益生性乳酸菌的分離篩選及對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性肝損傷保護(hù)作用的研究
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【摘要】:乳酸菌因其多種優(yōu)越的性能而被研究者關(guān)注。本研究首先從奶制品中分離乳酸菌,并根據(jù)乳酸菌的菌落形態(tài)特征、過(guò)氧化氫酶接觸試驗(yàn)以及革蘭氏染色試驗(yàn)對(duì)乳酸菌進(jìn)行初步鑒定。再利用16S rDNA序列分析、生理生化特性以及碳水化合物發(fā)酵試驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。然后通過(guò)人工胃液耐受力、膽鹽耐受力以及粘附能力試驗(yàn)進(jìn)行益生性乳酸菌的初步篩選。最后用篩選的6株乳酸桿菌灌胃小鼠,LPS/D-GalN誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷,通過(guò)觀察小鼠的體重、肝臟的病理變化及重量,檢測(cè)小鼠外周血以及肝臟中AST與ALT的分泌量,肝臟與小腸中TNF-α與IL-6的表達(dá)量,研究這6株乳酸桿菌對(duì)LPS/D-GalN誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)效果。結(jié)果顯示:1.從奶制品中共分離出107株乳酸菌,屬于17個(gè)種。其中乳酸桿菌71株屬于9個(gè)種,乳酸球菌36株屬于8個(gè)種:Lactobacillusbrevis、Lactobacillus paracasei subsp.paracasei、Lactobacillus gallinarum、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus helveticus、Lactobacillus plantarum subsp.argentoratensis、Lactobacillusdelbrue、、Lactobacillus diolivorans、Pediococcus pentosaceus、Enterococcus faecalis、Leuconostoc mesenteroides、Pediococcus acidilactici、Pediococcus.sp、Enterococcus.p、Lactococcus.sp、Leuconostoc.sp。這17種乳酸菌中有88.3%為同型發(fā)酵乳酸菌,11.7%為異型發(fā)酵乳酸菌,部分菌株可以在低pH、高鹽、低溫、高溫的條件下生長(zhǎng)。3.對(duì)139株乳酸菌進(jìn)行耐人工胃液(pH=3.0)、耐膽鹽以及粘附Caco-2細(xì)胞的試驗(yàn),共篩選出6株具有較強(qiáng)耐受和粘附能力的的乳酸桿菌,它們分別是:L.paracasei subsp.paracasei WXD5、L.casei SXJ30、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD55、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD100、L.subsp.argentoratenis WXD106、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD101。4.研究 WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30 這 6 株乳酸菌對(duì)LPS/D-GalN誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷保護(hù)作用。結(jié)果顯示,與模型組相比,灌胃乳酸菌 WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30 的小鼠肝臟病變程度得到不同程度的緩解,AST、ALT、IL-6以及TNF-α因子的表達(dá)量也顯著下降,且以灌胃乳酸菌WXD5保護(hù)效果最為明顯,可以為急性肝損傷的研究提供技術(shù)支持與理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R575
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,本文編號(hào):1256655
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