Neurobasol-A液培養(yǎng)細(xì)胞24 h復(fù)制缺氧復(fù)氧模型。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)鑒定脊髓神經(jīng)元并觀察鈣敏感受體的表達(dá)定位,Western blot法檢測(cè)各組鈣敏感受體及凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表達(dá)水平,激光共聚焦顯微鏡測(cè)定細(xì)胞內(nèi)游離鈣的變化,Tunel法觀察各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果缺氧復(fù)氧組的鈣敏感受體(t=5.462,P=0.006)、細(xì)胞內(nèi)游離鈣(t=8.573,P=0.001)、細(xì)胞凋亡(t=4.899,P=0.008)、Caspase-3(t=5.118,P=0.007)和Bax(t=10.930,P=0.001)表達(dá)水平均明顯高于對(duì)照組,激動(dòng)劑組的鈣敏感受體(t=4.975,P=0.008)、細(xì)胞內(nèi)游離鈣(t=4.899,P=0.008)、細(xì)胞凋亡(t=7.746,P=0.002)、Caspase-3(t=4.776,P=0.009)和Bax(t=5.281,P=0.006)表達(dá)水平均明顯高于缺氧復(fù)氧組,抑制劑組的鈣敏感受體(t=3.674,P=0.021)、細(xì)胞內(nèi)游離鈣(t=3.846,P=0.018)、細(xì)胞凋亡(t=4.281,P=0.013)、Caspase-3(t=3.521,P=0.024)和Bax(t=3.473,P=0.026)表達(dá)水平均明顯低于缺氧復(fù)氧組;缺氧復(fù)氧組的Bcl-2表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組(t=6.242,P=0.003),激動(dòng)劑組明顯低于缺氧復(fù)氧組(t=3.028,P=0.004),抑制劑組明顯高于缺氧復(fù)氧組(t=2.840,P=0.047)。結(jié)論在缺氧復(fù)氧損傷過(guò)程中,鈣敏感受體表達(dá)增多,細(xì)胞內(nèi)游離鈣增加,脊髓神經(jīng)元凋亡增多。
【作者單位】: 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)與臨床醫(yī)學(xué)研究中心;
【分類號(hào)】:R651.2
【正文快照】: 脊髓缺血再灌注損傷是指在短時(shí)間脊髓血供中斷,一定時(shí)間內(nèi)恢復(fù)血供,在原有缺血性損害基礎(chǔ)上發(fā)生更嚴(yán)重的損傷[1]。鈣超載是引起缺血再灌注損傷的主要機(jī)制。鈣離子在正常生理情況下是脊髓神經(jīng)元的重要信號(hào)分子,調(diào)節(jié)其諸多功能,而在缺血再灌注損傷中,鈣離子在胞內(nèi)積聚,往往導(dǎo)致
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1 蔣潤(rùn)宇;鈣敏感受體在大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的表達(dá)變化及其意義[D];江蘇大學(xué);2016年
,本文編號(hào):1262498
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