研究背景:成體神經干細胞通常是以靜息和激活兩種可互相轉換但截然不同的狀態(tài)存在。神經干細胞靜息/激活一旦失衡可能導致衰老和病理條件下神經再生的異常,造成腦機能減退、認知能力受損、神經退行性疾病以及腫瘤的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)腦組織損傷后,靜息的神經干細胞被大量激活,迅速增殖,以實現(xiàn)神經再生和維持正常腦功能。但過度的增殖,往往造成干細胞庫的耗竭,導致神經再生能力的永久喪失。機體如何調控腦組織損傷后靜息/激活之間的平衡,以維持干細胞庫的穩(wěn)態(tài),保證持久的神經再生能力,促進組織損傷修復是目前研究的熱點。有研究表明腦缺血損傷或病毒感染時內源性干擾素表達增加,誘導靜息干細胞激活,促進干細胞增殖,實現(xiàn)組織損傷后修復;另一方面已證實骨形成蛋白（BMP）信號通路能夠維持包括成體神經干細胞在內的多種干細胞靜息,實現(xiàn)干細胞庫的穩(wěn)態(tài)。BMP在神經干細胞靜息激活中發(fā)揮重要作用。抑制BMP信號通路可部分恢復老年小鼠神經干細胞增殖能力,促進神經再生,逆轉衰老誘發(fā)的腦病變。Ⅰ型干擾素家族成員干擾素β（IFNβ）作為免疫調節(jié)細胞因子,在腦環(huán)境穩(wěn)態(tài)維持、衰老和神經退行性疾病的調節(jié)中發(fā)揮重要作用。阻斷腦內Ⅰ型干擾素信號通路可部分恢復... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ｈＮＳＣ神經干性鑒定??Ａ：?ｈＮＳＣ?ＳＯＸ２免疫熒光染色結果Ｂ：?ｈＮＳＣ?ｎｅｓｔｉｎ免疫熒光染色結果標尺＝５０?ｎ?ｍ??

?山西醫(yī)科大學博士學位論文???Ａ?ＤＡＰＩ?ＳｌＯＯ－ｂｃｔａ?Ｔｕｊｌ??■■■■??Ｂ?ＤＡＰＩ?ＳｌＯＯ－ｈｃｔａ?Ｔｕｊｌ??■■■■??圖１－２?ｈＮＳＣ多向分化能力的鑒定??Ａ：誘導神經分化后ＳｌＯＯ－ｂｅｔａ、Ｔｕｊｌ免疫熒光染色結果Ｂ：誘導膠質分化后ＳｌＯＯ－ｂｅｔａ、Ｔｕｊｌ免??疫熒光染色結果標尺＝５０?ｕ?ｍ??Ｆｉｇ?１－２?Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｈＮＳＣｓ?ａｂｏｕｔ?ｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ?ａｂｉｌｉｔｙ??Ａ：?Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＳＩ?００－ｂｅｔａ?ｖ?Ｔｕｊｌ?ｉｎ?ｈＮＳＣ?ａｆｔｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ?ｔｏ?ｎｅｕｒｏｎ，?Ｂ：??Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＳＩ?００－ｂｅｔａ?ｖ?Ｔｕｊｌ?ｉｎ?ｈＮＳＣ?ａｆｔｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ?ｔｏ?ａｓｔｒｏｃｙｔｅ，?Ｂａｒ＝５０｜ｊｉｎ??干細胞定向分化能力的評判指標［２９］。通過ｌ｜ｉＭ?ＲＡ＋?５｜ｉＭ?Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ、５０ｎｇ／ｍｌ?ＢＭＰ４??＋１０４?ｕｎｉｔｓ?ＬＩＦ分別誘導神經千細胞向神經元和膠質細胞分化，細胞Ｔｕｊｌ和Ｓ１００－??ｂｅｔａ免疫熒光染色顯示神經于細胞是否定向分化為神經元或膠質細胞，從而判斷神經??千細胞是否具有多向分化潛能。圖１－２Ａ結果顯示在ＲＡ＋?Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ處理下大部分細??胞為Ｔｕｊｌ免疫染色強陽性，說明人源神經千細胞可以誘導分化為神經元。圖１－２Ｂ結??果顯示在ＢＭＰ４?＋?ＬＩＦ處理下大部分細胞表現(xiàn)為Ｓ１００－ｂ

ｇ／ｍｌ、５０ｎｇ／ｍｌ）處理ｈＮＳＣ?５天后，結果顯示，ＦＧＦ組細胞胞體??小，立體發(fā)亮．，顏色發(fā)黑，細胞正常生長；ＢＭＰ４處理的細胞都發(fā)生形態(tài)變化，體積??變大，顏色變淺，伸出細長突起（＿１－３）。與ＦＧＦ對照組相比，ＢＭＰ４處理細胞數(shù)??目均減少，２０ｎｇ／ｍｌ?ＢＭＰ４處理細胞數(shù)目減少顯著。??２０ｎｇ／ｍｌ?ＦＧＦ?和?２?種濃度?ＢＭＰ４?（２０ｎｇ／ｍｌ、５０ｎｇ／ｍｌ）配比處理?ｈＮＳＣ?５?天后，結果??顯示，２種濃度ＢＭＰ４處理均能改變細胞形態(tài)，細胞變化與之前一致（圖１－３）。再??一次說明神經千細胞對ＢＭＰ４處理產生了反應。２種濃度ＢＭＰ４?（２０ｎｇ／ｍｌ、５０ｎｇ／ｍｌ）??與高濃度ＦＧＦ配比均能使細胞數(shù)目減少。結果提示ＢＭＰ４抑制人源神經干細胞的生??長．ａ??ＢＭＰ?４??ｎｇ／ｍｌ?２（）ｎ＾ｍｌ?５０?叩／ｍｌ??■■■??１—??圖１－３?ＢＭＰ４與ＦＧＦ不同配比對ｈＮＳＣ細胞形態(tài)的影響標尺＝５０叫ｉ??Ｆｉｇ?１－３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＢＭＰ４／?ＦＧＦ?ｏｎ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｈＮＳＣｓ?Ｂａｒ＝５０｜ｘｍ??２．２．２?ＢＭＰ４對ｈＮＳＣ細胞周期的影卩向??既然ＢＭＰ４囡＇子的加入使得細胞形態(tài)改變，生長減慢，那么是否對細胞周期產生??擧響？為解決■上述問．題，我們收：集正常生長和ＢＭＰ４處理的細胞、，扉定＊用Ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ??ｉｏｄｉｄｅ染料染色，流式細胞分析檢測細胞周期的變化。從流式分析圖發(fā)現(xiàn)，正常增殖??的人源神經千細胞〇３－＆期所在的峰（第一個紅色的峰）峰值低，面積小，說明處于??這個時期的細胞數(shù)少，而且Ｇ２／Ｍ期所在的峰可見，具有一定的


本文編號：3543801