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板栗殼斗鞣花單寧及其代謝產(chǎn)物鞣花酸和尿石素的生物活性研宄

發(fā)布時間:2017-08-06 21:18

  本文關(guān)鍵詞:板栗殼斗鞣花單寧及其代謝產(chǎn)物鞣花酸和尿石素的生物活性研宄


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【摘要】:板栗(Castanea mollissima Blume),屬殼斗科栗屬(Fagaceae),又名栗子、風(fēng)栗、瑰栗等。板栗殼斗為板栗的帶刺毛殼,又稱板栗總苞。隨著板栗產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,板栗殼斗等板栗副產(chǎn)物的產(chǎn)量也在大幅增加,但目前尚未得到有效利用,大部分板栗殼斗被作為廢棄物拋棄,造成極大資源浪費(fèi)。研究表明,板栗殼斗中富含多酚類抗氧化劑,其中以鞣花酸含量尤其豐富。鞣花酸廣泛分布于板栗、石榴、草莓、黑莓及胡桃等水果或堅果中,自然界中主要以其縮合形式——鞣花單寧存在。鞣花單寧和鞣花酸均具有抗氧化、抗炎、抗癌及調(diào)節(jié)腸道菌群等多種生物活性,對癌癥、糖尿病、心腦血管疾病和神經(jīng)性病變等慢性疾病具有潛在的抑制作用。然而鞣花單寧和鞣花酸在哺乳動物胃腸道的吸收極差,生物利用度低,在組織和血液中的濃度往往不足以達(dá)到其發(fā)揮生物活性的濃度,而部分未被吸收的鞣花酸則在哺乳動物胃腸道菌群的作用下代謝成更容易吸收的尿石素類物質(zhì)。因此,近年來關(guān)于尿石素的生物活性研究、體內(nèi)代謝和組織分布受到了越來越廣泛的關(guān)注。本論文以板栗殼斗為原料,首先構(gòu)建了板栗殼斗總鞣質(zhì)的提取純化方法,然后建立了尿石素A,B,C的合成路線,在此基礎(chǔ)上系統(tǒng)比較了板栗殼斗多酚、鞣花酸和尿石素A,B,C的ABTS自由基清除活性和總還原力的差異,并進(jìn)一步采用細(xì)胞抗氧化活性模型評價了其細(xì)胞抗氧化活性,最后評價了其在聚丙烯加工中的抗氧化作用,主要結(jié)果如下:(1)優(yōu)化了板栗殼斗總鞣質(zhì)的提取和富集方法,結(jié)果顯示以50%乙醇為提取溶劑時,板栗殼斗總鞣質(zhì)的提取率最高,而采用大孔樹脂吸附、50%乙醇梯度洗脫的方法,可以大幅提高板栗殼斗總鞣質(zhì)的純度;(2)構(gòu)建了尿石素A,B,C的合成路線。通過溴化反應(yīng)、醛基氧化反應(yīng)、銅催化的偶聯(lián)酯化反應(yīng)和去甲基化反應(yīng)等有機(jī)化學(xué)反應(yīng),構(gòu)建了尿石素A,B,C的合成路線。分別合成了10g尿石素A、尿石素B和尿石素C,純度均為96%以上。尿石素A為淡黃色或類白色固體粉末,尿石素B為淺粉色或類白色固體粉末,尿石素C為淺灰色或類白色固體粉末。(3)系統(tǒng)比較了鞣花酸和尿石素A,B,c的自由基清除活性與總還原力。鞣花酸及其代謝產(chǎn)物表現(xiàn)出的抗氧化活性的差異十分明顯,在體外抗氧化實(shí)驗(yàn)中,鞣花酸、尿石素c、尿石素A和尿石素B的抗氧化活性依次遞減,這表明鞣花酸在體內(nèi)經(jīng)過腸道菌群代謝之后,其抗氧化活性是不斷降低的。(4)比較了板栗殼斗多酚、鞣花酸和三種尿石素的細(xì)胞抗氧化活性、細(xì)胞增殖抑制活性。細(xì)胞增殖抑制活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),鞣花酸和板栗殼斗多酚較強(qiáng)的抗氧化作用能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖,隨著濃度的增加,細(xì)胞的存活率增加。低濃度(小于100 μg/mL)的尿石素沒有細(xì)胞增殖抑制活性,但是隨著濃度的增高,尿石素A,B和c均表現(xiàn)出細(xì)胞增殖抑制活性,特別是尿石素c,使用300μg/mL的尿石素C處理24小時后人肝癌HepG2細(xì)胞存活率不到20%。細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),低濃度的尿石素c不能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,但是300 μg/mL的尿石素C能夠誘導(dǎo)約30%的人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡。(5)評價了鞣花酸和尿石素在聚丙烯加工過程中的抗氧化作用。為提高聚丙烯的抗氧化能力,在PP加工過程中,通常會添加一定濃度的抗氧劑,因傳統(tǒng)抗氧劑的生物安全性差,添加天然抗氧劑是近年來的發(fā)展趨勢。實(shí)驗(yàn)證明,添加鞣花酸、尿石素、富勒烯/Irganox 168、富勒醇/Irganox 16等樣品聚丙烯的氧化誘導(dǎo)期均小于1,而富勒烯(fullerene)、富勒醇(fullerenol)等納米材料對聚丙烯的加工有抗氧化作用。
【關(guān)鍵詞】:板栗殼斗 多酚 鞣花單寧 鞣花酸 尿石素 抗氧化活性
【學(xué)位授予單位】:北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:Q946
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-11
  • 1 引言11-24
  • 1.1 板栗殼斗多酚的研究進(jìn)展11-12
  • 1.2 鞣花單寧的研究進(jìn)展12-15
  • 1.2.1 鞣花單寧的抗氧化活性研究12-13
  • 1.2.2 鞣花單寧的體內(nèi)代謝過程簡介13
  • 1.2.3 尿石素的發(fā)現(xiàn)及鑒定13-15
  • 1.3 鞣花單寧代謝產(chǎn)物的生物活性15-22
  • 1.3.1 鞣花酸活性15-18
  • 1.3.2 尿石素活性18-22
  • 1.4 本研究的目的、意義及內(nèi)容22-24
  • 2 板栗殼斗鞣花單寧的提取純化及抗氧化研究24-32
  • 2.1 材料與方法24-26
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料24-25
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法25-26
  • 2.2 結(jié)果與討論26-30
  • 2.2.1 板栗殼斗總鞣質(zhì)含量測定26
  • 2.2.2 不同提取溶劑的優(yōu)化結(jié)果26-29
  • 2.2.3 HPD100大孔樹脂富集總鞣質(zhì)結(jié)果29-30
  • 2.3 小結(jié)30-32
  • 3 尿石素的有機(jī)合成32-45
  • 3.1 材料與方法32-33
  • 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料32
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法32-33
  • 3.2 結(jié)果與討論33-37
  • 3.2.1 尿石素A的有機(jī)合成33-36
  • 3.2.2 尿石素B的合成36
  • 3.2.3 尿石素C的合成36-37
  • 3.3 小結(jié)37-45
  • 4 鞣花酸及其代謝產(chǎn)物的抗氧化活性研究45-51
  • 4.1 材料與方法45-47
  • 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料45-46
  • 4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法46-47
  • 4.2 結(jié)果與討論47-50
  • 4.2.1 對DPPH自由基的消除作用47-48
  • 4.2.2 還原力的測定48-49
  • 4.2.3 ABTS自由基消除活性的測定49-50
  • 4.3 小結(jié)50-51
  • 5 ,

    本文編號:631485

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