將酶固定化在基材之上既可以使固定化的酶重復利用,降低酶的催化成本,又具有使酶在反應結(jié)束后容易與底物分離,避免酶對底物污染的優(yōu)點。聚合物材料因其低成本、易加工以及柔性等特點成為酶固定化的一種重要基材。但聚合物基材普遍存在表面能低和表面惰性的缺點,因此需要對基材表面進行改性以固定化酶。本論文基于可見光可控/活性接枝交聯(lián)聚合方法,設(shè)計了一種反應溫和且條件簡單的在聚合物基材表面固定化酶新方法,并對其固定化酶的應用進行了探究。該方法首先在聚合物基材表面種植光引發(fā)劑異丙基硫雜蒽酮（ITX）,之后在接枝有ITX的聚合物基材表面引發(fā)可交聯(lián)單體聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）的可控/活性接枝聚合。若在接枝過程前將單體溶液與酶相混合,接枝反應后即可實現(xiàn)酶在聚乙二醇（PEG）網(wǎng)布之中的原位網(wǎng)格固定。論文主要取得以下結(jié)果：1、探究了可見光可控/活性接枝交聯(lián)聚合的機理,并利用該反應在低密度聚乙烯（LDPE）膜表面分別通過三明治結(jié)構(gòu)以及凹槽結(jié)構(gòu)接枝PEG網(wǎng)布用以原位網(wǎng)格固定化脂肪酶,并使用該載酶膜催化合成葡萄糖棕櫚酸酯。通過控制接枝反應時間、單體溶液中PEGDA的含量以及接枝反應的加液量,可以對接枝厚度之范圍進行... 

【文章來源】：北京化工大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：156 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３交聯(lián)法固定化酶

越渙?又?酆匣?硌星杉霸詮潭ɑ??久鋼械撓τ茫崳?大于１０腫１時，ＡＦＭ將無法進行測量，因此使用ＳＥＭ測斷面的形式進行更厚的??ＰＥＧ網(wǎng)布層的測量。從圖２－３?（Ｃ）和（ｄ）可Ｗ看出，ＬＤＰＥ的膜厚為５０叫１１，??當使用凹槽法進行可見光福照后，？６０網(wǎng)布層的接枝厚度分別達到了２５?＾１１１１和??４３０?＾ｍ。除此之外，ＡＦＭ與ＳＥＭ可Ｗ觀察到接枝的ＰＥＧ網(wǎng)布層致密均勻，結(jié)??果又一次證明了該實驗的＂可控性＂。??ｌｉｒ］?Ｉ?ｖ＇Ｔ＂?Ｉ：�。�?￣??Ｂ．?Ｊ?Ｘｒ－？??．Ｉ?？?＊?……；＞■?￣—？?（ｉ?＜?ｉ。＼Ａ?興?？＇？?Ｗ?＂?？＇－?＂?、＊?＂?Ｗ；?ｆｃ＜??ｏｒｏｗＭｍ?ｌＱ＊�。睿恚保埃蓿酰�?１０°ａｍ－１０＾ｕｍ??■＾ＨＢｉ??‘??ｉｍｗ—Ｍｉｗ?山酶??圖２－３不同接枝厚度范圍內(nèi)的厚度測試圖案：（ａ）?１０－１—ｌ〇Ｖｍ的ＡＦＭ圖案；（ｂ）?Ｗ—??１〇｜?ｆｉｍ的ＡＦＭ圍案；（Ｃ）?１〇１－１〇２畔的化Ｍ斷面困；（ｄ）?ｌＯＭＯ］仲的化Ｍ斷面圖。??Ｆｉｇ．?２－３?ＡＦＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｆｂｒ?ｐａｔｔｅｒｎｅｄ?ＰＰＬ?ｌｏａｄｅｄ?ｆｉｌｍ?ｗＵｈ?化ｅ?ｔｈｉｃｋｎｅｓｓｅｓ?ｓｃａｌｅ?ｏｆ?（ａ）?１〇－１—１０〇??叫ｎ，?（ｂ）?１０〇?—ｌ〇ｉ?｜ｘｍ，ａｎｄ?化?ｅ?ｃｒｏｓｓ－ｓｅｃｔｉｏｎａｌ?ＳＥＭ?ｖｉｅｗｓ?ｏｆ?ＰＰＬ?ｌｏａｄｅｄ?巧?Ｉｍ?ｗｉ化化ｅ?化ｉｃｋｎ巧化ｓ??ｓｃａｌｅ?ｏｆ?似?１０，一１０＾?（ｉｍ，?（ｄ）?１０＾?—１０＾?＼ｘｍ．??２．?３．１．?２巧合＂活性＂研究??根據(jù)接枝聚合＂活性＂的特點

后被搜集起來。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，結(jié)束反應結(jié)束后大約６％的酶沒有固定在膜上。??為了進一步表征ＰＰＬ在ＰＥＧ網(wǎng)布中的分布，使用羅丹明ｂ將圖案化酶膜染??色。圖２－７顯示了使用ＣＬＳＭ表征的酶膜圖案化網(wǎng)布層Ｈ維巧光圖像。圖中可??１＾＾＞清晰地看出圖案化接枝厚度為６８?４〇１。更重要的是，由于羅丹明１＞只作用于酶??而不作用于Ｐ?（ＰＥＧＤＡ），均勻的柱狀紅色巧光可レ：Ｕ正明酶被均勻的網(wǎng)格固定在??了?ＰＥＧ網(wǎng)布中。???■??圖２－７羅丹明ｂ染色的圖案化酶膜的ＣＬＳＭ圖。??３３??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3557883